程建
- 作品数：6 被引量：37H指数：4
- 供职机构：复旦大学上海医学院更多>>
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- MnSOD基因转染对SGC79001胃癌细胞增殖的影响被引量：14
- 2004年
- 目的 观察改变胞内MnSOD基因表达水平对SGC7901胃癌细胞增殖的影响。方法 采用电穿孔方法将反义和正义MhSOD cDNA真核表达载体pHβA-SOD(-)/pHβA-SOD(+)转染SGC7901胃癌细胞,400mg/LG418筛选稳定表达克隆并用RT-PCR及Western杂交法鉴定后扩大培养。用pHβA空质粒转染作为对照。放射免疫法检测正义、反义及空载SGC7901胃癌细胞株内的铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD,SOD1)蛋白含量。分别用直接细胞计数法、四唑蓝(MTT)比色法、平皿克隆形成率试验及裸鼠移植瘤模型测定3组细胞在体外、体内的增殖活性。结果 与空载组(Vector—7901)相比,转染正义质粒的MnSOD-7901胃癌细胞呈现抑增殖效应:(1)生长曲线示增殖速度减慢;(2)在平皿上的集落形成能力下降;(3)在裸鼠体内的成瘤性明显受抑制。转染反义质粒的MnSOD-AS7901胃癌细胞则出现促增殖效应:(1)生长曲线示增殖速度加快;(2)在平皿上的集落形成率上升;(3)裸鼠移植瘤生长加速。结论 通过基因转染提高胞内MnSOD的表达可抑制胃癌细胞的增殖,MnSOD可能是胃癌基因治疗的一个新靶点。
- 陈坚林庚金唐峰朱虹光钱立平程建刘珊林
- 关键词：MNSOD基因转染胃癌癌细胞增殖基因表达超氧化物歧化酶
- 缺氧和活性氧对肝癌细胞生长和糖代谢的影响及作用机制研究
- 目的:阐明在缺氧和富氧条件下糖酵解相关基因表达变化及对肿瘤细胞和正常细胞增殖的影响,探索ROS介导肝癌细胞代谢及对相关基因表达和酶活性的调节作用.结论:1:肿瘤细胞较正常细胞具有更强的缺氧耐受性.2:缺氧条件下,糖酵解途...
- 程建
- 关键词：缺氧糖代谢糖酵解活性氧缺氧诱导因子-1
- 文献传递
- 缺氧应激对肝癌细胞代谢信号通路的调节作用被引量：12
- 2006年
- 通过实验阐明在缺氧条件下糖酵解相关基因表达的变化规律及对肿瘤细胞和正常细胞增殖的影响,并探索活性氧(ROS)介导肝癌细胞代谢途径及对相关基因表达和酶活性的调节作用.以SMMC-7721人肝癌细胞和L02正常肝细胞作为研究对象,分别在单纯缺氧及加葡萄糖缺氧条件下,观察细胞生长,并检测糖代谢关键酶:丙酮酸激酶(pyruvate-kinase,PK)、己糖激酶(hexokinase,HK)、琥珀酸脱氢酶(succinic dehydrogenase,SDH)、异柠檬酸脱氢酶(isocitric dehydrogenase,IDH)mRNA表达水平和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性.还检测了pkb基因及缺氧诱导因子hif-1的表达.实验结果说明:a.肿瘤细胞较正常细胞具有更强的缺氧耐受性;b.缺氧条件下,糖酵解途径的增强是保证肿瘤细胞能快速增殖的机制之一;c.ROS通过HIF-1介导了糖代谢通路相关酶的基因表达,参与肝癌细胞缺氧信号通路调节,用抗氧化剂干预可以降低肿瘤细胞的缺氧耐受能力.
- 施冬云刘珊林李浩然沈新南俞培忠程建龚兴国
- 关键词：缺氧糖酵解活性氧肝癌
- 锰型超氧化物岐化酶基因转染抑制SGC7901胃癌细胞增殖的机制被引量：9
- 2005年
- 目的:我们已经报道锰型超氧化物岐化酶(MnSOD)高表达可明显抑制SGC7901胃癌细胞的增殖,本研究拟进一步探索其中所涉及的分子机制.方法:利用DCFH-DA荧光染色方法检测正义、反义及空载SGC7901胃癌细胞株内的活性氧水平透射电镜下观察肿瘤细胞形态及细胞器结构改变.RT—PCR方法检测三者缺氧诱导因子HIF-1α的表达.结果:正义MnSOD-7901胃癌细胞胞内ROS下降,HIF-1α表达下调.反义组电镜下细胞形态明显小于正义组,正义组线粒体明显较反义组丰富,但两组线粒体均呈空泡状,缺少线粒体嵴.反义组核糖体明显较正义组丰富,内质网也略多.结论:MnSOD依赖的抑制胃癌细胞增殖途径与下调肿瘤的胞内ROS水平,下调HIF-1α的表达及改变细胞器的超微结构有关.
- 陈坚林庚金程建唐峰朱虹光刘珊林
- 关键词：基因转染抑制SGC7901胃癌细胞增殖
- 内源性活性氧水平及锰型超氧化物歧化酶的表达与胃癌细胞分化、增殖相关被引量：5
- 2003年
- 检测了不同分化的胃癌细胞株内MnSOD基因的表达及胞内活性氧(ROS)的水平。同时通过基因转染观察上调或下调MnSOD基因表达对SGC7901胃癌细胞胞内ROS水平及增殖能力的影响。用电穿孔法将人反义和正义MnSOD cDNA 真核表达载体pHβA-SOD (-)/pHβA-SOD (+)转入7901细胞,用含G418的RPMI1640培养基筛选稳定表达克隆。然后用RT-PCR鉴定MnDSOD基因的表达。同时用RT-PCR方法检测正常胃粘膜组织及MKN-28、SGC7901、BGC823、HGC-27四株高、中、低、未分化胃癌细胞株内的MnSOD的mRNA表达。利用DCFH-DA荧光染色方法检测不同分化胃癌细胞株及7901转染细胞株内的ROS水平。四唑蓝比色法(MTT)绘制MKN-28、SGC7901、BGC823、HGC-27四株不同分化胃癌细胞及正义、反义、空载MnSOD转染7901细胞的生长曲线。发现不同分化胃癌细胞内的MnSOD普遍呈低表达且与分化程度平行,不同分化胃癌细胞株胞内ROS水平随着MnSOD表达的下调逐步上升,细胞增殖加快。较之MnSOD空载7901,正义、反义MnSOD转染的7901细胞中该基因的表达出现明显上调及下调,胞内ROS水平较对照细胞也相应有显著降低和升高。正义株增殖受抑,反义株增殖加快。表明胃癌细胞内MnSOD的表达与肿瘤的分化程度呈负相关。可通过改变胞内ROS水平改变MnSOD基因的表达,从而调节胃癌?
- 陈坚林庚金钱立平程建施冬云张亚东刘珊林
- 关键词：胃癌细胞增殖
- 抗氧化干预和活性氧对肝癌细胞生长的调节作用
- 刘珊林徐平吴超群施东云林万敏刘冠中陈坚张亚东程建
- 该研究组采用ESR、NMR、UV等波谱技术，量化多学科交叉，采用ESR自旋捕捉，及加羟基化合物，利用基因芯片技术对自由基介导并参与对肿瘤细胞的增殖和凋亡的调节，与正常肝细胞不同的机制进行了阐述。建立测定活细胞中活性氧的E...
- 关键词：
- 关键词：抗氧化肝癌信号转导
