王艳茹
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 供职机构：北京大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 三叶因子3的研究
- 2002年
- 王艳茹李令媛茹炳根
- 关键词：三叶因子3基因表达
- 人三叶因子3在毕赤酵母中表达条件的研究被引量：7
- 2001年
- 为提高人三叶因子 3 (HumanTrefoilfactor 3 ,hTFF3 )在毕赤酵母中的表达量 ,研究了转化子生长的培养条件 ,包括不同碳源对转化子生长的影响和接种量、甲醇浓度、pH值、摇瓶转速及不同诱导时间对人三叶因子 3表达的影响。结果表明转化子在生长阶段加入葡萄糖生长旺盛 ,培养 14h后OD6 0 0 就可达到 5 0。在 10 0mL生长培养基上的菌液以 1∶1接入诱导培养基时蛋白表达量最高 ;转化子在 1%的甲醇、pH6 0、摇瓶转速 2 4 0r min的条件下诱导4 8h ,菌体密度OD6 0 0 为 15 ,目的蛋白表达量达到 2 0mg L。用 5L发酵罐进行了高密度发酵 ,经 2 %甲醇 3 2h诱导 ,最终菌体密度OD6 0 0 达到 12 0 ,每升发酵液中含目的蛋白 10 0mg。
- 王艳茹方敏安琳李令媛茹炳根
- 关键词：三叶因子3毕赤酵母发酵
- 改变毕赤酵母信号肽对人三叶因子3表达的影响被引量：8
- 2002年
- 为了表达具有天然N 末端的人三叶因子 3,构建了含两种信号肽序列的毕赤酵母表达载体 ,其中一种表达载体在分泌信号肽序列α factor后保留STE13信号肽切割序列 ,另一种表达载体去除了该序列。将 2种表达载体分别转化到毕赤酵母GS115中进行表达。经甲醇诱导后目的蛋白分泌到发酵液上清中 ,SDS PAGE和Western印迹证明 2种重组蛋白均以二体的形式分泌表达 ,分子质量约为 13ku ,都能被TFF3抗体所识别。N 端氨基酸测序证明其中一个重组蛋白具有天然人TFF3的N端 ,质谱检测分子质量与天然蛋白一致 ;另一重组蛋白N 端则带有 2个未切割完全的信号肽序列GluAla ,质谱检测该蛋白中还含有部分切割完全的蛋白。
- 王艳茹安琳李令媛茹炳根
- 关键词：毕赤酵母信号肽三叶因子3甲醇酵母分泌
- 氨基－羧基端互换的黄色荧光蛋白的新用途
- 本发明公开了一种氨基－羧基端互换的黄色荧光蛋白的新用途。本发明的氨基－羧基端互换的黄色荧光蛋白可作为活性氧荧光蛋白指示剂。本发明还公开了一种能监测超氧阴离子变化的动物模型的构建方法。本发明的活性氧荧光蛋白指示剂可在细胞中...
- 程和平王显花陈敏郑铭方华强张宛睿王艳茹
- 文献传递
- 人三叶因子3及其N—端突变体的研究
- 在该论文的研究中,我们利用PCR方法在人胎儿胎盘cDNA中扩增了人三叶因子3基因,同时构建了三种三叶因子3N-端突变体,插入到含有AOX1启动子和α-factor信号肽序列的表达载体pPIC9K中,采用毕氏酵母表达系统对...
- 王艳茹
- 关键词：三叶因子3毕氏酵母基因表达消化道溃疡
- 人三叶因子3及其突变体的研究
- 三叶因子3(Trefoil factor3,TFF3)是一种胃肠道粘膜修复因子,它是三叶因子家族的成员之一,由59个氨基酸组成,分子中6个高度保守的半胱氨酸形成三个链内二硫桥,以Cys1～Cys5,Cys2～Cys4,C...
- 王艳茹口如琴苏云鹏李令媛俞梅敏茹炳根
- 文献传递
- 重组人三叶因子3对细胞的增殖及迁移的影响被引量：3
- 2002年
- 将重组人三叶因子 3(Trefoilfactor 3,TFF3)作用于人结肠肿瘤细胞 ,研究重组蛋白对细胞增殖的影响 ,结果发现该蛋白在较低的浓度 (10～ 5 0mg L)下对细胞的增殖基本没有影响 ,在 10 0～2 0 0mg L浓度下该蛋白对细胞仅有微弱的刺激作用 ,提高浓度对细胞增殖作用没有改变。同时研究了TFF3对损伤的单层结肠肿瘤细胞迁移的影响 。
- 王艳茹方敏安琳乔玮李令媛茹炳根
- 关键词：三叶因子3增殖迁移
- 氨基-羧基端互换的黄色荧光蛋白的新用途
- 本发明公开了一种氨基-羧基端互换的黄色荧光蛋白的新用途。本发明的氨基-羧基端互换的黄色荧光蛋白可作为活性氧荧光蛋白指示剂。本发明还公开了一种能监测超氧阴离子变化的动物模型的构建方法。本发明的活性氧荧光蛋白指示剂可在细胞中...
- 程和平王显花陈敏郑铭方华强张宛睿王艳茹
- 文献传递
- 人三叶因子3双结构域突变体的构建
- 2001年
- 利用基因工程方法在大肠杆菌-酵母穿梭质粒pPIC9K上构建了人三叶因子3(Human Trefoil Factor 3,hTFF3)双结构域突变体基因,采用毕氏酵母表达系统对目的基因进行了分泌表达.经S-Sepharose,Q-Sepharose,SephacrylS-100纯化后得到突变体蛋白,主要以单体形式存在.SDS-PAGE表明重组蛋白分子量约为12 000,并在Westernblotting印迹实验中证明能被抗hTFF3抗体所识别,N-端氨基酸测序与天然hTFF3一致,质谱检测纯化的蛋白出现单体和双本两种形式.用重组蛋白对乙醇诱导的大鼠胃溃疡进行实验治疗表明hTFF3双体突变体与天然形成的双本蛋同具有相同的活力,并且活力高于单体形式的hTFF3.
- 王艳茹任宏伟纪建国李令媛茹炳根
- 关键词：三叶因子突变体毕氏酵母重组蛋白生物活力
