公共文化服务平台

人Tumstatin功能区基因原核表达载体的构建: 2008年; 【目的】构建人肿瘤抑素(Tumstatin)功能区Tum-5原核融合表达载体pET42a-Tum5。【方法】根据人Tumstatin基因序列以及大肠杆菌密码子的偏爱性设计合成多个寡核苷酸,经PCR拼接获得Tum-5基因;酶切目的基因与pET42a载体,回收纯化后做定向克隆连接,转化E.coliDH5α;重组质粒通过PCR、BglⅡ与XhoⅠ的双酶切、DNA测序加以鉴定。【结果】重组质粒PCR扩增出的产物与目的基因大小相同;重组质粒双酶切电泳分析,插入片段大小约320 bp,与预期结果一致;对连接点两端进行测序,结果显示接头两端序列连接正确,插入序列与载体读码框架相匹配。【结论】成功构建人Tum-5基因表达载体,该研究为抗血管药物治疗实体瘤奠定了基础。; 王瑞珉王玮史娜谢红陈立军; 关键词：肿瘤抑素融合表达载体抗血管生成

芸香诱导K562细胞凋亡机制探讨被引量：2: 2006年; 目的研究芸香诱导白血病K562细胞凋亡过程中Caspase-3基因的表达。方法体外培养白血病K562细胞,生长曲线观察芸香对K562细胞的细胞抑制作用,MTT法观察芸香的细胞毒作用,测定IC50,Hoechst33342/PI双荧光染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞周期,RT-PCR观察Caspase-3的表达,CaspACETM分析系统检测Caspase-3酶活性。结果芸香浓度为2×10-5mol/L、4×10-5mol/L、8×10-5mol/L时,细胞生长受到显著抑制;不同浓度quercetin处理K562细胞48h后,IC50为4×10-5mol/L;Hoechst33342/PI双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现;流式细胞仪检测芸香处理后细胞发现G2期细胞显著增多(64.7%),DNA合成受抑,凋亡率增加;以Caspase-3基因和内参照β-actin序列设计引物,PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳,紫外透射仪下明显观察到约300bp条带;CaspACETM分析系统检测Caspase-3酶活性明显升高(P<0.05)。结论芸香诱导白血病细胞Caspase-3基因表达,细胞发生凋亡,caspase-3途径诱导凋亡是芸香作用机制之一。; 陈立军于利人靳秋月王瑞珉陈虹呼文亮; 关键词：芸香 CASPASE-3 细胞凋亡

芸香苷诱导K562细胞凋亡机制被引量：9: 2006年; 目的研究芸香苷诱导白血病K 562细胞凋亡过程中caspase-3基因及细胞色素C的表达。方法体外培养白血病K 562细胞,M TT法观察细胞毒作用,测定IC50,Hoechst 33342/P I双荧光染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞周期,TR IZOL试剂提取K 562细胞RNA,核酸定量仪检测纯度,RT-PCR扩增,紫外透射检测扩增产物,扩增产物测序,观察caspase-3的表达,4×1-0 5m o l/L药物处理细胞后,分离细胞线粒体和胞浆,经SDS-PAGE电泳分离蛋白,W estern b lotting检测线粒体、细胞浆细胞色素C表达。结果芸香苷浓度为2×1-0 5、4×10-5、8×10-5m o l/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;不同浓度芸香苷处理K 562细胞44h后,应用M TT比色法计算IC50为4×1-0 5m o l/L;4×10-5m o l/L芸香苷处理细胞24 h后,Hoechest 33342/P I双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现;流式细胞仪检测芸香苷处理后G2期细胞显著增多(64.7%),DNA合成受抑,凋亡率增加;PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳,紫外透射仪下明显观察到500 bp条带,产物经过序列测定证实芸香苷处理细胞诱导caspase-3基因的表达;W estern B lotting检测线粒体细胞色素C表达水平下调,细胞浆出现明显细胞色素C蛋白条带。结论芸香苷诱导K 562细胞caspase-3基因表达,细胞色素C通过线粒体膜进入胞浆,导致细胞线粒体功能异常,细胞发生凋亡,线粒体途径诱导白血病细胞凋亡是其作用机制之一。; 陈立军靳秋月王瑞珉王玮呼文亮陈虹; 关键词：芸香苷 CASPASE-3 细胞凋亡细胞色素C

Survivin反义寡核苷酸对5-FU诱导人红白血病细胞系K562凋亡的影响: 2006年; 【目的】探讨survivin反义寡核苷酸(Antisense Oligodeoxy-nucleotid,ASODN)对5-FU(5-氟尿嘧啶)诱导人红白血病细胞系K562细胞凋亡的影响。【方法】体外培养K562细胞,合成survivin ASODN并经脂质体转染至K562细胞内,MTT法观察survivin ASODN组、5-FU组及5-FU联合survivin ASODN的细胞毒作用,Hoechst33342/PI双荧光染色观察各组细胞核形态,镜下计算各组细胞凋亡率。【结果】400、600、800、1000nmol/L survivin ASODN处理K562细胞44 h后,IC50为800 nmol/L;与单独使用survivin ASODN或5-FU相比,5-FU联合800 nmol/L survivin ASODN后细胞生长明显受到抑制(P<0.01);Hoechest33342/PI双荧光染色可观察到survivin ASODN组、5-FU组及5-FU联合survivin ASODN组均出现明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现。镜下细胞计数,survivin ASODN组、5-FU组及5-FU联合survivin ASODN组细胞凋亡率分别为54.55%、53.85%、86.70%。【结论】Survivin ASODN可增强K562细胞对5-FU的敏感性。; 靳秋月王瑞珉谢红陈立军; 关键词：反义寡核苷酸 K562细胞

救援医学分子生物学课程特色化教改探究: 2011年; 近年来,各种自然灾害、恐怖主义人为破坏呈现逐年上升趋势,医学救援在各类突发事件中扮演的角色越发变得重要,国内院校也相继开设了救援医学相关专业[1,2].重庆医科大学从2004年开始招收救援医学方向本科生,中国人民解放军武装警察部队医学院于2007年首先开设了全国第一个本科层次的救援医学专业,填补了国内救援医学专业人才培养体系中的空白,且近年已在规范、完善救援医学专业的课程体系方面已做了初步尝试[3,4].不过,随着社会对救援医学专业人才的需求增加,救援医学教育面临了新的重大挑战：当前的救援医学专业教育总体上无论从认识阶段,还是从实践阶段上看,尚处在摸索、起步阶段,尤其是配套的特色课程体系还不完善.; 龚燕华王瑞珉姚丽樊嵘张新昌; 关键词：救援医学医学分子生物学课程标准

硫氧还蛋白系统与中枢神经系统疾病被引量：2: 2004年; 陈炯王瑞珉马勇呼文亮; 关键词：硫氧还蛋白硫氧还蛋白还原酶

几种中草药活性成分抗肿瘤研究: 陈立军于利人陈虹靳秋月呼文亮闫冬王火谢红李爱秀姚丽王瑞珉樊嵘王玮杨磊张东昌; 哥纳香醇甲是我国科学家从番荔枝科哥纳香属植物海南哥纳香根和茎皮中分离得到的一种化合物，近年发现其具有显著抗肿瘤活性；芸香苷是食物中常见的类黄酮物质，属黄酮醇类，为槲皮素衍生物。研究发现，黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿...; 关键词：; 关键词：抗肿瘤细胞凋亡芸香

芸香苷诱导Caspase-3在白血病细胞凋亡时的表达被引量：1: 2007年; 【目的】研究芸香苷诱导白血病K562细胞凋亡过程中Caspase-3基因的表达。【方法】体外培养白血病K562细胞,锥虫蓝拒染法观察芸香苷对K562细胞的生长抑制作用。Hoechst33342/PI双荧光染色后,观察细胞核变化。TRIzol试剂提取芸香苷组及对照组细胞RNA,核酸定量仪检测纯度,RT-PCR扩增,紫外透射检测扩增产物,扩增产物测序,观察Caspase-3 mRNA的表达。【结果】芸香苷浓度为2×10-5、4×10-5、8×10-5mol/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;RT-PCR产物经过序列测定证实经浓度为2×10-5mol/L、4×10-5mol/L的芸香苷处理后细胞诱导Caspase-3基因表达升高。【结论】芸香苷诱导白血病细胞发生凋亡,Caspase-3基因表达是其作用机制之一。; 陈立军靳秋月王玮王瑞珉呼文亮陈虹; 关键词：芸香苷 CASPASE-3 细胞凋亡 K562细胞

青蒿素及其衍生物抗肿瘤研究进展被引量：18: 2005年; 陈立军靳秋月于利人王瑞珉呼文亮; 关键词：青蒿素抗肿瘤作用中药材中药化学黄花蒿

姜黄素对前列腺癌LNCaP细胞PSA生成及AR表达的影响(英文)被引量：3: 2006年; 【目的】研究姜黄素对前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖的影响。【方法】化学发光法检测不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞株LNCaP后前列腺特异抗原(PSA)含量,利用荧光素酶报告基因pGL-3构建含PSA基因5’侧启动子区640 bp DNA的荧光素酶表达载体pGL3-PSA,并将其转染LNCaP细胞,不同浓度姜黄素作用24 h后应用荧光素酶测定系统检测荧光素酶表达活性。用免疫印迹Western-blotting技术检测雄激素受体(AR)的表达。【结果】姜黄素抑制LNCaP细胞培基中PSA蛋白及含PSA启动子的荧光素酶活性的表达;形态学结果显示姜黄素可抑制前列腺癌细胞LNCaP的增殖;Western-blotting技术检测结果显示姜黄素抑制AR的表达,并且对AR表达的抑制程度依赖于姜黄素的浓度。【结论】姜黄素对PSA启动子的影响及PSA蛋白表达的抑制作用是通过抑制雄激素受体(AR)的表达实现的,姜黄素能够抑制前列腺癌细胞LNCaP的增殖。; 杨磊陈立军谢红锁江蕊王洪敏牟心红靳秋月姚丽王瑞珉程世翔张莲英; 关键词：雄激素受体前列腺特异抗原启动子

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

王瑞珉

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

王瑞珉

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈