王晓樱
- 作品数：21 被引量：47H指数：4
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省学术和技术带头人培养资金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 多耐药临床分离株结核杆菌rpsL基因重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL的构建及其功能鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:构建多耐药临床分离株结核杆菌rpsL基因重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL及其功能鉴定。方法:制备临床分离株多耐药结核杆菌基因组DNA,PCR扩增该株结核杆菌rpsL基因,构建及鉴定该株结核杆菌rpsL基因重组穿梭质粒PMV261/rpsL,重组穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株及其鉴定。结果:成功地构建了重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL;重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株获得成功,并且重组质粒PMV261/rpsL电转化后的结核杆菌H37Rv株对链霉素耐药。结论:该临床分离株多耐药结核分支杆菌对链霉素耐药的机制仅仅是由于rpsL基因的93bp、94bp处碱基突变所致,耐药性是一个基因突变的结果,是单基因型。
- 张万江鲍朗邓喜玲吴芳曹旭东王晓樱
- 影响肺炎克雷伯菌粘附上皮细胞作用的研究
- 2014年
- 目的:研究不同理化及生物因素对肺炎克雷伯菌粘附宿主细胞的影响,探讨其粘附宿主细胞的可能机制。方法:用肺炎克雷伯菌临床分离株K.pnueumoniae 03183(K.p03183)建立粘附宿主细胞模型,通过结晶紫染色及扫描电镜观察其粘附效率;以不同理化及生物因素预处理K.p03183,平板菌落计数法观察上述因素对K.p03183粘附细胞的影响;用基因芯片技术,检测HMGN2蛋白预处理细菌对于其粘附相关基因表达的影响。结果:K.p03183可粘附至A549、T24、HeLa等3种上皮细胞系,其粘附率与E.coli 25992接近;氯化锂和盐酸胍、高碘酸钠及热预处理可明显降低K.p03183对于A549和T24的粘附率(P<0.05);同时,胃蛋白酶及HMGN2蛋白预处理K.p03183,也可抑制其对A549和T24的粘附(P<0.01);但胰蛋白酶预处理却能增加细菌对于A549细胞的粘附(P<0.05);同时,HMGN2还可通过上调dksA基因表达,从而干扰细菌粘附细胞。结论:肺炎克雷伯菌可能借助细胞壁及其表面蛋白和碳水化合物等成分粘附至宿主上皮细胞,通过非共价键结合表面蛋白或消除碳水化合物成分,抑制细菌粘附至宿主细胞。
- 李娜范波吴桂霞沈晓飞郑爽任来彬杨晓龙郭小娟王馨苑滕燕李婧瑜王晓樱黄宁
- 关键词：肺炎克雷伯菌粘附上皮细胞HMGN2
- 结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白间的相互作用被引量：1
- 2006年
- 目的观察结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白间的相互作用。方法采用PCR技术克隆结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10基因,构建酵母双杂交载体质粒pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10,经酶切分析和DNA测序证实连接片断的正确性后,采用醋酸锂法顺序转染酵母菌AH109。结果共转染pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10的酵母菌AH109可以在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp培养基上生长,β-半乳糖苷酶活性实验阳性。结论结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白可以相互作用。
- 李岩鲍朗张会东王晓樱朱海龙李娅莎
- 关键词：CFP-10酵母双杂交蛋白间相互作用结核分枝杆菌
- 结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的高效表达及免疫原性研究被引量：11
- 2006年
- 目的高效表达结核分枝杆菌6kDa早期分泌性抗原靶(6kDaearlysecretoryantigenictarget,ESAT6)和培养滤液蛋白10(culturefiltrateprotein10,CFP10)的融合蛋白,通过免疫动物,获得CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板,扩增cfp10-esat6融合基因,将其与表达质粒pET32a(+)构建成重组质粒pET-cfp10-esat6。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达带组氨酸标签的融合蛋白,经亲和层析得到纯化CFP10-ESAT6蛋白。用该蛋白免疫成年家兔,获得的抗CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体,作Western-blot和ELISA分析。结果重组质粒pET-cfp10-esat6构建成功,融合蛋白CFP10-ESAT6大量表达,多克隆抗体制备成功(1∶106)。结论成功构建并表达了CFP10-ESAT6融合蛋白,制备了大量的CFP10-ESAT6融合蛋白的多克隆抗体,为发展新型结核病疫苗和临床血清学检测奠定了实验基础。
- 王晓樱鲍朗赵明才张会东龙洋
- 关键词：结核分枝杆菌GST融合表达免疫原性
- 2010-2016年烧伤整形领域国家自然科学基金项目申请与资助情况分析被引量：4
- 2017年
- 自2009年9月国家自然科学基金（NSFC）委员会医学科学部成立以来，NSFC在医学科学基础研究上的投入不断增加，在推动医学基础研究、应用基础研究和医学科研人才的培养方面，取得了令人瞩目的成果。烧伤整形领域的NSFC项目，
- 张召才窦豆王晓樱谢登辉闫章才
- 关键词：烧伤外科国家自然科学基金
- MiR-155通过调节细胞骨架重排影响肺炎克雷伯菌对肺上皮细胞的粘附作用
- 目的：MicroRNAs(miRNAs)在细菌感染过程中对细胞免疫反应的作用逐渐受到重视.然而miRNAs 是如何发挥其调节功能并没有被完全澄清.方法及结果：本研究我们发现当肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneum...
- 滕燕沙凯辉杨晓龙田汉文许光亚刘可云张福梅熊峰王馨苑郭小娟苗峻铭王晓樱陈军利王祎李婧瑜黄宁
- 关键词：MIR-155整合素Α5Β1RAC1
- 利用基因芯片技术检测结核分枝杆菌耐药性的研究被引量：7
- 2002年
- 张万江鲍朗王晓樱于向华谢勇恩陈玮张会东
- 关键词：基因芯片技术结核分枝杆菌耐药性
- 结核分枝杆菌cfp10-esat6融合基因重组穿梭质粒的构建及其在BCG中的融合与分泌表达研究被引量：4
- 2006年
- 通过SOE法(重叠延伸,Genesplicingbyoverlapextension),扩增cfp10-esat6融合基因,与穿梭整合质粒pMV361构建成重组质粒。另将BCGα抗原(α-Ag)信号肽序列与上述重组质粒构建成另一重组质粒。将两种重组质粒分别导入BCG菌构建融合型重组卡介苗和分泌型重组卡介苗,热诱导后分析其表达产物。本研究成功构建并表达了CFP10-ESAT6融合及分泌表达的重组BCG,为发展新型结核病疫苗打下了一定的基础。
- 王晓樱鲍朗赵明才张会东龙洋
- 关键词：结核分枝杆菌卡介苗
- 结核杆菌检测基因芯片的制备研究
- 2001年
- 张万江鲍朗王晓樱谢勇恩陈玮张会东于向华
- 关键词：结核杆菌基因芯片
- 结核分枝杆菌Rv0901基因重组耻垢分枝杆菌的构建及其细胞作用被引量：1
- 2007年
- 目的 对结核分枝杆菌Rv0901基因的功能进行研究。方法 以PCR扩增Rv0901基因编码序列，定向克隆人穿梭表达质粒pMV261获得重组穿梭表达质粒，将重组质粒电穿孔进入耻垢分枝杆菌，构建重组Rv0901基因的耻垢分枝杆菌，对重组耻垢分枝杆菌进行诱导表达，用SDS-PAGE检测表达结果。比较耻垢分枝杆菌和重组耻垢分枝杆菌对THP-1细胞的不同作用。结果 成功构建重组穿梭表达质粒及重组Rv0901基因的耻垢分枝杆菌，重组菌诱导THP-1细胞的凋亡率高于耻垢分枝杆菌，其感染THP-1细胞后细胞的存活率低于耻垢分枝杆菌的感染，重组菌感染THP-1细胞后细胞培养液中NO（一氧化氮）的产生高于耻垢分枝杆菌的感染。结论 Rv0901基因可能与结核毒力存在一定关系。
- 钟琪鲍朗吴悦涵李岩王晓樱商正玲张会东
- 关键词：结核分枝杆菌重组耻垢分枝杆菌
