王宇
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- 端粒酶催化亚基基因在小鼠胚胎发育早期的转录活性
- 2005年
- 用RT-PCR引物分别扩增成年昆明(KM) 小鼠睾丸、脾脏、肾脏、肝脏和胸腺组织的总RNA发现,端粒酶催化亚基基因tert在这些组织中都有转录,目标产物正确组装到PMD 18-T载体后测序,结果与已知cDNA序列一致. PMSG/hCG超数排卵方法获得KM小鼠成熟卵母细胞和CZB溶液体外培养的胚胎(KM ♀×KM♂),用酸性Tyrode蒺s溶液消化透明带后,采用巢式RT-PCR,同时分析tert基因和持家基因hprt的转录发现,对于单个样品来说, 全部卵母细胞(15 h-post hCG,10/10) 都存在hprt转录本,其中,只有40%(4/10) 还同时存在tert转录本. 原核形成初期(20 h-post hCG,6/6) 和原核晚期(30 h post-hCG,8/8) 的受精卵,以及发育至2-C早期的胚胎(35 h-post hCG,7/7) 都不转录tert基因,只有hprtmRNA存在;2-C晚期(50 h-post hCG)时,两个基因同时转录(4/8)和一个基因单独转录(4/8)的胚胎各占50%;从4-C阶段(65 h-post hCG,4/4)开始,包括8-C阶段(75 h-post hCG,4/4),桑椹胚阶段(93 h-post hCG,4/4),直至囊胚阶段(118 h-post hCG,4/4),所有的胚胎都同时转录tert和hprt基因,而且转录水平明显升高. 以20枚胚胎量为模板进行RT-PCR发现,原核早期,原核晚期的胚胎中仍然没有tert基因转录,只有hprtmRNA,但是,在2-C早期胚胎中同时检测到了hprt和tert两种mRNA. ?
- 王宇姚慧安晓荣陈永福苟克勉
- 关键词：胚胎HPRT基因端粒酶
- 利用ICSI技术生产转基因小鼠
- 在掌握小鼠ICSI技术的基础上,本文进行了ICSI技术生产转基因小鼠的研究。来自成年KM小鼠附睾尾的精子,使用未加抗冻剂的HEPES-CZB溶液,在液氮中冻融1次后,用于本实验。解冻精子与DNA混匀1 min后,精子头被...
- 李明严阿勇姚慧王宇安晓荣陈永福苟克勉
- 文献传递
- 棉花脂肪酸脱氢酶-2(FAD2)转基因小鼠模型的建立及其基因表达的研究
- 脂肪酸脱氢酶-2(fatty acid desaturase-2,FAD2)是植物细胞内质网表面的一种去饱和酶,主要作用是将细胞质中的单不饱和脂肪酸的第12位碳碳单键脱氢成双键,生成含有2个双键的多态不饱和Ω- 6脂肪酸...
- 陈青王宇张馨姚慧李军生李红艳安晓荣苟克勉
- 文献传递
