王国玮
- 作品数：15 被引量：18H指数：2
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“春晖计划”宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TLR2介导的BV-2细胞TNF-α及IFN-α的表达
- 2011年
- 目的:观察HCV阳性血清处理后TLR2 mRNA的表达及TLR2蛋白阻断前后TNF-α、IFN-α的表达。方法:细胞分为空白对照组、正常对照组及实验组,每组分为4h、8h、16h及24h,同时设TLR2阻断组及其对照组,采用RT-qPCR方法检测各组各时间点TLR2 mRNA的表达变化,并采用ELISA方法检测各时间点及TLR2阻断后组培养上清液中TNF-α、IFN-α水平。结果:HCV阳性血清处理后各时间点TLR2 mRNA表达均显著增加,空白对照组、正常对照组与实验组之间TLR2 mRNA表达有统计学差异(P<0.05);TLR2蛋白阻断前后TNF-α、IFN-α的表达有统计学差异(P<0.05)。结论:HCV阳性血清处理可能激活TLR2,TLR2可能通过下游大量炎性因子如TNF-α、IFN-α等参与BV-2抗HCV免疫。
- 杨娟王国玮王振海
- 关键词：丙型肝炎病毒BV-2TNF-ΑIFN-Α
- 布鲁菌S2株感染巨噬细胞后对小胶质细胞极化的影响
- 2018年
- 目的确定布鲁菌S2株感染巨噬细胞后对BV-2小胶质细胞极化的影响。方法用布鲁菌S2株感染RAW264.7巨噬细胞24及48h后,收集未感染巨噬细胞的上清液(COU)和感染巨噬细胞24h的上清液(COB24h)及48h的上清液(COB48h),BV-2细胞经上述上清液分别处理24h。实验分为空白对照组、COU组、COB24h组、COB48h组。倒置相差显微镜观察各组细胞形态。RT-qPCR检测iNOS、TNF-α、Arg-1mRNA的表达。ELISA检测培养细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)的水平。免疫组化染色法观察iNOS蛋白的表达。结果 BV-2细胞经上清处理后,镜下观察COB24h、COB48h处理的BV-2细胞胞体变大,细胞核变大,突起较多,并较空白组伸长明显,呈长杆状。与空白对照组比较,COB24h组与COB48h组BV-2细胞iNOS及TNF-αmRNA的表达升高(P均<0.01),Arg-1 mRNA的水平降低(P<0.01),且COB48h组iNOS mRNA表达升高(P<0.01);COB24h组与COB48h组上清中TNF-α、IL-1β的含量升高(P均<0.01),COB48h处理组IL-10的含量降低(P<0.05)。免疫组化染色法观察BV-2细胞中iNOS蛋白阳性表达在胞浆中,为橙色颗粒,COB48h组胞浆中iNOS蛋白的表达高于空白对照组。结论布鲁菌S2株感染巨噬细胞后的上清液可以驱动小胶质细胞向经典激活的巨噬细胞(M1)极化。
- 张吉李海宁李海宁徐婷王国玮杨娟
- 关键词：巨噬细胞小胶质细胞极化
- 检测神经系统自身免疫性疾病致病抗体的蛋白芯片
- 一种检测神经系统自身免疫性疾病致病抗体的蛋白芯片，该芯片为玻璃基片上分布有不同区域的微阵列，在每个微阵列区域中分别固定能检测神经系统自身免疫性疾病抗体的特异性抗原探针。本发明将NDMA1蛋白、IgLON5蛋白、Ma2蛋白...
- 王振海王国玮王立斌
- 一种筛选并富集神经节苷脂抗原特异性B细胞方法和装置
- 本发明公开了一种筛选并富集神经节苷脂抗原特异性B细胞方法和装置，属于生物医药领域。本发明通过生物素与链霉亲和素具有高亲和力的原理，实现了对GM1抗原特异性B细胞的荧光(Alexa Fluor 647)标记；通过MACS分...
- 王振海杨丽萍李晓聪袁艳平王国玮张娜刘成王晓莉杨欢杨婷婷沈开春
- HCV感染小鼠小胶质细胞后TLR7mRNA和IL-6表达被引量：2
- 2011年
- 目的通过观察丙型肝炎病毒(HCV)感染小鼠小胶质细胞BV2后Toll样受体(TLR)7 mRNA及白细胞介素(IL)-6水平的动态变化,探讨HCV对中枢神经系统(CNS)的免疫发病机制。方法用20%(体积分数)的HCV阳性血清感染BV2细胞,在感染后6、12、244、8 h收集细胞,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA法检测TLR7 mRNA和IL-6表达,同时设空白对照组和正常血清组。结果 3组BV2细胞中均有TLR7 mRNA表达;HCV阳性血清感染BV2细胞后TLR7 mRNA表达随时间延长而逐渐增高,其中在12、24、48 h时表达水平均较其他两组增高(P<0.05)。IL-6表达在HCV阳性血清组也逐渐增高,48 h时与空白对照组、正常血清组48 h时比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BV2细胞可以表达TLR7 mRNA,HCV感染能上调BV2细胞TLR7 mRNA和IL-6表达。TLR7可能参与了HCV对CNS的病理生理过程。
- 赵莉王国玮王振海
- 关键词：TOLL样受体7白细胞介素6肝炎病毒属小胶质细胞
- 布鲁菌S2株感染脑微血管内皮细胞体外模型的构建被引量：1
- 2018年
- 目的构建布鲁菌S2株感染脑微血管内皮细胞的体外模型。方法布鲁菌S2株采用大豆酪蛋白培养基培养4d,通过革兰染色及柯兹罗夫斯基染色进行细菌鉴定;布鲁菌S2株感染脑微血管内皮细胞后,通过透射电镜和胞内菌落计数观察布鲁菌进入胞内的情况;通过细胞存活率和乳酸脱氢酶活性观察布鲁菌S2株对细胞膜的影响,外设空白对照组;采用流式细胞仪观察布鲁菌S2株感染脑微血管内皮细胞凋亡的情况,外设空白对照组。结果透射电镜显示布鲁菌S2株能够感染脑微血管内皮细胞并存在于内吞泡内,胞内菌落计数法统计细胞内菌量发现,胞内活菌量随转染时间的延长而增加(P<0.05),感染48h胞内菌落数高于12h和24h(P<0.05),感染12h和24h胞内菌落数差异无统计学意义(P>0.05);台盼蓝染色结果显示空白组与处理组间细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05);在感染初期(12h前)细胞内的乳酸脱氢酶活性会增高,会对细胞膜造成损伤,在24h到48h的时候,细胞内的乳酸脱氢酶活活性较低,对细胞膜的损伤较小;流式细胞仪检测显示空白组与处理组间细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验成功构建布鲁菌S2株感染脑微血管内皮细胞体外模型,明确了布鲁菌S2株能够进入脑微血管内皮细胞并在胞内存活。
- 徐婷李海宁李海宁张吉王国玮杨娟
- 关键词：脑微血管内皮细胞体外模型
- 一种检测与吉兰巴雷综合征相关12种病原体基因芯片及其应用
- 一种检测与吉兰巴雷综合征相关12种病原体基因芯片，该基因芯片制备包括：制备蝶式微流控基因芯片；提取待测样品DNA与cDNA；恒温扩增体系配制；碟式微流控基因芯片加样；恒温扩增检测；结果判读；使用前述方法，选取12例临床诊...
- 王振海王立斌王国玮张旭
- 流行性乙型脑炎病毒感染与吉兰巴雷综合征相关性研究
- 目的2018年宁夏北部地区暴发流行性乙型脑炎(JE)可疑病例,部分病人出现合并吉兰巴雷综合征(GBS)暴发流行的新特点。为了进一步明确暴发流行的病原体,总结其流行病学、临床特征以及治疗观察,明确该病原体感染与GBS之间的...
- 王国玮
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒吉兰巴雷综合征酶联免疫斑点试验腓肠神经活检
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒刺激小鼠小胶质细胞后Toll样受体9mRNA的表达及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的分泌
- 2011年
- 了解在体外培养条件下丙型肝炎病毒（HCV）刺激小鼠小胶质细胞（BV2）后Toll样受体9 mRNA（TLR9 mRNA）的表达变化及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）分泌的变化,为进一步探讨TLR9参与小胶质细胞抗HCV的免疫机制提供理论基础.方法 体外培养BV2细胞,随机分为HCV阳性血清组、正常人血清组、空白对照组,每组各20份细胞样本.分别在4、12、20、36 h收集细胞和上清液,以逆转录PCR（RT-PCR）法观察不同时间点TLR9 mRNA的表达,ELISA法检测不同时间点培养上清中TNF-α、IL-6的含量,并用SPSS 13.0统计软件包进行统计学分析.结果 （1）RT-PCR结果显示各组BV2细胞均有TLR9 mRNA的表达,各时间点HCV阳性血清组中TLR9mRNA的表达（0.85±0.11、0.55±0.08、0.58±0.09、0.61±0.07）高于正常人血清组、空白对照组,差异有统计学意义（F=17.258,P＜0.05＝,且HCV阳性血清刺激后4 h的TLR9 mRNA表达量（0.85±0.11）最高,较其他时间点差异有统计学意义（F=7.427,P＜0.05＝;正常人血清组和空白对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;12、20、36 h之间差异无统计学意义（P＞0.05）.（2）各时间点HCV阳性血清组TNF-α[（926±133）pg/ml、（327±59）pg/ml、（367±69）pg/ml、（354±71）pg/ml]、IL-6[（125±34）pg/ml、（84±20）pg/ml、（82±24）pg/ml、（87±18）pg/ml]含量高于正常人血清组、空白对照组（F=18.263～27.469,P＜0.05＝;且HCV阳性血清组TLR9 mRNA的表达量与TNF-α（r= 0.425,P〈0.01）、IL-6（r=0.489,P〈0.01）含量呈正相关.结论HCV阳性血清刺激可使体外培养的BV2细胞表达TLR9mRNA增高,4 h表达最高,且可能诱导了TNF-α、IL-6的分泌.提示TLR9可能增加了Th1和Th2细胞因子的分泌,并参与了HCV在中枢神经系统感染中的早期固有免疫应答.
- 胡坤王国玮王振海
- 关键词：小神经胶质细胞丙型肝炎病毒TOLL样受体9肿瘤坏死因子Α白细胞介素6
- 磁共振DWI值对病毒性脑炎和脑低级星形细胞瘤的鉴别诊断价值被引量：4
- 2011年
- 目的探讨扩散加权成像(DW I)和表观扩散系数(ADC)值对病毒性脑炎和脑低级星形细胞瘤的鉴别诊断价值。方法 28例病毒性脑炎和27例脑低级星形细胞瘤在治疗前或手术前接受了常规MR I、DW I检查。病毒性脑炎经临床及治疗随访证实,脑低级星形细胞瘤病例经手术及病理证实。测量并计算两组病例DW I的表观扩散系数(ADC)值和相对表观扩散系数(rADC)值。结果病毒性脑炎平均ADC值和rADC值分别为(1.07±0.19)×10-3mm2/s和(1.26±0.21)×10-3mm2/s,脑低级星形细胞瘤平均ADC值和rADC值分别为(1.60±0.28)×10-3mm2/s和(2.04±0.41)×10-3mm2/s,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 DW I的ADC值和rADC值能较好地鉴别病毒性脑炎和脑低级星形细胞瘤。
- 李芳王振海陈兵王国玮
- 关键词：病毒性脑炎DWIADC值
