王利丽
- 作品数：70 被引量：134H指数：7
- 供职机构：天津市农业科学院更多>>
- 发文基金：天津市农业科学院院长基金天津市科技计划天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学电气工程更多>>
- ssc-miR-374b-3p在制备抗PDCoV增殖药物中的应用
- 本发明公开了ssc‑miR‑374b‑3p在制备抗PDCoV增殖药物中的应用。属于抗病毒药物技术领域。本发明将增加ssc‑miR‑374b‑3p表达的模拟物和降低ssc‑miR‑374b‑3p表达的抑制剂分别转染至猪小肠...
- 江珊李秀丽鄢明华张莉任卫科董志民李富强王利丽李程池晶晶
- 一种用于检测鸡呼肠孤病毒和火鸡呼肠孤病毒的双重PCR试剂盒及应用
- 本发明涉及一种用于检测鸡呼肠孤病毒和火鸡呼肠孤病毒的双重PCR试剂盒及应用。本发明根据鸡呼肠孤病毒S3基因序列和火鸡呼肠孤病毒的S1基因序列各设计一对PCR引物，通过双重PCR可实现对鸡呼肠孤病毒和火鸡呼肠孤病毒的同步检...
- 鄢明华郑丽王利丽张莉李秀丽李富强任卫科路超池晶晶董志民江珊田向学
- 文献传递
- 禽腺病毒血清4型纳米PCR检测试剂盒的研制及应用被引量：1
- 2020年
- 为研制一种高效、快捷、灵敏的禽腺病毒血清4型(FAdV-4)检测试剂盒,本研究根据FAdV-4的保守序列设计了一对引物及探针,并在下游引物标记FITC,探针标记Biotin,应用纳米PCR技术结合横向流动试纸条技术(LFD),优化反应及杂交条件后建立了检测FAdV-4的纳米PCR-LFD方法,并组装了FAdV-4纳米PCR检测试剂盒。同时对试剂盒进行了特异性、敏感性、批内批间可重复性、稳定性、保存期评估等试验及临床样品检测。特异性试验表明,此试剂盒能够特异性检测出FAdV-4,而对于禽的其他主要病毒性及细菌性病原如鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡马立克病病毒(MDV)、鸡减蛋综合征病毒(EDSV)、鸭瘟病毒(DPV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒H9亚型(AIV(H9))、禽呼肠孤病毒(ARV)、FAdV标准株(FAdV-1、FAdV-2、FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11)、鸡大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(SA)、鸡白痢沙门氏菌(SP)、鸡毒支原体(MG)的检测结果均为阴性。敏感性试验表明,此试剂盒的敏感性比常规PCR方法敏感10倍,最低核酸拷贝数检出量可以达到56.0拷贝/μL。试剂盒的批内、批间检测结果具有良好的一致性和稳定性。稳定性试验结果说明试剂盒至少可以耐受20次的反复冻融,依然有很好的检测效果。保存期试验证实,试剂盒在4℃条件下至少可以保存3个月,在-20℃条件下至少可保存12个月。此试剂盒实现了对FAdV-4检测结果的可视化,简化了操作流程,提高了检测效率。对天津及周边地区临床送检的117份样品检测结果显示,FAdV-4阳性率为17.95%(21/117)。本试验研制的试剂盒可用于FAdV-4的临床诊断和分子流行病学调查,对养禽场FAdV-4感染的早期检测与制定综合防控措施提供了重要的技术支撑。
- 王利丽郑丽郑丽李秀丽田向学路超李秀丽池晶晶任卫科
- 2型猪链球菌天津分离株的鉴定及其遗传特征分析
- 2024年
- 为了解天津市某猪场引起育肥猪神经症状的病原及其特性和遗传特征,本研究采集8份患病猪脑组织样品经细菌分离、形态学观察、gdh基因和cps2J基因的PCR扩增及序列分析,确定8份样品中的分离株均为同一2型猪链球菌(SS2),命名为TJS75。测定其生长曲线、并按照文献方法进行溶血性试验、黏附/侵入试验和对小鼠的致病性试验,分析该SS2分离株特性。结果显示,TJS75菌株经TSB培养6 h~15 h可达对数生长期,对绵羊血红细胞(RBC)具有崩解效果,可黏附并侵入PK-15细胞(黏附率和侵袭率分别为5.16%和7.90%),且感染TJS75株的BALB/c小鼠出现不同程度的行动迟缓、呼吸急促、精神萎靡和神经症状等,经测定其LD50为2.15×107cfu/mL。进一步采用高通量测序,并预测其毒力基因,分析该菌株的遗传特征,结果显示,TJS75菌株基因组全长2368195 bp,GC含量40.88%,含有2299个编码基因,其中有1822、1830和1077个基因分别注释于GO、COG和KEGG数据库,携带的16S r RNA基因序列与国内分离的SS强毒株98HAH33和05ZYH33的亲缘性较近,毒力基因的预测结果显示该菌株携带499种毒力相关基因(编码173种毒力相关因子),依据功能分类,这些毒力基因参与SS2的黏附和侵袭、溶血、促进铁转运、自溶酶的合成、降解胶原酶、唾液酸的合成等。本研究首次分离到携带MRP毒力因子的ST25型SS2,为深入开展SS2 TJS75株的致病机制研究提供了科学依据。
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- 关键词：猪链球菌2型致病力
- 猪圆环病毒2型天津及周边地区分离株的遗传演化分析被引量：5
- 2018年
- 为了解天津及周边地区猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)的流行毒株遗传变异情况,本研究应用基因克隆技术和生物信息学分析软件对24株PCV2分离株全基因及ORF2基因分别进行克隆、测序、同源性比对和遗传进化分析。全基因组序列分析结果显示,24株PCV2分离株全基因组序列有14株为1 767bp,10株为1 768bp。用DNAStar软件对全基因组序列同源性比对表明,24株PCV2分离株与NCBI上的PCV2参考株的全基因序列同源性为93.6%~99.8%,24株分离株之间的全基因组序列差异很小,同源性为94.0%~99.9%。同时,用DNAStar对PCV2分离株的ORF2基因序列同源性分析表明,其与NCBI上的PCV2 ORF2基因参考序列的核苷酸序列同源性为87.3%~99.3%,24株分离株ORF2基因核苷酸序列同源性为89.0%~100.0%,3株分离株(10084F4、R14040及R14086)的核苷酸序列同源性为100.0%。对全基因和ORF2基因的遗传进化分析表明,24株分离株的系统进化树被分为2个大分支,其中23株分离毒株属于PCV2b亚型,1株属于PCV2a亚型,未分离出PCV2c亚型。综上所述,天津及周边地区PCV2的流行模式仍以PCV 2b亚型为主,本研究为该地区PCV2的流行变异情况研究提供了一定的理论依据。
- 王利丽郑丽郑丽任卫科路超李富强任卫科
- 关键词：克隆遗传进化分析
- 同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法
- 同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法。本发明属于猪病原检测技术领域，具体涉及同时检测猪德尔塔冠状病毒、呼肠孤病毒和猪嵴病毒的核酸组合物、试剂盒及检测方法。本发明提供的所述核酸组合物...
- 王利丽李秀丽江珊鄢明华路超张莉任卫科董志民田向学朱琪李富强
- 环介导等温扩增技术结合横向流动试纸条检测猪链球菌2型的应用研究被引量：3
- 2016年
- 目的建立一种猪链球菌2型的快速检测方法。方法以猪链球菌2型cps2J基因序列为检测靶标设计6条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,其中2条促环引物分别标记异硫氰酸荧光素(FITC)和地高辛(Dig),用横向流动试纸条(LFD)检测扩增产物,建立猪链球菌2型LAMP-LFD检测方法。结果所建立的检测方法能够特异性的检测出猪链球菌2型,与试验对照菌株不存在交叉反应,其最低检测限为76cfu/mL,在对100份样品的检测中,LAMP-LFD方法检测出14份阳性样品,培养法检测出12份阳性样品,LAMP-LFD方法检测阳性率略高于病原培养法,两者间的P>0.05无统计学差异。结论所建立LAMP-LFD检测方法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速等特点,适合于动物食品中猪链球菌2型的检测。
- 张莉王利丽魏财文杨春蕾路超池晶晶鄢明华
- 关键词：猪链球菌2型环介导等温扩增
- 猪德尔塔冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：19
- 2017年
- 为建立一种能够快速、准确检测猪德尔塔冠状病毒(PD Co V)的方法,根据G en Bank上已发表的PDCo V的M基因序列,设计并合成1对特异性引物,扩增的目的基因片段的大小为359 bp。通过优化反应条件,建立了检测PDCo V的RT-PCR方法,并对其敏感性、特异性和重复性进行了检测。结果显示,仅PDCo V阳性模板可扩增得到约359 bp的目的条带,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒、猪链球菌2型、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果显示,该方法能检测到的最低核酸质量浓度为1 ng/L。应用该方法对110份临床疑似发病的腹泻猪样品进行检测,结果检出13份PDCo V阳性,阳性检出率为11.8%。应用Blast对测序结果进行比较分析,结果表明检测的阳性样品与其他PDCo V序列的同源性为92.2%~100%。M基因的系统进化分析表明,阳性样品与PDCo V中国分离株的亲缘关系较近。以上结果表明,本研究成功建立了PDCo V的RT-PCR方法,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于PDCo V的临床诊断及流行病学监测。
- 郑丽王利丽路超杨春蕾李富强张莉鄢明华
- 关键词：RT-PCR
- 同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的引物组及应用
- 本发明公开了一种同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的引物组和应用，属于鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体检测技术领域，包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的序列，将该序列应用于以上2种病原的检测，具有操作简便、...
- 董志民鄢明华王利丽田向学张莉李秀丽朱琪池晶晶
- 猪链球菌2型LAMP-LFD检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种猪链球菌2型快速检测试剂盒及其检测方法。所述技术可用于猪链球菌2型的检测。其特征是：该技术将环介导等温扩增技术与横向流胶体金试纸条检测技术相结合，检测过程不需要昂贵的专业仪器设备，省略了琼脂糖凝胶电泳步奏，...
- 张莉王利丽李秀丽鄢明华任卫科池晶晶杨春蕾孙英峰田向学李富强
- 文献传递
