潘洁 作品数:38 被引量:119 H指数:6 供职机构: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 北京市农林科学院青年基金 国家自然科学基金 北京市农林科学院科技创新能力建设专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
2007年华北地区H3N8亚型马流感病毒的分离与鉴定 被引量:13 2010年 2007年10月,华北地区某赛马场的马同时发生了以发烧、流水样鼻汁或脓性分泌物、咳嗽等临床症状为主的疾病,疑似马流行性感冒。采集患病赛马的鼻腔分泌物,发病期和发病后14d血清,经鸡胚接种法分离病毒,并用鸡红细胞血凝抑制试验(HI)、神经氨酸酶抑制试验(NI)、病毒回归试验、血清学检测和基因序列分析对分离的病毒进行了系统鉴定。结果表明分离的毒株(A/equine/Huabei/1/2007(H3N8)为马源H3N8亚型马流感病毒,基因型属于美洲分支。我们通过动物回归感染试验建立起分离毒株的实验感染模型。 蒋桃珍 刘月焕 林健 韩春华 潘洁 赖平安 韦海涛 祝俊杰 赵景义 马志军 毕丁仁关键词:马流感病毒 H3N8 H3N2亚型犬流感病毒实验感染模型的建立 2023年 【目的】建立H3N2亚型犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)实验感染模型,了解犬流感的发病特征,为疫苗效力评价奠定基础。【方法】6—13月龄CIV血凝抑制(haemagglutination inhibition,HI)抗体阴性(HI<1﹕10)比格犬26只,其中3只鼻腔喷雾PBS作为阴性对照,另23只分5组(10、103、105、106、107 EID50/只),分别为3、5、5、5、5只/组,每只犬各鼻腔喷雾H3N2亚型CIV(A/canine/China/Huabei-170607/2017(H3N2),简称HB株)病毒液1mL。观察临床症状、肺脏病变和肺脏组织病理学变化,计算肺实变率,检测病毒和HI抗体效价。【结果】10 EID50剂量感染组,3只犬均未出现明显临床症状,肺脏均无明显眼观病变,肺脏实变率0%,无组织病理学变化,病毒检测均为阴性,HI抗体效价几何平均值(geometric mean titer,GMT)为1﹕15.9;103 EID50剂量感染组,5只犬中有4只喘息、流鼻汁和咳嗽,1只犬未表现出临床症状,2只犬肺脏出现轻微实变,实变率平均为1.4%,4只犬病毒分离阳性,HI抗体效价GMT为1﹕320;105 EID50剂量感染组,5只犬在攻毒后5 d开始出现流鼻汁和咳嗽等临床症状,肺脏均有实变,实变率平均为4.2%,肺泡间隔增宽,病毒分离均为阳性,HI抗体效价GMT为1﹕2940.7;106 EID50剂量感染组,5只犬在攻毒后4 d体温升高、流鼻汁、咳嗽,临床症状出现较105 EID50剂量感染组早1 d,肺脏实变程度增加,实变率平均为17.9%,肺泡间隔增宽,病毒分离均为阳性,HI抗体效价GMT为1﹕2228.7;107 EID50剂量感染组,5只犬在攻毒后3 d表现出体温升高、流鼻汁、咳嗽等严重的临床症状,症状出现较106 EID50剂量感染组早1 d,肺脏严重实变,实变率平均为29.0%,肺泡间隔增宽,病毒分离均为阳性,HI抗体效价GMT为1﹕2940.7;对照犬均未出现明显临床症状,肺脏均无明显眼观病变,无组织病理学变化,病毒检测均为阴性,HI抗体效价均<1﹕10。【结论】106 EID50剂量病毒是能引起犬明显发病的最小病毒接种剂� 黄程 杨龙峰 孙鹏 程慧敏 杨志远 林健 祝洪伟 刘立新 孙厚民 李加凤 赵际成 段会娟 潘洁 刘月焕关键词:比格犬 H3N2亚型 肺脏 Protective Efficacy of Newcastle Disease Vaccines against Prevalent Strains in Recent Years 2009年 [Objective] To investigate the protective efficacy of currently available Newcastle disease vaccines against currently prevalent strains and thus provide guidance for the application of vaccines and the prevention and control of Newcastle disease. E Method] The 6-week-old SPF chickens were respectively inoculated with five live attenuated Newcastle disease vaccines (A, B, C, D, and E) at the dose of 1-fold or 0.01-fold usage via intranasal, intraocular or oral route. After 14 d post immunization, the titers of HI antibody were detected. And all the chickens were chal- lenged by Newcastle disease virus (NDV) FEo standard strain or the isolated wild strains, NDV-2007-HB and NDV-2008-YB. The clinical symptoms of chickens were continuously observed, and the morbidity and mortality were determined. [ Resalt] After 14 d post immunization, antibodies were induced at a protective level in chickens immunized with the five vaccines. As shown by the animal experiment, the five vaccines at the dose of 1-fold or 0.01-fold usage protected all vaccinated chickens from the death caused by NDV strain, and more than 90% of vaccinated chick- ens from the death caused by NDV-2007-HB strain, while the vaccines, A, B, and C, at the dose of 0.01 -fold usage protected more than 90% of vaccinated chickens from the death caused by NDV-2008-YB strain. E Conclusion] Under laboratory conditions, the currently available Newcastle disease vaccines have better protective efficacy against the two currently prevalent NDV strains and prevent the occurrence of Newcastle disease. 林健 刘月焕 韩春华 马明 刘永宏 潘洁一株H3N8亚型马流感病毒的鉴定及HA基因序列分析 被引量:3 2018年 2016年4月北京某马场出现马流感疑似疫情,为确诊病原,从发病马群中采集鼻拭子接种鸡胚分离病毒,并进行血凝试验和血凝抑制试验、基因测序和BLAST比对分析。结果表明,从鼻拭子中分离到1株马流感病毒,命名为A/equine/Beijing/2016。血凝试验、血凝抑制试验及测序结果表明,该分离株为H3N8亚型。对分离株的HA基因进行遗传进化分析,表明该分离株属于H3N8亚型美洲谱系的佛罗里达Ⅱ群。对该分离株及国内近年来的马流感病毒分离株的HA氨基酸序列进行分析,发现该分离株相比于OIE推荐的疫苗候选株出现了一个重要的抗原漂移。马流感病毒HA基因的不断变异,提示有必要加强对国内马流感病毒的流行病学监测。 王小蕾 段会娟 杨志远 刘立新 赵际成 潘洁 刘月焕 林健关键词:HA基因 一例信鸽曲霉菌病的病理学诊断 曲霉菌病是一种常发生于火鸡、鸡、其他家禽、野鸟和观赏鸟等的呼吸系统疾病,其中鸡、火鸡、鸭、鹅、鸽和鹌鹑最为易感,其中幼禽多发。常见急性、群发性暴发,发病率和死亡率较高。病的特征是形成肉芽肿,在禽类以肺及气囊发生炎症和小结... 段会娟 林健 韩春华 韩婧雯 潘洁 刘月焕文献传递 斑鸠对H9N2亚型禽流感病毒的易感性及其流感病毒受体类型的研究 被引量:2 2012年 【目的】验证斑鸠对H9N2亚型禽流感病毒的易感性,测定斑鸠呼吸道上皮细胞表面流感病毒受体的类型和分布。【方法】以5×104EID50/只的剂量经滴鼻、点眼途径感染A/Chicken/Beijing/2/2009(H9N2)亚型禽流感病毒,共感染8只斑鸠和8只SPF鸡,对试验斑鸠和SPF鸡进行临床症状、大体病变、组织学病变的观察及病毒抗原的定位、病毒分离和感染抗体的测定。【结果】攻毒后5d,斑鸠和SPF鸡未见异常临床表现和大体病变,病理组织学检查发现斑鸠的喉头、气管上段、中段和下段上皮细胞均有不同程度的脱落;在斑鸠的喉头、气管上段、中段和下段上皮细胞的胞浆内检测到了大量阳性流感病毒蛋白颗粒;斑鸠咽拭子病毒分离阳性率为75%(6/8),SPF鸡咽拭子病毒分离阳性率为100%(8/8)。攻毒后14d,斑鸠H9N2亚型禽流感病毒HI抗体阳性率为80%(4/5),SPF鸡HI抗体阳性率为100%(5/5)。对H9N2亚型禽流感病毒受体检测结果表明,斑鸠的喉头、气管上段、中段、下段上皮细胞表面存在SAα2,3Gal和SAα2,6Gal两种连接键型的受体。【结论】斑鸠对H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Beijing/2/2009(H9N2)易感,且斑鸠的喉头和气管上、中、下段上皮细胞表面同时存在能够与禽流感病毒结合的SAα2,3Gal受体和与人流感病毒结合的SAα2,6Gal受体。 丁佩佩 刘月焕 陈明勇 韩春华 林健 韩婧雯 潘洁关键词:斑鸠 H9N2亚型禽流感病毒 易感性 鸭坦布苏病毒病卵巢病变标准的判定 被引量:4 2016年 【目的】了解产蛋鸭感染鸭坦布苏病毒后卵巢病变产生的进程和卵巢病变规律,为采用产蛋鸭卵巢病理变化检查法进行疫苗效力检验提供依据。【方法】70只260日龄产蛋樱桃谷鸭,以0.5m L/只(含100DID50)的剂量经胸部肌肉接种鸭坦布苏病毒(HB株)强毒。观察试验鸭的临床症状,统计每日产蛋数和采食量。攻毒后2 d,每只鸭经翅静脉采血,分离血清,经卵黄囊途径接种5枚6日龄SPF鸡胚,每胚0.1m L。接种后置37℃条件下继续孵化,24 h死亡鸡胚弃去。采用RT-PCR方法测定24—72 h死亡鸡胚的DTMUV核酸,将1/5或以上鸡胚死亡且DTMUV核酸阳性的鸭判为DTMUV感染鸭。攻毒后4—10 d,每日剖杀10只鸭,观察和分析生殖系统病变。统计病变率,检查输卵管内是否有蛋,卵泡是否变形、出血和破裂,依据病变率和病变,确定检查内容和病变卵巢的判定时间和标准。【结果】(1)攻毒后3、4、5、6 d,鸭几乎不采食,产蛋数明显下降。攻毒后7 d,鸭精神状况好转;攻毒后8 d,采食量开始回升。(2)70只鸭中,除1只鸭的病毒分离结果为阴性外,其余69只鸭的病毒分离结果均为阳性,病毒分离阳性率为98.6%(69/70)。(3)攻毒后4—10 d,共64只产蛋期鸭的生殖器官可以判定。(4)攻毒后4、5、6、7、8、9和10 d,卵巢病变率分别为66.7%(6/9)、100%(10/10)、100%(10/10)、100%(9/9)、100%(9/9)、100%(9/9)和100%(8/8)。(5)除攻毒后4 d有2只鸭输卵管中有蛋外,其余62只鸭输卵管中均无蛋,无蛋率为96.9%(62/64)。(6)攻毒后4—10 d,96.9%(62/64)鸭的卵泡变形,96.9%(62/64)鸭的卵泡出血,95.3%(61/64)鸭的卵泡变形和出血,34.4%(22/64)卵泡破裂。【结论】(1)确定卵巢病理变化检查时间为攻毒后7—8 d;(2)具有变形或出血病变之一,判病变卵泡。输卵管内无蛋且有3个及以上病变卵泡,判为病变卵巢。 林健 杨志远 何平有 段会娟 邹立宏 杨保收 赵际成 潘洁 王小蕾 刘立新 刘月焕关键词:卵巢 病理变化 禽腺病毒4型人工感染SPF鸡动态病理学观察 被引量:4 2018年 为了深入研究禽腺病毒4型的致病机理,以34日龄SPF鸡人工感染禽腺病毒4型建立了禽腺病毒感染病理模型,并在感染后第1~10天剖杀试验鸡,采集胸腺、心、肝、腺胃、脾、肾,采用常规病理学方法和免疫组织化学方法研究其在感染SPF鸡体内的动态病理变化规律。结果表明,34日龄SPF鸡经口服途径感染禽腺病毒4型,成功建立了人工感染动物模型。感染后第3天鸡出现临床症状,第4~6天为死亡高峰期,第7天后病鸡开始恢复,发病率75%,死亡率67.8%。攻毒后第5天病鸡肝脏病变最重,病变肝细胞内可见嗜碱性、嗜酸性的包涵体,免疫组织化学染色可见攻毒后第5天鸡的肝细胞、脾脏网状细胞和肾小管上皮细胞中出现棕黄色阳性颗粒。 吴烨挺 杨志远 林健 赵际成 王小蕾 段会娟 齐志涛 潘洁 刘月焕 刘立新关键词:动态病理学 鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(HB株)母源抗体的消长规律 被引量:6 2016年 【目的】评价鸭坦布苏病毒病灭活疫苗母源抗体的效力,制定疫苗的最小免疫日龄。【方法】随机采集鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(HB株)二免后135日樱桃谷种鸭的种蛋孵化,随机取5、7、10和15日龄免疫种鸭后裔雏鸭10只和相对应日龄非免疫种鸭后裔雏鸭5只,采血,分离血清,测定母源抗体,并以0.1m L/羽(含100DID_(50))的剂量经腿部肌肉攻毒。观察雏鸭攻毒后的临床表现(采食量、粪便、精神和死亡情况),观察至攻毒后10d。攻毒后2d经颈静脉采血,分离血清进行病毒分离。每份血清接种5枚6日龄SPF鸡胚,0.1m L/枚,37℃孵化,24h以内死亡鸡胚视为非特异死亡,孵化至168h。只要有1枚及以上鸡胚死亡则判该鸭感染。计算母源抗体雏鸭组的攻毒保护率和无母源抗体组的发病率。攻毒后5d,分别称量雏鸭的体重,计算平均日增重。对成对样本进行T检验,分析母源抗体对雏鸭增重的影响。通过试验鸭中和抗体、增重变化和病毒分离的方法评价母源抗体的效力。【结果】(1)1日龄雏鸭的母源抗体阳性率最高,1、5、7、10和15日龄雏鸭的母源抗体阳性率分别为56.1%(37/66)、40%(4/10)、50%(5/10)、30%(3/10)和0%(0/10),5—7日龄抗体阳性率处于平台期,15日龄时母源抗体降低至全阴性;(2)攻毒后对照鸭表现精神沉郁(20/20)、仰翻和侧翻等神经症状(6/20)及死亡(2/20),有母源抗体的雏鸭临床症状明显轻于对照组。(3)5、7、10和15日龄免疫种蛋孵化雏鸭攻毒后5d平均增重115.5、142.8、177.8和162.2g。5、7、10和15日龄非免疫种蛋孵化雏鸭攻毒后5d平均增重54.5、91.0、165.0和118.8g。(4)5、7、10和15日龄免疫种蛋孵化雏鸭的攻毒保护率分别为50%(5/10)、60%(6/10)、20%(2/10)和0%(0/10);5、7、10和15日龄非免疫种蛋孵化雏鸭的发病率均为100%。(5)5和7日龄雏鸭平均增重和攻毒保护率最高,分别为50%(5/10)和60%(6/10),10和15日龄雏鸭的母源抗体尽管� 韩春华 赵际成 段会娟 林健 杨志远 谢佳 潘洁 王小蕾 刘立新 刘月焕关键词:母源抗体 两种佐剂在H9N2亚型禽流感灭活疫苗中的效果比较 被引量:2 2020年 为提高H9N2亚型禽流感灭活疫苗的免疫效力,拟从Carbigen和Marcol-52两种佐剂中选择一种适合的疫苗佐剂。利用两种佐剂分别制备H9N2亚型禽流感灭活疫苗,通过SPF鸡免疫后7、14、21、24 d的抗体水平、黏膜系统SIgA含量及攻毒保护率三个方面,对Carbigen和Marcol-52佐剂进行探讨。结果显示,Carbigen佐剂和Marcol-52佐剂疫苗均可以刺激机体产生呼吸道黏膜SIgA和血清抗体。在免疫后第7天至第21天,Carbigen佐剂疫苗组血清抗体水平均高于Marcol-52佐剂疫苗组;Carbigen佐剂疫苗组SIgA产生早于Marcol-52,在第14天Carbigen佐剂疫苗组SIgA含量明显高于Marcol-52佐剂疫苗组(P<0.05),产生SIgA主要部位位于气管叉和肺脏;Carbigen佐剂疫苗组攻毒后的保护率高于Marcol-52佐剂疫苗组。Carbigen佐剂配置的疫苗可刺激接种动物快速产生免疫应答反应,其效果优于Marcol-52佐剂,有望成为H9N2灭活疫苗的候选佐剂。 齐志涛 程慧敏 杨志远 林健 王小蕾 刘立新 赵际成 潘洁 段会娟关键词:禽流感 H9N2 灭活疫苗 SIGA