游丽金
- 作品数:9 被引量:38H指数:4
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:引进国际先进农业科技计划江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 黑曲霉植酸酶基因的克隆、定点突变及高效表达
- 植酸酶作为一种重要的饲料添加剂和未来的食品添加剂,具有广阔的应用前景。但微生物分泌的植酸酶活力低是制约其的主要障碍。因此,研究和开发高活力植酸酶的制备技术意义重大。本研究在直接利用黑曲霉菌株NL-1制备植酸酶的基础上,对...
- 游丽金
- 关键词:植酸酶基因克隆毕赤酵母黑曲霉饲料添加剂
- 文献传递
- 一种制备β-甘露聚糖酶的方法及专用菌株
- 本发明公开了一种制备β-甘露聚糖酶的方法及专用菌株。该菌株为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS4SMAN CGMCC NO.4095。本发明公开的重组菌含有多个拷贝的、由甲醇诱导表达的甘露聚糖酶基因。实...
- 马延和朱泰承游丽金李寅薛燕芬
- 文献传递
- 黑曲霉胞外耐高糖β-葡萄糖苷酶的分离纯化及部分特性研究被引量:17
- 2007年
- 采用硫酸铵盐析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析、DEAE-Sephamse阴离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析等步骤,从黑曲霉的发酵液中获得了凝胶电泳均一的两种β-葡萄糖苷酶。其中一种为耐高糖的β-葡萄糖苷酶,葡萄糖抑制系数(Ki)为41.01mmol/L,纯化倍数和得率分别为56.7倍和22.66%。耐高糖β-葡萄糖苷酶单亚基分子质量为114.6ku,以对硝基苯酚-β-肛葡萄糖苷(pNPG)为底物时,米氏常数(Km)值和酶促反应的最大速率(vmax)分别为0.904mmol/L和1.08μmol/min。该酶最适反应温度60℃,最适反应pH值为4.0;在60℃以下及pH值3—7范围内均能保持稳定。所测定的化学试剂中,Ag^+对酶具有较强的抑制作用,其它金属离子及乙二胺四乙酸对酶的活性影响不大。甲醇、正丁醇有明显激活酶活性的作用,但乙腈、丙酮对酶的抑制作用明显。
- 赵林果游丽金孟鹏余世袁
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶提纯黑曲霉
- 表达谷氨酰胺转胺酶的重组菌及其应用
- 本发明公开了一种重组菌。本发明提供的重组菌是含有谷氨酰胺转胺酶前体基因和枯草杆菌蛋白酶类水解酶基因SAM-P45的重组甲醇营养型酵母菌。本发明还保护重组菌为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GSMTGB,已...
- 李寅朱泰承游丽金
- 文献传递
- 碳源和氮源对黑曲霉分泌β-葡萄糖苷酶的影响被引量:8
- 2008年
- 以黑曲霉(Aspergillus nigernl-1)为产酶菌种,研究了碳源和氮源对β-葡萄糖苷酶合成的影响。结果表明:麸皮为最好的碳源,适宜的使用量为4%;(NH4)2SO4、蛋白胨分别为较佳的无机氮源和有机氮源,由无机氮与有机氮组成的复合氮源更有利于β-葡萄糖苷酶分泌,其适宜比例为0.2%(NH4)2SO4和3.19%蛋白胨。通过碳源、氮源的优化,β-葡萄糖苷酶活力达到4.82 U/mL。
- 赵林果游丽金倪浩宗雅冬余世袁
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶碳源氮源黑曲霉
- 黑曲霉胞内β-葡萄糖苷酶分离提纯及其性质的研究被引量:6
- 2008年
- 采用丙酮沉淀、DEAE—Sepharose阴离子交换层析、SephacrylS-200凝胶过滤、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析等步骤,从黑曲霉菌丝体中获得了一种凝胶电泳均一的胞内β-葡萄糖苷酶,其单亚基相对分子质量为122.7k,纯化倍数和得率分别为7.2和19.3%。以纤维二糖为底物时,该酶葡萄糖的抑制常数Ki为0.19mmol/L,Km值和Vmax分别为2.99mmol/L、1.49μmol/min。该酶最适反应温度60℃,最适反应pH为5.0;在60℃以下及pH3~6范围内均能保持稳定。甲醇、乙醇、正丁醇、丙酮和乙酸乙酯等有机溶剂对胞内β-葡萄糖苷酶有很好的激活作用。
- 赵林果夏文静游丽金王平余世袁
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶提纯黑曲霉
- 利用毕赤酵母系统直接分泌表达具有活性的谷氨酰胺转胺酶被引量:7
- 2013年
- 使用异源表达系统直接分泌表达具有活性的微生物谷氨酰胺转氨酶(Microbial transglutaminase,MTG)是目前最具前景的MTG生产方法之一,但由于产量较低无法实现工业化生产。毕赤酵母是近年来发展出的高效蛋白表达系统。通过采用pro序列与成熟MTG基因共表达的策略,成功地实现了用重组毕赤酵母分泌表达具有活性的茂原链霉菌Streptomyces mobaraense MTG。进一步通过对pro序列和MTG基因拷贝数以及重组酵母培养条件的优化,最终使得MTG在1 L发酵罐中高密度发酵的酶活达到7.3 U/mL,为MTG的工业化生产奠定了基础。
- 李鹏飞孙红兵游丽金巩伏雨陈藻张爱联朱泰承
- 关键词:谷氨酰胺转胺酶毕赤酵母拷贝数共表达高密度发酵
- 一种制备β-甘露聚糖酶的方法及专用菌株
- 本发明公开了一种制备β-甘露聚糖酶的方法及专用菌株。该菌株为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS4SMAN CGMCC NO.4095。本发明公开的重组菌含有多个拷贝的、由甲醇诱导表达的甘露聚糖酶基因。实...
- 马延和朱泰承游丽金李寅薛燕芬
- 表达谷氨酰胺转胺酶的重组菌及其应用
- 本发明公开了一种重组菌。本发明提供的重组菌是含有谷氨酰胺转胺酶前体基因和枯草杆菌蛋白酶类水解酶基因SAM-P45的重组甲醇营养型酵母菌。本发明还保护重组菌为巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GSMTGB,已...
- 李寅朱泰承游丽金
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