温华
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- m_4AchR-Gilα融合蛋白的表达及其机能的研究
- 2003年
- 王海波张海鹏温华李新鸣
- 关键词：配体生物学效应药理学特性受体
- m_1AChR-G_(11)和m_4AChR-G_(16)融合蛋白的建立、表达及几种配体的作用
- 2003年
- 目的 :通过Baculovirus-Sf9cells系统制备m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白 ,检测几种配体对m1AChR与G11及m4AChR与G16间相互作用的影响 ,并以m1AChR -G11和m4AChR -G16融合蛋白为工具 ,筛选m1和m4受体的特异性配体。方法 :两步PCR建立m1AChR -G11和m4AChR -G16融合DNA ,并在Sf9细胞内表达。通过 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS结合实验检测m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白的药理学特性 ;通过 [3 5S]GTPγS替代结合实验研究几种配体包括acetylcholine(ACh) ,pilocarpine(Pilo)。 4 -hydroxy - 2 -butynyl- 1-trimethylam monium -m -chloro -carbanilatechloride (McN -A - 343) ,tetrandrine ,pirenzepine (PZ) ,alcuronium ,atropine ,R - (+) -hyoscyamine和gallamine对m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白作用的方式 ,并以这两种融合蛋白为模型筛选m1和m4受体的特异性配体。结果 :m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白表达水平分别为 (45 4±2 6 )nmol/gprotein和 (47 0± 1 6 )nmol/gprotein。不同配体使融合蛋白m1AChR -G11和m4AChR -G16中G11和G16与GDP的亲和力发生变化。结论 :杆状病毒 -Sf9细胞系统表达的m1AChR -G11融合蛋白和m4AChR -G16融合蛋白具备m受体配体结?
- 王海波郭政东张海鹏王娟温华李新鸣
- 关键词：毒蕈碱信号转导配体G蛋白
