沈学仁
- 作品数:12 被引量:44H指数:5
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种新发现的香菇球状病毒被引量:7
- 1992年
- 迄今为止国际上香菇病毒的研究结果表明,在香菇中含有直径分别为25、30和39nm的球状病毒颗粒,它们的一个共同特征是,这些病毒颗粒的核酸型均为双链核糖核酸(dsRNA).在国家自然科学基金会的资助下,我们对上海地区发生的香菇病毒病进行了研究,发现了一种新的香菇球状病毒颗粒,它的核酸型是单链核糖核酸(ssRNA),并探讨了这种病毒颗粒与病毒病的发生和香菇菌种退化的关系.
- 潘迎捷陈明杰汪昭月龚胜萍方炳初沈学仁龚祖埙沈菊英陈作义
- 关键词:香菇病毒
- 心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂
- 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链I诊断试剂,主要包括人心肌肌球蛋白轻链I基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法,即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原——...
- 龚祖埙彭宝珍周国瑛黄人健曹慧婷沈学仁沈菊英吴建华
- 文献传递
- 含四个串联核酶和GFP基因的转基因质粒的构建
- 2001年
- 以含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的质粒pSK10 0 DS、含切割对虾杆状病毒基因的核酶Rz1的质粒pRGRz1、含核酶Rz2的质粒pRGRz2和转基因空质粒pcDNA3为基础 ,把绿色荧光蛋白GFP基因克隆于pcDNA3的SV40启动了下面 ,由SV40启动子控制 :含四个两种核酸基因的四联体克隆于pcDNA3的多克隆位点区 ,由T7启动子控制 ,构建成含两个Rz1、两个Rz2和GFP基因的转基因质粒pGTR ,以用于转基因抗病毒对虾的研究。
- 邹键沈学仁吴建华周国瑛龚祖埙
- 关键词:核酶绿色荧光蛋白
- 烟草花叶病毒装配起始位点反义RNA表达型中间载体的构建
- 1992年
- 利用基因工程方法培育抗病毒植物新品种的途径之一,是在植株中建立一个产生病毒基因组功能片段的反义RNA的系统。本工作设计并合成了一段烟草花叶病毒(TMV)装配起始位点反义RNA的基因,再以pBR 325为基本质粒,构建了包含带有花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子和PolyA信号的反义RNA表达单元,以及为筛选转基因植株所必须的NPT-Ⅱ表达单元的中间载体,为以后经土壤农杆菌而获得转基因烟草植株打下了基础。
- 彭海沈学仁吴建华龚祖埙
- 关键词:烟草花叶病毒反义RNA
- 心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂
- 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂,主要包括人心肌肌球蛋白轻链Ⅰ基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法,即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原—心...
- 龚祖埙彭宝珍周国瑛黄人健曹慧婷沈学仁沈菊英吴建华
- 文献传递
- 与TMV-RNA装配起始位点互补的cDNA片段对TMV体外装配的抑制
- 1989年
- 合成了与TMV-RNA病毒装配起始位点互补的、长度为二十个核苷酸的DNA片段。该片段用^(32)P标记后,代替反义RNA(antisense RNA)与TMV-RNA进行硝基纤维素膜点杂交和溶液杂交。结果表明,该cDNA片段在两种条件下均能与TMV-RNA进行杂交。将溶液杂交的RNA-cDNA复合体经酒精沉淀,再与TMV衣壳蛋白的20S聚合体制剂进行体外装配,用测定310nm吸收光谱变化和电子显微镜观察的方法鉴定装配结果。实验证明,该cDNA片段与TMV-RNA杂交后抑制了装配起始位点的活力,从而使TMV病毒颗粒的装配不能完成。这一结果提示,TMV基因装配起始位点顺宁的cDNA和反义RNA能够在体外抑制TMV病毒颗粒的装配。
- 彭海沈学仁吴建华龚祖埙
- 关键词:烟草花叶病毒CDNA片段
- 小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)提纯、粒子性质和血清学被引量:9
- 1990年
- 采用冰冻患病小麦叶片,经0.5M磷酸钾缓冲液pH7.0抽提,1/4体积四氯化碳澄清,6%聚乙二醇,3%NaCl和1%Triton X—100沉淀,二次差速离心(含20%蔗糖垫,0.3%Triton X—100).一次10—50%蔗糖密度梯度离心,最后经一次超速离心浓缩,成功地获得部分提纯制剂。经电镜观察,可见大量线状病毒粒子,很少有杂质。病毒粒子在中性条件下稳定,在酸性条件下变形。病毒粒子直径13—14nm.长度250—1800nm,其中在300—400nm,550—700nm之间具有二个主要分布峰。经紫外读数,病毒制剂表现为典型的核蛋白吸收特性.其中OD260/OD244为1.19,OD260/OD280为1.29。病毒粒子外壳蛋白有二个组分,分子量分别约为30kd和27kd。在免疫电镜实验中,小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和小麦黄花叶病毒(WYMV)抗血清不仅均能显著而有效地捕获汁液中的WSSMV粒子,而且还可在粒子外面包上一层厚厚的抗血清外套。
- 陈剑平阮义理龚祖(土贠)沈学仁沈菊英
- 关键词:小麦提纯血清学
- 上海地区香石竹斑驳病毒的理化特性被引量:2
- 1992年
- 从上海地区栽培的香石竹上分离到一种直径为34~35nm 等轴对称的病毒颗粒,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中病毒外壳蛋白分子量为40000道尔顿,并由约372个氨基酸残基组成。病毒核酸经 DNase 1、RNase 1和核酸酶 S1等酶切试验证明为单链 RNA,在1.0%的琼脂糖凝胶电泳中病毒核酸呈现一个分子量为1.2×10~6道尔顿的基因组分和一个较弱的分子量为0.5×10~6道尔顿的组分。根据病毒上述的理化特性以及免疫双扩散实验,证明目前在上海地区分离获得并引起本地区香石竹主要病毒病害的是香石竹斑驳病毒。
- 沈学仁沈菊英龚祖埙张爱平
- 关键词:香石竹病毒理化性质
- 香菇病毒的分离、诊断、侵染途径和生物学特性被引量:10
- 1992年
- 本文系统描述了香菇病毒病在菌丝体阶段和子实体阶段的各种症状。从具有典型病毒病症状的香菇菌丝体中分离出两种带毒菌株SLV-1和SLV-2的纯培养,并从这些菌丝体中纯化出一种34~35nm的球状病毒颗粒。测定结果表明,带毒菌株的纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶活性和对木屑培养料中纤维素、半纤维素、木质素的降解能力比其正常菌株明显下降。在用单双核杂交研究香菇病毒的侵染途径中,证实了性亲和性因子是控制香菇病毒传播的一个主要遗传因子,并讨论了病毒感染是香菇菌种退化的主要原因。
- 潘迎捷陈明杰汪昭月龚胜萍沈学仁龚祖埙沈菊英陈作义
- 关键词:香菇病毒病毒病病毒颗粒
- 一种含有单链RNA的香菇球状病毒被引量:19
- 1992年
- 从生长不正常的香菇(Lentinus edodes(Berk.)Sing)菌株中分离到一种等轴对称含单链RNA的病毒颗粒。病毒颗粒在电镜下直径为33~34nm,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中病毒外壳蛋白分子量为22000道尔顿。病毒核酸径DNase1和SI酶解试验及热变性紫外吸收曲线试验证明为单链RNA,在1.5%的琼脂糖凝胶电泳中,病毒核酸呈现一条带,分子量为2.38×10~6道尔顿。
- 沈学仁沈菊英陈作义龚祖埙陈明杰潘迎捷汪昭月方炳初王鸣歧
- 关键词:病毒形态