汤亚飞
- 作品数：147 被引量：300H指数：10
- 供职机构：广东省农业科学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生自动化与计算机技术生物学更多>>
- 侵染广东省葫芦科作物的中国南瓜曲叶病毒的分子特征被引量：6
- 2021年
- 【目的】中国南瓜曲叶病毒(squash leaf curl China virus,SLCCNV)是危害葫芦科作物的主要病毒之一,可侵染南瓜、葫芦、冬瓜、黄瓜、甜瓜、哈密瓜,严重影响葫芦科作物生产。论文旨在探究SLCCNV广东分离物的分子特征、亲缘关系及其致病性,为SLCCNV的防控提供科学依据。【方法】从广东省湛江市雷州市和徐闻县、惠州市博罗县、河源市源城区以及佛山市高明区共采集53份疑似感染菜豆金色黄花叶病毒属(Begomovirus)病毒的葫芦科作物病样,提取总DNA,利用菜豆金色黄花叶病毒属通用引物AV494/CoPR进行PCR检测。选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序,获得各分离物基因组A组分(DNA-A)的全长序列;同时利用背向引物PCR扩增、克隆及测序,获得各分离物基因组B组分(DNA-B)的全长序列。将得到的SLCCNV广东分离物DNA-A和DNA-B全长序列在NCBI中进行BLAST分析,利用SDT1.2软件MUSCLE alignment方法对序列相似性作进一步比较分析,应用MEGA7软件对获得的SLCCNV广东分离物及已报道的SLCCNV分离物进行系统发育分析。采用同源重组技术,构建SLCCNV河源南瓜分离物的侵染性克隆,通过农杆菌介导注射接种南瓜子叶,测定其致病性。【结果】PCR检测结果表明,53份疑似病样中有52份感染了菜豆金色黄花叶病毒属病毒;进一步从南瓜、葫芦、冬瓜以及白瓜4种葫芦科作物病样中分别克隆获得8个SLCCNV广东分离物基因组全序列,DNA-A组分全长大小为2735—2739 nt,含有6个ORF,与已报道SLCCNV相同。DNA-B组分大小为2701—2721 nt,含有2个ORF,分别编码与病毒运动相关的蛋白BC1和BV1。序列相似性比较结果显示,广东不同分离物DNA-A组分核苷酸序列相似性在94.9%以上,与已报道的SLCCNV其他分离物的相似性在88%以上;所获得的DNA-B组分核苷酸序列相似性在86.7%以上,与已报道的SLCCNV其他分离物的相似性在83%以上。系统发�
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- 关键词：分子特征侵染性克隆
- 一种多重PCR检测六种葫芦病毒的方法及试剂盒
- 本发明属于植物病毒检测技术领域，具体涉及一种多重PCR检测六种葫芦病毒的方法及试剂盒。本发明要解决的技术问题是为同时检测多种葫芦病毒提供一种新选择。本发明的技术方案是一种多重PCR检测六种葫芦病毒的方法，包括如下步骤：分...
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- 一种木尔坦棉花曲叶病毒侵染红麻的接种方法
- 本发明属于植物保护领域，特别涉及一种木尔坦棉花曲叶病毒侵染红麻的接种方法。本发明通过人工注射法将农杆菌介导的木尔坦棉花曲叶病毒侵染性克隆接种到4～5叶期的红麻植株的叶肉组织和茎干维管束组织中，进而实现木尔坦棉花曲叶病毒对...
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- 文献传递
- 一种植物病组织表面快速消毒装置
- 本实用新型涉及一种植物病组织表面快速消毒装置，包括：底座、竖杆、上转动架、下转动架、多个液体储存器、多个过滤器皿；上转动架和下转动架安装在竖杆上且绕竖杆在水平面上转动；液体储存器安装在上转动架上，过滤器皿和玻璃培养皿放置...
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- 文献传递
- 海南红麻曲叶病的病原检测与鉴定被引量：10
- 2015年
- 红麻曲叶病是2012年在海南省海口市发现的一种新病害,病株表现为叶片向上卷曲、叶脉肿大、叶脉变深绿色等症状。PCR检测结果显示,该病样中均存在菜豆金色花叶病毒属病毒。基因克隆及序列分析结果表明,该病毒分离物(HN08)基因组仅含A组分(DNA-A),其全长为2 738 nt,与木尔坦棉花曲叶病毒(CLCuMuV)各分离物的相似性均大于89.0%,其中与中国各分离物的相似性均大于99.0%。该病毒分离物也伴随有β卫星分子,其全长为1 346 nt,与CLCuMuV各分离物伴随的β卫星分子(CLCuMuB)序列相似性大于83.0%,其中与分离物Fz1的序列相似性最高,为99.7%。构建了HN08 DNA-A及其β卫星分子侵染性克隆,通过农杆菌注射接种红麻,接种后30 d,HN08 DNA-A及其β卫星分子混合接种的红麻植株新出叶片开始产生曲叶症状;接种后60 d,二者混合接种的植株大部分叶片表现为严重的曲叶症状,且与田间自然病株症状相同,而二者各自单独接种的红麻植株没有产生明显的症状。PCR及Southern blot检测进一步证实这些症状是由HN08 DNA-A及其β卫星分子的共同侵染引起的。因此,海南红麻曲叶病是由CLCuMuV及其伴随的β卫星分子(CLCuMuB)共同侵染引起的。本文首次报道了红麻是CLCuMuV自然新寄主。
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- 关键词：病原鉴定
- 一种用于监测病毒对植物影响的系统及方法
- 本发明提供一种用于监测病毒对植物影响的系统及方法，能够实现对实验植株自动拍照和自动浇水，并能防止外界的传播介体进入造成试验污染，包括：平台支架、水平转台、弧形导轨和隔离罩；所述水平转台设置在所述平台支架上，所述水平转台包...
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- 文献传递
- 田阳番茄曲叶病毒侵染性克隆及其构建方法
- 本发明属于生物基因工程技术领域，具体涉及一种田阳番茄曲叶病毒，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。以及由含有该序列的病毒侵染性克隆、重组菌，由本发明提供的田阳番茄曲叶病毒侵染性克隆的重组菌具有较强的病毒侵染性和致病...
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- 假茄科雷尔氏菌引起向日葵青枯病在中国的首次报道被引量：2
- 2023年
- 茄科雷尔氏菌复合种侵染引起的青枯病是众多作物上的毁灭性病害。2020年笔者首次在广东省东莞市发现向日葵青枯病,并对其病原菌进行了鉴定。室内人工接种试验、16S rDNA序列比对和演化型鉴定结果表明,引起向日葵青枯病的病原菌为假茄科雷尔氏菌Ralstonia pseudosolanacearum。生理生化特性和致病性鉴定结果表明,分离自向日葵的15株假茄科雷尔氏菌为1号生理小种和生化变种3。egl基因部分序列系统进化分析表明,15株假茄科雷尔氏菌分属4个序列变种,其中8株菌株为序列变种17,5株菌株为序列变种13,其余2株菌株分别为序列变种14和序列变种54。本文是我国首次报道假茄科雷尔氏菌侵染引起向日葵青枯病。
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- 关键词：向日葵分子鉴定
- 西瓜病毒A的外壳蛋白CP的基因及其蛋白、抗体和应用
- 本发明涉及植物基因工程与病毒诊断技术领域，具体涉及一种编码西瓜病毒A的外壳蛋白CP的核苷酸序列，具体如序列表中SEQ ID NO.20所示的核苷酸序列。并将该核苷酸序列克隆到原核表达载体上，转化大肠杆菌，经过蛋白表达纯化...
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- 一种用于防治火龙果褐腐病的含戊唑醇和咯菌腈杀菌剂组合物及其应用
- 本发明公开了一种用于防治火龙果褐腐病的含戊唑醇和咯菌腈杀菌剂组合物及其应用，所述一种抗火龙果褐腐病的杀菌剂组合物，含有质量比为1：9到9：1的戊唑醇和咯菌腈。本发明采用戊唑醇和咯菌腈两种药剂的复配，能够有效缓解病菌抗药性...
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