林玉双
- 作品数:9 被引量:12H指数:2
- 供职机构:福州大学更多>>
- 发文基金:福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 糖基转移酶基因sisZ在大肠杆菌中的克隆与表达
- 2008年
- 目的:从西索霉素产生菌中克隆出表达西索米星的糖基转移酶基因sisZ。方法:采用PCR法从伊纽小单孢菌(Micromonospora inyoensis)的染色体扩增参与西索霉素生物合成的糖基转移酶基因sisZ,然后先后装载到克隆载体pUC18和表达载体pET-30a上。结果和结论:成功从伊纽小单孢菌扩增出参与西索霉素生物合成的糖基转移酶基因sisZ。其开放阅读框长1176bp,编码含391个氨基酸(41690D)的多肽链,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中实现表达。基因sisZ的碱基序列与gntZ(M.echinospora)的碱基序列的同源性高达94%。预测的SisZ蛋白序列与GntZ的同源性为98%。
- 洪文荣林玉双朱春宝陈代杰朱宝泉
- 关键词:克隆
- 黑暗链霉菌选育及其生物合成信息流阻断的探索
- 黑暗链霉菌是重要的氨基糖苷类抗生素——安普霉素和妥布霉素的产生菌,为不断提高其发酵单位,采用常规育种手段进行选育,获得了高产菌株。为进一步提高产生菌的质量,拟采用现代基因工程技术,阻断不同组分的生物合成信息流,以期获得单...
- 林玉双
- 关键词:黑暗链霉菌深层发酵穿梭载体
- 打靶载体pIJ792的构建被引量:2
- 2010年
- 目的利用pIJ790,pIJ773和pUC19等基本质粒,构建金色链霉菌基因打靶筛选体系所需质粒pIJ792。方法以质粒pIJ790为模板,将PCR扩增的cat基因片段插入到pMD19-T的多克隆位点,得重组质粒pFD31。EcoRⅠ和HindⅢ双酶切pIJ773,其小片段与pUC19经同样双酶切后的片段酶连克隆,得新质粒pFD32。pFD31和pFD32再分别经SacⅠ酶切,将pFD31含cat的小片段和pFD32的大片段酶连克隆,筛选得重组质粒pFD33,EcoRⅠ与HindⅢ酶切,将切下的两个小片段与pIJ773经同样双酶切后的大片段进行酶连克隆,最终得筛选质粒pIJ792。结果新质粒pIJ792的抗氯霉素能力超过150μg.mL-1。结论 pIJ792可满足金色链霉菌基因打靶的筛选需要,实现了用于金色链霉菌PCR基因打靶所需筛选体系的构建。
- 张南燕洪文荣林玉双樊伟明
- 关键词:基因打靶金色链霉菌
- 橄榄星小单孢菌发酵培养基及发酵条件的优化
- 2010年
- 本文对产福提霉素的橄榄星小单孢菌H3-25进行发酵培养基和发酵条件的优化,确定了发酵培养基的适宜配比为:可溶性淀粉4%,葡萄糖1%,酵母粉4%,硫酸镁0.1%,碳酸钙0.1%,氯化钴2μg.L-1,甘氨酸0.1%;最佳发酵条件为:初始pH7.0,培养温度32℃,移种时间36h,移种量10%,摇瓶装量50mL/250mL,发酵周期8d。
- 王名堂谢莉莉林玉双洪文荣
- 关键词:培养基发酵条件
- 一株产阿泊拉霉素的工程菌及其应用
- 本发明属于医药技术领域,涉及一种灭活<I>tobS1-C</I>基因功能的产阿泊拉霉素的工程菌及其应用,所述工程菌为黑暗链霉菌(<I>Streptomycestenebrarius</I>)T103,已于2011年11月...
- 洪文荣林玉双
- 文献传递
- 氨甲酰妥布霉素高产菌株选育及其发酵特性研究被引量:8
- 2008年
- 目的筛选氨甲酰妥布霉素高产菌株并稳定其发酵效价。方法以黑暗链霉菌Ts-228为出发菌株,经自然分离,UV诱变结合耐自身代谢产物处理,采用琼脂块法并结合摇瓶发酵来筛选高产菌,获得了Tt-49新菌株。以摇瓶发酵考察生长特性,罐上发酵绘制代谢曲线。结果效价提高了1.8倍,妥布霉素含量高达68.5%。该菌株生长周期仅4d,传代稳定。种龄18h左右,接种量10%。按照代谢曲线图进行调控,发酵罐的产抗水平达5865u/ml。结论自然分离与诱变相结合,是黑暗链霉菌选育的有效途径。出发菌株经UV诱变和耐受驯育,发酵效价显著提高。溶氧是妥布霉素发酵生产中的重要调控因子。
- 林玉双洪文荣林烨梁枝定
- 关键词:黑暗链霉菌深层发酵抗生素
- 依尼奥小单孢菌西索霉素生物合成基因簇
- 本发明从西索米星产生菌依尼奥小单孢菌Ts388高产菌株中克隆到西索米星生物合成基因簇,该基因簇总长约37739p,包括多个orf和2个rRNA(rRNA1和rRNA2);分子量:(37.739/1.575)*10<Sup...
- 洪文荣李殿殿许向前林玉双
- 文献传递
- 小球藻的分离及生物量研究被引量:2
- 2008年
- 对筛选出的小球藻的培养方式、培养基中C、N源及生长环境条件等对其生物量的影响进行了较为系统的研究。研究发现:异养培养是最佳的培养方式;碳源以葡萄糖为好,培养基中起始以添加10g.L-1葡萄糖比较适宜;硝酸钾和尿素混合作为氮源供小球藻生长,对小球藻的生长有显著的促进作用,最佳组合为0.6g.L-1KNO3和0.12g.L-1尿素;最适合C/N质量比值为34∶1。
- 朱碧银陈艳林玉双洪文荣
- 关键词:小球藻
- 一株产阿泊拉霉素的工程菌及其应用
- 本发明属于医药技术领域,涉及一种灭活<I>tobS1-C</I>基因功能的产阿泊拉霉素的工程菌及其应用,所述工程菌为黑暗链霉菌(<I>Streptomycestenebrarius</I>)T103,已于2011年11月...
- 洪文荣林玉双