林海英
- 作品数：27 被引量：82H指数：6
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省教育厅资助项目福建省科技三项基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程农业科学更多>>
- 基质金属蛋白酶-2/9敏感型可跨膜融合抗氧化酶的表达、纯化和表征被引量：1
- 2022年
- 融合了跨膜肽的抗氧化酶可进入细胞,保护细胞免受放射损伤。然而跨膜肽的跨膜能力没有靶向性,其也可把抗氧化酶带入肿瘤细胞进而保护肿瘤细胞,降低放疗的效果。为此,根据多数肿瘤细胞微环境中存在活性基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2或MMP-9的特点,在细胞跨膜肽R9与人铜、锌超氧化物歧化酶(superoxide dismutase 1,SOD1)和谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)之间融合MMP-2/9的底物肽X,设计了融合蛋白GST-SOD1-X-R9。该蛋白在肿瘤微环境中可因MMP-2/9酶切底物肽X而失去跨膜肽,从而无法进入肿瘤细胞,进而只能进入正常细胞。全基因合成SOD1-X-R9序列,并将其插入原核表达载体pGEX-4T-1中,得到表达质粒,并实现了GST-SOD1-X-R9融合蛋白的可溶表达。GST-SOD1-X-R9经硫酸铵沉淀和GST亲和层析纯化,分子量约为47 kDa,与理论值一致。纯化的融合蛋白的SOD活性和GST活性分别为2954 U/mg和328 U/mg。GST-SOD1-X-R9的SOD活性或GST活性在生理条件下几乎没有变化。该融合蛋白在溶液中可被胶原酶Ⅳ部分水解。分别建立了2D和3D培养的HepG2细胞模型来检验肿瘤微环境中的MMP-2活力对该蛋白跨膜能力的影响。在2D培养模型中,HepG2的MMP-2活力极低,但在3D培养模型中,随着培养时间的增加,HepG2肿瘤球的体积变大,其胞外MMP-2活力也随之增强。GST-SOD1-X-R9在2D培养的HepG2细胞中具有和GST-SOD1-R9蛋白一样的跨膜效率,但在3D培养的HepG2细胞球中的跨膜能力大大降低。本研究为后续深入研究GST-SOD1-X-R9靶向防护正常细胞的氧化损伤效应奠定了基础。
- 何火聪林丽香李玲玲李玲玲林海英潘剑茹
- 关键词：抗氧化酶纯化
- 肺炎球菌外膜蛋白A的分离纯化及免疫原性
- 2005年
- 培养肺炎球菌FY06,采用表面活性剂从菌泥抽提外膜蛋白,依次用硫酸铵盐析法和DEAE纤维素离子交换法对肺炎球菌外膜蛋白进行分离和纯化。免疫原性实验表明:所制备的外膜蛋白A具有优良的免疫原性,对5种血清型肺炎球菌均有较广泛的交叉免疫效果,可作为新一代的肺炎球菌疫苗成分。
- 林海英王航盛军孟春郭养浩
- 关键词：肺炎球菌分离纯化免疫原性
- 小分子量海藻硫酸多糖κ-卡拉胶的乙酰化被引量：10
- 2006年
- 采用了常规直接酰化、相转移催化酰化（相转移催化剂分别为四丁基溴化铵和18-冠醚-6）和离子交换-酰化法对3种小分子量（-3、-5和-10kDa）κ-卡拉胶进行乙酰化．常规直接酰化法获得产品的酰化度很低；相转移催化酰化法中以18-冠醚-6为催化剂时酰化度较高，适宜制备较低分子量（如-3和-5kDa）且酰化度为中等以下的κ-卡拉胶；离子交换-酰化法所得产品的酰化度最高，但因制备路线长，适合较大分子量（如-10kDa）κ-卡拉胶的酰化．红外光谱和^13C—NMR证实乙酰基优先接入G6位伯羟基上，其次才接入G2和A2位的仲羟基上．
- 唐凤翔陈方李峰林海英万超温钦清郭养浩
- 关键词：乙酰化相转移催化离子交换
- 肺炎球菌表面蛋白的克隆表达与免疫原性研究被引量：1
- 2008年
- 从肺炎球菌YF05中扩增了肺炎球菌表面蛋白A(PspA)和肺炎球菌表面黏附素A(PsaA)基因,以pET27b(+)为载体构建了重组表达质粒的表达系统后,转化入大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,表达的重组蛋白约占菌体总溶解蛋白的75%,结果显示:表达的PspA蛋白和PsaA蛋白,分子量分别约为75kDa和37kDa。成功表达的重组蛋白具有较强的免疫活性和交叉免疫效果。
- 蔡倩影方亮黄金钟林海英郭养浩孟春
- 关键词：原核表达
- 金色链霉菌代谢与胞外多糖降解消耗耦联效应的研究被引量：2
- 2002年
- 以淀粉为主要碳源的金色链霉菌发酵过程中 ,研究了细胞分泌的淀粉酶的淀粉降解产物 .二糖是淀粉酶的主要产物 .发酵过程中 ,胞外淀粉酶的活性同细胞的生长耦合 ,在对数生长期 ,酶活和细胞的笔生长速率达到最大 ,分别为 0 .12g·L- 1 ·min- 1 、2 .4g·L- 1 ·h- 1 .胞外多糖浓度对淀粉酶活力。
- 孟春郭养浩石贤爱陈剑锋林海英李泳宁
- 关键词：胞外多糖金色链霉菌二糖淀粉酶活力生长代谢发酵过程
- 耳突麒麟菜多糖的提取分离及表征被引量：8
- 2003年
- 对耳突麒麟菜多糖提取、分离纯化质以及结构性质进行研究 .耳突麒麟菜粗多糖的提取率为 46 .7% ,粗多糖可被 4%的KCl完全分级为不溶胶多糖与可溶胶多糖 ,不溶胶多糖占所提取粗多糖量的 83% ,可溶胶多糖占 14% .不溶胶多糖的硫酸根含量和 3 ,6 -AG含量分别为 30 .8%和 2 6 .3% ,可溶胶多糖的硫酸根含量和 3 ,6 -AG含量分别为 38.5 %和 30 .1% .经红外光谱分析 ,不溶胶多糖的结构类似κ -卡拉胶 ,可溶胶多糖的结构类似 ζ -卡拉胶 .两种多糖经过酸水解后 ,3 ,6 -AG和硫酸根含量下降 ;经过碱处理后 ,3,6 -AG含量增加 ,但硫酸根含量显著降低 .
- 李锋唐凤翔林海英肖美添郭养浩
- 关键词：海洋红藻抗病毒药物
- 一种鱼类广谱弧菌亚单位疫苗及制备方法
- 本发明公开了一种用于防治鱼类致病性弧菌感染的广谱亚单位疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。该疫苗以副溶血弧菌表面具有保守结构的外膜蛋白OmpK和鞭毛蛋白FlaA的融合蛋白OmpK-FlaA作为抗原成分。其特征是将副溶血弧...
- 林海英郑磊郭养浩唐凤翔石贤爱郑允权
- 肺炎链球菌表面蛋白 A 的家族Ⅰ不同支系融合蛋白的制备及免疫原性研究被引量：1
- 2015年
- 目的：构建肺炎链球菌家族Ⅰ中支系1和2肺炎链球菌表面蛋白A（ PspA）重组融合蛋白，分析融合蛋白的免疫原性。方法 PCR扩增目的基因片段，构建重组质粒并表达，ELISA检测抗体滴度和亲和度，以及抗蛋白血清特异性和免疫交叉性。结果成功构建重组质粒并原核表达。血清中抗体滴度可达到1×10^4，亲和度达到2×10^5，调理吞噬试验阳性，保护试验效果显著。结论肺炎链球菌家族Ⅰ中支系1和2肺炎链球菌表面蛋白A（ PspA）重组融合蛋白具有较高的免疫原性，能够诱导小鼠产生高滴度和高特异性的抗体，具有免疫交叉保护性。
- 林海英彭永辉张双玲罗春华郑美云吕唯詹杜清
- 关键词：肺炎链球菌重组蛋白免疫原性
- 竹叶贮藏及叶绿素的提取工艺研究
- 1992年
- 通过正交试验，认为竹叶干燥保藏十天以内．以食用酒精为溶剂，物料比为1：6，浸提温度 40℃，一次浸提时间 2h，可以获得较好的浸提效果，经真空浓缩后得到叶绿素浸膏．浸提前的热烫液可以加工成饮料．
- 蔡锦治雷晋明林海英
- 关键词：竹叶叶绿素贮藏
- 肺炎球菌表面蛋白A(PspA)及其荚膜多糖交联物的免疫原性和交叉保护作用被引量：4
- 2008年
- 分别采用肺炎球菌表面蛋白A(PspA)和PspA-荚膜多糖交联物免疫小鼠,研究PspA及其交联物的免疫特性.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗原的免疫原性,用动物保护试验检验抗原对肺炎球菌6B,5,1,23F,19F型的交叉免疫效果.实验结果表明:肺炎球菌表面蛋白A及其多糖交联物表现出一定的交叉保护作用,具有较好的应用前景.
- 黄金钟林海英蔡倩影郭养浩孟春
- 关键词：交联物免疫原性
