林伊凤
- 作品数：13 被引量：23H指数：3
- 供职机构：复旦大学上海医学院病理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 醛糖还原酶基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞增殖的影响被引量：7
- 2005年
- 目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染对体外培养大鼠肾脏系膜细胞(MsC)增殖的影响,并对其机制进行初步探讨。方法脂质体转染法将AR基因转入大鼠MsC,蛋白印迹鉴定转染效率。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期与凋亡,对比正常MsC和AR转染MsC的生长速度及AR抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)和小牛血清(NBS)促MsC增殖作用的影响。蛋白印迹检测PDGF-BB作用后AR和c-Jun表达的变化,EMSA检测转录因子AP-1的活性。结果(1)转染MsCAR表达较正常MsC明显增高;(2)AR转染MsC较正常MsC生长速度快(P<0.01);(3)ARI可部分抑制PDGF-BB对正常MsC、AR转染MsC以及NBS对AR转染MsC的促增殖作用(P<0.01,P<0.05),而对NBS促正常MsC的增殖无显著影响;(4)PDGF-BB刺激MsC后可上调AR和c-Jun蛋白的表达,ARI可减弱c-Jun的这种表达增高;(5)PDGF-BB可活化转录因子AP-1,而ARI可削弱此作用。结论AR可能参与了MsC在病理情况下的过度增殖过程,其作用机制与AP-1活化有一定关系。
- 车祺蒋涛林伊凤李慧张农
- 关键词：体外培养基因转染系膜细胞增殖肾脏系膜细胞AP-1活化
- 组织因子途径抑制剂-1诱导大鼠肾系膜细胞凋亡作用的研究
- 目的观察重组人组织因子途径抑制剂-1（human recombinant tissue factor pathway inhibitor-1,hrTFPI-1）对大鼠肾系膜细胞 （mesangial cell,MsC）凋...
- 林伊凤马端蒋涛郭泓珅张农
- 关键词：系膜细胞凋亡
- 文献传递
- 重组组织因子途径抑制物对大鼠肾系膜细胞凋亡及Fas和bcl-2表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察重组组织因子途径抑制物（rTFPI）对大鼠肾脏系膜细胞（MsC）凋亡的影响，并探讨其可能相关的凋亡机制。方法免疫组织化学（ABC）法检测人肾穿组织中TFPI表达；免疫荧光法检测培养正常大鼠MsC中TFPI表达；将rTFPI及其不同结构域蛋白分别作用于大鼠MsC，Hoechst 33258染色观察MsC细胞核形态变化；流式细胞仪定量检测MsC细胞凋亡率；DNA片段凝胶电泳分析MsC凋亡情况；Western blot检测凋亡相关激酶半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、bcl-2以及Fas蛋白的表达。结果系膜增生型肾小球肾炎肾小球内TFP1表达高于轻微病变者；正常大鼠MsC中有TFPI表达；rTFPI及其C末端能诱导大鼠MsC发生凋亡，并具有剂量和时间依赖性；加入rTFPI后，MsC的凋亡率分别为对照组的2．1、3．0及4．9倍（P〈0．05）。活性形式的caspase-3和Fas蛋白表达明显高于对照组，bcl-2表达无明显变化。结论rTFPI能诱导正常大鼠MsC发生凋亡，并且其主要功能区位于C末端，死亡受体Fas／FasL信号通路可能参与了rTFPI诱导MsC凋亡的过程。
- 林伊凤马端梁旺蒋涛赵仲华张农
- 关键词：肾小球系膜细胞凋亡CD95
- 组织因子途径抑制剂治疗弥散性血管内凝血的研究进展被引量：1
- 2006年
- 林伊凤张农马端
- 关键词：弥散性血管内凝血
- 组织因子途径抑制物(TFPI)对大鼠系膜细胞凋亡的影响及相关机制研究
- 肾小球硬化是各种原因所致。肾小球损伤和病变的共同结局，其重要的病理特征之一是肾小球内细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的异常沉积。ECM合成/降解失衡以及ECM代谢调控的异常是导致肾小球硬化发...
- 林伊凤
- 关键词：组织因子途径抑制物肾小球系膜细胞细胞凋亡基因转染
- 文献传递
- 兔股动脉粥样硬化斑块模型中TF及TFPI的变化被引量：2
- 2008年
- 目的:观察兔股动脉粥样硬化斑块发展过程中斑块内组织因子(TF)及组织因子途经抑制物-1(TFPI-1)、组织因子途经抑制物-2(TFPI-2)的变化。方法:新西兰雄兔通过高脂饲养合并股动脉球囊损伤建立动脉粥样硬化斑块模型。在建模8周、10周和12周,分别截取球囊损伤处股动脉标本,检测斑块组织内TF、TF-PI-1和TFPI-2的蛋白表达;并测定斑块内TF、TFPI-1和TFPI-2的mRNA水平。结果:自8周、10周到12周,血管斑块中TF、TFPI-1和TFPI-2的观测区域内阳性染色面积均逐渐增加。自8周、10周到12周,血管斑块中TF的mRNA水平和TFPI-1的mRNA水平均逐渐增加;TFPI-2mRNA表现为前期无明显变化,12周时显著下调。结论:在兔股动脉粥样硬化斑块的形成过程中,随着斑块内TF基因及蛋白表达的增加,TFPI-1和TFPI-2反应性表达增加,但其表达水平未能完全抑制斑块的进展。
- 黄成磊罗心平李剑梁旺林伊凤金波沈伟施海明马端
- 关键词：动脉硬化
- 醛糖还原酶影响转化生长因子β1诱导的大鼠系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达及其机制的研究被引量：7
- 2005年
- 目的探讨醛糖还原酶(AR)对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的大鼠系膜细胞(MsC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和IV型胶原(ColIV)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号传导通路。方法经亚克隆构建AR真核表达质粒pCDNA3AR,经脂质体介导及G418筛选后,将pCDNA3AR稳定转染至大鼠MsC中。应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Western印迹法和免疫荧光法检测转染MsC表达AR情况;以Western印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC,应用醛糖还原酶抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat分别孵育的MsC:在TGFβ1刺激前后的FN、ColIV以及MAPK/phosphoMAPK表达变化。结果与正常MsC相比,两种ARI———Sorbinil和Zopolrestat均可下调MsC的FN和ColIV蛋白表达,而AR转基因MsC中FN和ColIV表达均升高(均P<0.05);TGFβ1作用后,MsC的FN和ColIV蛋白表达升高,预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,二者表达均下降,而AR转基因MsC中二者表达进一步增高(均P<0.05)。各组细胞在TGFβ1刺激前后总ERK、JNK和p38表达均无明显变化。正常MsC在TGFβ1刺激后phosphoERK、phosphoJNK、phosphop38表达升高,与之相比,若预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,则phosphoJNK、phosphop38表达下降,AR转基因MsC中phosphoJNK表达更为升高(P<0.05)。结论AR基因作为TGFβ1反应性基因之一,可能参与TGFβ1诱导的FN和ColIV表达的调控,且AR的作用有可能与TGFβ1刺激后的JNKMAPK和p38MAPK信号通路的活化有关。AR可能参与了非糖尿病导致的肾小球纤维化、硬化的病理发展过程。
- 蒋涛车祺林伊凤赵仲华陈琦张农
- 关键词：转化生长因子Β1纤连蛋白WESTERN印迹法细胞外基质成分蛋白表达
- 醛糖还原酶参与大鼠MsC表达iNOS和NO及其调控机制的研究被引量：3
- 2008年
- 目的采用醛糖还原酶抑制剂(aldose reductase inhibitor,ARI)抑制醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性,观察其对大鼠系膜细胞(mesangical cells,MsC)在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNFα)作用后表达诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthesis,i NOS)的影响,并对这一现象进行初步的机制探讨。方法实验分为对照组、Sorbinil作用组、Zopolrestat作用组。分别采用NO测试盒检测亚硝酸盐含量;免疫荧光、Western blot检测i NOS表达;Real-ti me PCR检测iNOS mRNA,对比正常生长MsC及ARI(Sorbinil和Zolpor-estat)预处理的MsC在TNFα作用不同时间后上述指标的变化。分别采用非放射性标记的分光光度检测法检测转录因子NFκB p65亚基试剂盒(colori metric nonradioactive NFκB p65 transcription factor assay kit)以及Western blot的方法对以上各组细胞进行转录因子NFκB活性检测,及其上游通路IκB信号通路活化情况检测。结果与正常MsC相比,TNFα可上调培养大鼠MsC中i NOS mRNA和蛋白的表达,以及NO合成水平,但此作用可以被两种ARI不同程度地抑制;抑制TNFα导致的NFκB的活化及IκBα信号通路的磷酸化,并具有一定的时间相关性。结论AR参与调控TNFα诱导i NOS表达上调的过程,且此调控可能是通过影响转录因子NFκB的活性以及上游信号通路的活化而实现的。
- 瞿俊杰蒋涛林伊凤李慧陈琦张农
- 关键词：醛糖还原酶肿瘤坏死因子Α诱导型一氧化氮合酶NFΚB
- HGF／c-Met抑制高糖诱导的大鼠系膜细胞内氧化应激的研究
- 目的探讨肝细胞生长因子 （hepatocyte growth factor,HGF）对高糖作用下大鼠系膜细胞（mesangial cell,MsC）的抗氧化作用及其机制。方法培养的大鼠MsC分别在正常糖5．5mmol／L...
- 李慧蒋涛林伊凤赵仲华陈琦张农
- 文献传递
- 醛糖还原酶对TGF-β1诱导的大鼠系膜细胞细胞外基质成分表达的影响
- 目的探讨醛糖还原酶(AR)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠系膜细胞(MsC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(Col IV) 蛋白表达的影响以及可能涉及到的信号通路。方法采用酶切、连接方法构建AR真核...
- 蒋涛车琪林伊凤赵仲华陈琦张农
- 文献传递
