杨连华
- 作品数：38 被引量：53H指数：4
- 供职机构：浙江省医学科学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省科技厅项目浙江省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- HSV-2DNA疫苗诱导小鼠免疫应答研究被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨含有单纯疱疹病毒Ⅱ型 (HSV - 2 )糖蛋白D全基因序列的重组质粒作为DNA疫苗的可能性。方法 采用PCR方法获得HSV - 2 gD片段 ,构建含HSV -gD片段的重组质粒 pcDNA3- gD。重组质粒作为DNA疫苗免疫小鼠 ,观察其对小鼠免疫效果及保护作用。结果 重组质粒 pcCDNA3-gD免疫小鼠后可产生特异性抗体 ,可保护小鼠免受HSV - 2的致死性攻击 ,存活率达 75 %。结论 重组质粒 pcDNA3- gD可诱导小鼠产生特异性免疫反应 ,可以作为HSV的候选DNA疫苗。
- 洪艳杨连华陈勇经络蒋骏航王怡婷
- 关键词：单纯疱疹病毒DNA疫苗糖蛋白D
- HSV-2DNA疫苗诱导小鼠免疫应答研究
- 目的探讨含有单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D全基因序列的重组质粒作为DNA疫苗的可能性。方法采用PCR方法获得HSV-2gD片段,构建含HSV—gD片段的重组质粒pcDNA3—gD。重组质粒作为DNA疫苗免疫小鼠,...
- 洪艳杨连华陈勇经络蒋骏航王怡婷
- 关键词：单纯疱疹病毒DNA疫苗糖蛋白D
- 文献传递
- 戊型肝炎病毒结构蛋白基因的真核表达
- 戊型肝炎(HepatitisE)是一种由戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)引起的经肠道传播的病毒性肝炎,通常由于水源污染而引起暴发流行。该病常见于亚洲、非洲及中美洲等发展中国家,我国为高发区,人群感染...
- 经络洪艳杨连华王怡婷胡华军陈勇
- 关键词：戊型肝炎病毒细胞裂解物重组酵母菌酵母基因组结构蛋白基因真核表达
- 文献传递
- 地高辛标记RT-PCR检测甲肝减毒活疫苗的研究
- 1999年
- 以编码甲肝病毒ＶＰ３ 羧基端的基因区为目标区，运用地高辛标记ＲＴＰＣＲ 法对甲肝疫苗进行检测，并与ＴＣＩＤ５０ 检测法进行比较。建立甲肝减毒活疫苗滴度的地高辛标记ＲＴＰＣＲ 检测法。结果显示：地高辛ＲＴＰＣＲ 法灵敏度略高于ＴＣＩＤ５０ 法，特异性与ＴＣＩＤ５０ 相似，且快速简便，易于推广应用。结果表明：地高辛标记ＲＴＰＣＲ 法是一种简便、快速、灵敏的甲肝病毒检测方法，可用作疫苗的常规检测。
- 洪艳陈勇罗永能杨连华
- 关键词：地高辛RTPCR甲肝疫苗滴度
- 戊型肝炎病毒嵌合蛋白的免疫应答的初步研究被引量：4
- 2005年
- 目的:对含有HEV主要抗原表位的嵌合蛋白进行表达与纯化,并对其免疫原性进行研究.方法:将含有一段HEV ORF2基因片段(394～660 aa)和HEVORF3全基因的表达质粒pHEV23在大肠杆菌中进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,其表达产物经Ni2+-NTA树脂亲和纯化,透析复性.纯化蛋白免疫小鼠,用ELISA检测小鼠血清IgG抗体,T细胞增殖反应检测细胞免疫应答.以Western-blot检测纯化蛋白对患者阳性血清的免疫反应性.结果:纯化蛋白的分子量为 55 KDa,纯度达 90% 以上;实验组特异性抗体水平明显高于对照组;T细胞增殖反应实验组与对照组比较有极显著性差异.纯化蛋白能与患者阳性血清呈特异反应. 结论:嵌合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,为进一步研究开发HEV诊断试剂盒及基因工程疫苗提供了基础.
- 洪艳陈勇杨连华王怡婷经络胡华军
- 关键词：戊型肝炎病毒嵌合重组蛋白
- 中国五省市甲型肝炎病毒基因分型的研究被引量：13
- 2000年
- 为了解甲型肝炎 (甲肝 )病毒 (HAV)在中国几个城市的基因型分布 ,选择浙江杭州、江苏启东、安徽铜陵、云南昆明和上海市等的甲肝病人粪便标本或血清标本 ,以逆转录 -套式聚合酶链反应 (RT nPCR)扩增合成HAVVP1/2A交接区基因区 ,并进行直接核苷酸序列分析和差异比较。结果表明 ,从这些城市甲肝病人分离到的 17株HAV株均属基因Ⅰ型 ,为IA和IB亚型 ;所有HAV株间核苷酸差异均小于 15 % ,但约 5 0 %HAV株株间核苷酸差异大于 7 5 % ,说明中国流行或散发的HAV株可能有基因IA、IB亚型同时存在。该项研究结果将为HAV的分子流行病学追踪调查提供方法和依据。
- 陈勇洪艳杨连华倪崖陈念良凌志强愈为群毛江森
- 戊型肝炎病毒嵌合基因疫苗的初步研究
- 目的构建含戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框架(ORF2)和ORF3嵌合基因的重组质粒,并探讨其作为 DNA疫苗的可能性。方法利用PCR方法获得约0．8kb的戊型肝炎ORF2片段和ORF3的完整片段,同时将2段片段克隆到同...
- 洪艳阮冰杨连华经络王怡婷陈勇
- 关键词：戊型肝炎DNA疫苗体液和细胞免疫
- 文献传递
- 甲型肝炎病毒中国流行株5’NCR核苷酸序列异质性研究
- 目的了解甲型肝炎病毒中国流行株5’非编码区(5’NCR)核苷酸序列的异质性。方法选择浙江、江苏、安徽、云南等地的甲肝病人粪便或血清标本,以逆转录-套式聚合酶链反应(RT—nPCR),扩增合成5’NCR高变区基因片段,并进...
- 陈勇洪艳杨连华陈念良倪崖凌志强余为群毛江森
- 关键词：甲型肝炎病毒核苷酸
- 文献传递
- 单纯疱疹病毒DNA疫苗的免疫原性和保护效力被引量：1
- 2003年
- 洪艳杨连华陈勇经络蒋骏航王怡婷
- 关键词：单纯疱疹病毒DNA疫苗免疫原性保护效力
- 消毒餐巾纸对常见致病菌和乙型肝炎病毒灭活效果的实验研究
- 1995年
- 本文采用乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和某些细菌作为灭活指标以观察消毒巾的消毒效果。经试验表明消毒巾在室温存放二个半月对杀灭细菌和乙型肝炎病毒效果未见明显下降:存放七个月,消毒纸巾未发现霉变、腐蚀迹象,对人体无毒,对皮肤无刺激。现将结果摘要报告如下。1 消毒巾对4种细菌的消毒作用
- 励千里杨连华倪崖
- 关键词：病原菌乙型肝炎病毒灭活效果
