杨春贤
- 作品数：108 被引量：580H指数：14
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- AaPIF3对青蒿素生物合成基因及AaERF1的转录调控研究被引量：2
- 2020年
- AaPIF3是药用植物黄花蒿(Artemisia annua)中正调控青蒿素生物合成的一个bHLH转录因子,但其具体的调控机制并不清楚.综合采用分子生物学和生物化学方法研究AaPIF3调控青蒿素生物合成的机制,采用酵母单杂交(Yeast One-hybrid)技术研究AaPIF3与青蒿素生物合成途径中4个基因(ADS,CYP71AV1,DBR2和ALDH1)和AaERF1启动子的相互作用;采用实时荧光定量PCR技术检测AaERF1的表达量;采用双荧光素酶(Dual-Luciferase)技术研究AaPIF3对AaERF1的转录激活作用.结果表明,AaPIF3均不能与青蒿素生物合成途径中4个基因启动子中的顺式作用元件结合,但能与AaERF1启动子结合;过表达AaPIF3的青蒿中AaERF1的表达量为野生型对照的3.34~6.30倍;双荧光素酶实验表明,AaPIF3能显著提高AaERF1启动子活性,为对照的1.67倍.得出AaPIF3对青蒿素生物合成的调控是属于间接调控,其具体调控机制为AaPIF3通过直接转录激活AaERF1而参与青蒿素生物合成的调控.
- 扎西次仁张巧卓杨春贤兰小中廖志华
- 关键词：黄花蒿酵母单杂交转录调控
- 南方红豆杉DXS基因的克隆与功能分析被引量：8
- 2018年
- 目的从南方红豆杉Taxus chinensis获得紫杉醇生物合成途径关键酶1-脱氧-D-木糖醇-5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase,DXS)基因(TcDXS)并进行生物信息学和表达模式分析以及亚细胞定位和功能鉴定。方法采用RACE技术获得TcDXS全长;利用qRT-PCR分析TcDXS在南方红豆杉不同部位的表达情况;采用亚细胞定位分析TcDXS在细胞中的位置;用颜色功能互补实验检测TcDXS功能。结果获得的TcDXS由3 031个核苷酸组成,包含了2 229 bp编码区,编码742个氨基酸,其蛋白相对分子质量为79 400,等电点(p I)为7.99;qRT-PCR检测表明TcDXS在南方红豆杉的嫩叶柄中表达量最高,其次是叶和皮,根和茎中的表达量较低;亚细胞定位结果表明,TcDXS定位在叶绿体中;功能互补实验结果表明,在共同转化p AC-BETA和pTrc-TcDXS的大肠杆菌菌落呈现出橘黄色。结论 TcDXS的克隆和功能分析为深入研究紫杉醇生物合成途径和实现其代谢工程奠定了基础。
- 王辉王辉李忠玥邱飞兰小中邱飞兰小中
- 关键词：南方红豆杉紫杉醇亚细胞定位
- 水分胁迫对中华芦荟部分药用成分含量的影响被引量：14
- 2007年
- 研究了水分胁迫处理对药用植物中华芦荟的甙、多糖、总糖、可溶性糖、蛋白质及脯氨酸含量以及生物量的影响.结果表明:甙含量与土壤含水量呈极显著的负相关,水分胁迫增加了单位干质量叶片中的甙含量;叶片中的主要药用成分之一多糖含量明显下降,总糖的含量也不断减少;而可溶性糖和脯氨酸含量明显上升,与土壤含水量呈显著负相关;受到水分胁迫的中华芦荟与对照比较,整株、地上部分和根的鲜重均下降,并且胁迫强度愈大降低愈多.说明随着水分胁迫不断增加,中华芦荟次生代谢活跃,光合作用减弱,同化能力下降,从而增加了甙的含量,积累的碳水化合物总量不断减少,而在一定程度的水分胁迫处理中,可溶性糖和脯氨酸含量的增加与其增强植物抗性的生理功能密切相关.随着干旱失水,芦荟多糖含量及生物量的减少降低了芦荟的经济价值.
- 兰小中杨春贤陈敏谈锋廖志华
- 关键词：中华芦荟水分胁迫药用成分
- 不同叶菜型甘薯品种茎尖绿原酸含量及清除DPPH·能力被引量：23
- 2010年
- 【目的】研究叶菜型甘薯茎尖绿原酸的含量及其清除DPPH·能力,为叶菜型甘薯的品种筛选、栽培及产业化提供理论依据。【方法】在6个不同生长期分别采收广菜薯2号、莆薯53和福薯7-6的茎尖,测定并分析茎尖叶片、叶柄和茎绿原酸含量及其与DPPH·清除能力之间的相关性。【结果】(1)6次采收期的不同甘薯品种茎尖绿原酸平均含量大小为:广菜薯2号(0.2920%fb)>莆薯53(0.2750%fb)>福薯7-6(0.1638%fb),其中叶片(0.3539%fb)>茎(0.1444%fb)>叶柄(0.1173%fb),叶片含量是叶柄和茎平均值的2.70倍;广菜薯2号、莆薯53和福薯7-6茎尖前3个采收时期绿原酸的平均含量分别是后3个时期的2.22、2.68和2.41倍,其中叶片、叶柄和茎前3次采收期绿原酸含量的平均值分别是后3次采收期的2.49,2.53和2.20倍。差异均达到显著水平。(2)根据3个品种6次采收期的平均值计算,叶片对茎尖绿原酸含量的贡献率为73.64%,叶柄为11.96%,茎为14.41%。(3)茎尖6次采收期的DPPH·清除能力平均大小为:广菜薯2号(34.99%)>莆薯53(31.05%)>福薯7-6(18.83%),其中叶片(32.52%)>茎(23.64%)>叶柄(17.91%);前3个采收时期的茎尖、叶片、茎和叶柄的DPPH·平均清除能力分别是后3个时期的1.91、2.02、1.69和1.99倍。【结论】叶菜型甘薯茎尖绿原酸含量在品种、部位和采收期间有显著差异;DPPH·清除能力与绿原酸含量具有显著或极显著正相关。因此,在叶菜型甘薯品种选育、栽培和产业化过程中要充分考虑茎尖绿原酸含量的变化特点。
- 傅玉凡杨春贤赵亚特赵文婷刘小强曾令江廖志华张启堂
- 关键词：叶菜型甘薯绿原酸含量采收期
- 莨菪醛还原酶及其应用
- 本发明公开了莨菪醛还原酶(hyoscyamine aldehyde reductase synthase，HAR)及其应用，具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸残基序列，如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；经原...
- 廖志华陈敏杨春贤邱飞曾俊岚
- 文献传递
- 不同甘薯品种苗期茎尖醇溶提取物清除DPPH·的行为特征差异被引量：18
- 2013年
- 【目的】通过对65个甘薯品种苗期茎尖醇溶提取物清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH.)反应过程中相关指标的研究,探索其清除DPPH.的行为特征差异。【方法】测定65个品种苗期茎尖醇溶提取物在0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、2.0 mg.mL-16个浓度下清除DPPH.反应的0—210 min中19个时间点的DPPH.清除率,计算反应速率及其变化、各品种的EC50和各浓度下清除率达到50%与80%所需时间,并根据这些指标对65个品种进行聚类分析。【结果】甘薯苗期茎尖醇溶提取物的清除DPPH.行为在65个品种间虽然表现为连续性,但聚类分析能将其分为5种行为类型,并以类型Ⅱ、Ⅲ为主。类型Ⅰ包含1个品种,0—1 min和1—3 min的反应速率、210 min的清除率均显著小于其它类型,醇溶提取物浓度达2.0 mg.mL-1时清除率仍不能达到50%。类型Ⅱ包含44个品种,平均抗氧化能力显著优于类型Ⅰ,次于其它3种类型。醇溶提取物浓度达到0.8 mg.mL-1时有24个品种能达到50%清除能力,平均需时83.89 min,但无品种能达到80%;而2.0 mg.mL-1时有37个品种能达到80%清除率,平均需时59.23 min。④类型Ⅲ包含17个品种,其清除率曲线变化趋势、210 min的清除率、EC50、反应速率以及清除率达到50%和80%的品种比例及所需时间均介于类型Ⅱ与类型Ⅳ之间,并偏向类型Ⅳ。⑤类型Ⅳ包括一个品种,类型Ⅴ包括2个品种。两者的EC50低于前3种类型,均在0.4 mg.mL-1时就能达到50%,在0.8 mg.mL-1就能达到80%,且所需时间显著低于其它类型。而两者主要区别体现在反应速率的变化方面。【结论】在利用DPPH.清除法评定甘薯苗期茎尖醇溶提取物抗氧化能力过程中需要综合考虑清除率随反应时间、醇溶提取物浓度的变化趋势、阶段反应速率、反应消耗时间、EC50多项抗氧化反应行为特征指标。
- 谢小焕赵樱罗薇许森曾令江杨春贤傅玉凡
- 关键词：甘薯茎尖DPPH清除率反应速率
- 青蒿JAZ基因克隆及其功能分析被引量：4
- 2018年
- 茉莉酸(jasmonic acid,JA)能诱导青蒿素生物合成,为进一步解析青蒿JA信号通路,本研究从青蒿中克隆并鉴定2个JA信号通路中的负调控因子JAZ(jasmonate ZIM-domain)基因,分别命名为AaJAZ5和AaJAZ6。这两者均含有JAZ家族特有的保守区域ZIM和Jas。AaJAZ5在叶中表达量最高,其他部位的表达量较低;AaJAZ6在根中的表达量最高,茎中的表达量最低。茉莉酸甲酯(Me JA)和机械伤害处理都能显著提高AaJAZ5和AaJAZ6的表达。通过双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,Bi FC)证明,AaJAZ5和AaJAZ6均能与Aa MYC2相互作用,而只有AaJAZ5与Aa COI1存在相互作用,表明AaJAZ5在JA信号通路中可能具有更加重要的作用。本研究为进一步分析青蒿JAZ家族成员的功能分化和JA信号调控青蒿素生物合成的分子机制奠定了基础。
- 夏菁夏菁曾俊岚王焕燕廖志华杨春贤
- 关键词：青蒿素JAZCOI1
- 甘薯八氢番茄红素合成酶基因的克隆与功能验证被引量：7
- 2017年
- 八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,psy)是植物体内类胡萝卜素合成途径中的第一个关键酶。本研究从甘薯高类胡萝卜素新品系渝薯11-10-97中克隆了PSY基因,命名为IbPSY。序列分析显示该基因编码区为1 320 bp,编码的蛋白质含有439个氨基酸,分子量为49.110 k Da,等电点(p I)为9.14。进化分析表明IbPSY与栀子的PSY亲缘关系最近。亚细胞定位结果显示,IbPSY定位于植物细胞的叶绿体。在大肠杆菌PSY基因缺陷型菌株中表达IbPSY,能够使缺陷型菌株合成类胡萝卜素;在拟南芥中超表达IbPSY后,拟南芥叶片中类胡萝卜的含量明显提高;表明获得的IbPSY具有八氢番茄红素合成酶基因的功能。
- 程洁赵腾飞廖志华杨春贤
- 关键词：甘薯八氢番茄红素合成酶基因克隆
- 甘薯苗期茎尖多酚含量对其DPPH·清除反应的影响被引量：5
- 2015年
- 研究了25个甘薯品种苗期茎尖乙醇提取物多酚含量(PC)及其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·,1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)清除反应的清除量(QS)和反应速率(RS)的影响,以期为甘薯茎尖抗氧化活性DPPH·评定法提供科学依据.结果表明,在特定的DPPH·清除反应体系中,PC在0.83~41.01μg/mL线性范围内,PC与QS极显著正相关,与0~1min RS极显著正相关;反应80min以后的QS与RS达到稳定平衡阶段.因此,DPPH·清除反应制约于多酚和DPPH·两种底物浓度,并受反应时间影响.当PC增加到一定程度和经过一定的反应时间,PC与其QS,RS存在非线性相关.利用DPPH·清除法评价甘薯茎尖抗氧化活性时,由于品种间PC存在显著差异,因此应研究特定反应体系下茎尖PC及其与QS,RS的线性相关区域,确定适宜的茎尖质量浓度范围和反应时间.
- 赵樱谢小焕傅玉凡胡春霞杨春贤曾令江顾东东
- 关键词：甘薯茎尖多酚含量
- 甘薯肉桂酸-4-羟化酶蛋白编码序列及其应用
- 本发明提供了一种在甘薯中表达的新的编码肉桂酸-4-羟化酶(Cinnamicacid-4-hydroxylase，C4H)蛋白的编码序列及其在提高植物花色苷及其前体化合物含量的应用。本发明涉及包含所说基因的克隆、融合基因构...
- 杨春贤廖志华陈敏张启堂傅玉凡张华林许宏宣
