杨少兵 作品数:9 被引量:16 H指数:2 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 湖北省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
右美托咪定对高迁移率族蛋白1诱导人脐静脉内皮细胞炎性反应的影响 被引量:1 2022年 目的研究右美托咪定对脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌高迁移率族蛋白1(HMGB1)的影响,及其调控HMGB1诱导HUVECs炎性反应的分子机制。方法 100 ng/mL的LPS刺激HUVECs 16 h后,用不同浓度的右美托咪定(0.01、0.1、1、10 nmol/L)分别处理细胞4 h,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中HMGB1的含量。MTT检测不同浓度右美托咪定对HUVECs细胞活力的影响,细胞免疫荧光检测HMGB1的表达及分布。将HUVECs随机分为对照组、右美托咪定组、HMGB1组、右美托咪定+HMGB1组,右美托咪定和HMGB1的浓度分别是1 nmol/L、1μg/mL。ELISA检测细胞上清液中TNF-α和IL-1β含量,Western blotting检测MAPK信号通路的磷酸化水平,再采用ERK1/2、p38 MAPK通路抑制剂进行阻断实验。结果不同浓度的右美托咪定对HUVECs活力无影响。LPS作用后,HUVECs上清液中HMGB1的含量增加(P<0.01),而右美托咪定可呈剂量依赖性地抑制HMGB1的表达(P<0.05);LPS刺激HMGB1蛋白从细胞核转移至胞质,而右美托咪定可显著抑制LPS引起的HMGB1移位(P<0.05)。相对于对照组,HMGB1组上清液中炎症因子TNF-α和IL-1β含量增加(均P<0.01),外源性HMGB1促进ERK1/2、p38 MAPK和JNK磷酸化(均P<0.05),而右美托咪定+HMGB1组可抑制上述炎症因子的分泌并部分逆转ERK1/2、p38 MAPK的磷酸化(均P<0.05)。p38 MAPK抑制剂(SB203580)可下调HMGB1组IL-1β的表达,ERK1/2阻滞剂(PD98059)可下调TNF-α和IL-1β的表达,且与右美托咪定具有协同抑制TNF-α和IL-1β表达的作用(均P<0.05)。结论右美托咪定可抑制LPS引起的HMGB1分泌,并通过抑制HMGB1相关的MAPK信号通路发挥抗炎效应。 张志发 朱梦娇 杨少兵 陶怡芝 王学仁关键词:脂多糖 人脐静脉内皮细胞 高迁移率族蛋白1 miR-29和ZO-1在大鼠血神经屏障中的作用研究 被引量:2 2019年 目的:观察重组组织型纤溶酶原激活剂(rt PA)通过miR-29对大鼠外周神经闭锁小带蛋白-1(ZO-1表达水平的影响。方法:健康雌性SD大鼠随机分为对照组(Control)、rt PA组(rt PA)和无催化活性rt PAi组(rt PAi)。3组大鼠分别在坐骨神经旁注射生理盐水、rt PA和rt PAi,2 h后利用real time RT-PCR、Western Blot及免疫荧光方法检测坐骨神经内ZO-1的mRNA和蛋白表达水平变化,并采用real time RT-PCR方法检测坐骨神经miR-29的表达水平。结果:与对照组相比,rt PA组大鼠坐骨神经周围注射rt PA后,ZO-1的mRNA表达下降(P <0. 05),Western Blot发现ZO-1蛋白表达水平下降(P <0. 05),免疫荧光检测同样发现ZO-1表达减少;无催化活性的rt PAi处理大鼠坐骨神经后,神经束膜内ZO-1的mRNA及蛋白水平同样明显下降(P <0. 05);与对照组相比,rt PA和rt PAi处理2 h后大鼠坐骨神经内miR-29表达均明显增高(P <0. 05)。结论:rt PA通过减少神经束膜中ZO-1表达水平,增加神经束膜通透性,其作用不依赖于其对凝血酶原复合物的催化功能,可能通过增加miR-29表达下调ZO-1蛋白表达水平。 杨少兵 胡柳 迟晓慧 廖明锋 陈堃 张志发关键词:重组组织型纤溶酶原激活剂 MIR-29 血神经屏障和Claudin-1蛋白在大鼠慢性神经病理性疼痛中的作用 被引量:3 2021年 目的:观察慢性神经病理性疼痛大鼠坐骨神经的血神经屏障(BNB)变化,并探讨紧密连接蛋白Claudin-1在其中的作用。方法:健康雌性SD大鼠分为3组:对照组(Control组)、假手术组(Sham组)和慢性坐骨神经压迫损伤组(CCI组)。对照组不做处理;Sham组仅分离暴露大鼠右侧坐骨神经,不结扎;CCI组暴露大鼠右侧坐骨神经并用丝线结扎。术后1 d,采用伊文斯蓝蛋白染剂(EBA)观察大鼠坐骨神经BNB通透性的变化;免疫荧光染色法观察坐骨神经内的Claudin-1蛋白分布。术前及术后6 h、1 d、7 d和14 d测定各组大鼠后肢机械痛阈值,RT-PCR法测定Claudin-1 m RNA转录水平,Western blot法测定Claudin-1蛋白表达水平。结果:与其他2组相比,CCI组大鼠术后1 d右侧后肢机械痛阈值降低,术后7 d降至最低,并且一直持续到术后14 d(均P<0.05);术后1 d,CCI组EBA含量显著增高(P<0.05);术后6 h、1 d、7 d和14 d CCI组大鼠坐骨神经内Claudin-1 mRNA转录水平和Claudin-1蛋白表达水平均显著低于其他2组(均P<0.05);坐骨神经免疫荧光染色显示,Claudin-1蛋白主要分布于神经内膜和神经束膜,术后1 d,CCI组坐骨神经束膜中Claudin-1蛋白荧光强度明显低于其他2组(均P<0.05)。结论:慢性神经病理性疼痛大鼠坐骨神经BNB被破坏,通透性增加,神经内紧密连接蛋白Claudin-1蛋白表达水平减少。 杨少兵 胡柳 迟晓慧 张志发关键词:神经病理性疼痛 CLAUDIN-1 吗啡对人肝癌细胞Huh7诱导HUVECs血管生成能力的影响及其分子机制 2020年 目的观察吗啡对人肝癌细胞Huh7诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法取对数生长期Huh7细胞,加入不同浓度吗啡(0、0.01、0.1、1、10、100、1000μmol/L)作用不同时间(0、6、12、24 h),根据细胞增殖率及细胞毒性检测结果选择1μmol/L吗啡作用24 h为最佳条件。将Huh7细胞分为观察组和对照组,观察组加入1μmol/L吗啡作用24 h,对照组不予特殊处理。收集两组上清液,与ECM基础培养液混合后孵育HUVECs,采用管腔形成实验观察其血管生成能力(以管腔形成数量表示);采用Western blotting法检测细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,ELISA法检测上清液中血管内皮生长因子(VEGF)表达。将Huh7细胞分为si-HIF-1α组、si-NC组和空白对照组,si-HIF-1α组、si-NC组分别采用脂质体Lipofectamin TM 2000法转染siHIF-1α及其阴性对照,空白对照组不予特殊处理,各组均加入1μmol/L吗啡作用24 h,比较各组血管生成能力及HIF-1α、VEGF表达。结果与对照组比较,观察组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达均升高(P均<0.05)。与si-NC组、空白对照组比较,si-HIF-1α组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达均降低(P均<0.05)。si-NC组与空白对照组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论吗啡可促进Huh7细胞诱导HUVECs血管生成,其机制可能与激活HIF-1α表达、促进VEGF分泌有关。 张志发 朱梦娇 周志强 杨少兵关键词:吗啡 缺氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子 地氟烷对“非体外循环下”冠状动脉搭桥术患者心肾功能的影响 被引量:9 2019年 目的 观察地氟烷对“非体外循环下”冠状动脉搭桥术(OPCABG)患者的心、肾功能的影响。方法选取即将择期接受OPCABG术的患者79例,随机分为丙泊酚组( n =36)和地氟烷组( n =43)。所有患者术前1 h均肌注苯巴比妥0.1 g和吗啡5 mg;麻醉诱导:应用舒芬太尼1 μg/kg、依托咪酯0.3 mg/kg、罗库溴铵0.9 mg/kg;丙泊酚组麻醉维持:丙泊酚靶控输注(TCI)3.5~4.0 μg/min,舒芬太尼TCI 2~3 ng/mL,罗库溴铵0.04 mg/(kg·h);地氟烷组麻醉维持:地氟烷最低肺泡有效浓度(MAC)7%~8%,舒芬太尼TCI 2~3 ng/mL,罗库溴铵0.04 mg/(kg·h)。检测患者围术期血肌红蛋白(Mb)、高敏心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶MB型同工酶(CK-MB)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、血肌酐(Cr)水平及尿量变化,记录麻醉及手术时长、血管移植时长、术后机械通气时间、术后ICU留观时间及总住院时间,并观察心脏节段性室壁运动异常的发生率、心电图动态监测指标、血流动力学指标及术后并发症。结果地氟烷组患者术后24 h NT-proBNP水平明显低于丙泊酚组( P =0.033);地氟烷组术后3 d血Cr水平明显低于丙泊酚组( P <0.05);丙泊酚组术后3 d尿量明显低于地氟烷组( P <0.05);地氟烷组术后总住院天数明显少于丙泊酚组( P =0.035)。两组患者术后24 h肌红蛋白、cTnI、CK-MB水平、术后机械通气时间及ICU留观时间等差异均无统计学意义(均 P >0.05)。结论地氟烷吸入麻醉可改善患者OPCABG术后心功能及肾功能指标,减少术后住院天数,适用于心脏病手术麻醉。 毕江江 樊龙昌 姚文龙 祝畅 杨少兵 方刚 杜翔曦 桂伶俐 杨春 罗爱林关键词:地氟烷 心功能 肾功能 NR2B重组腺病毒疫苗 本发明涉及一种NR2B重组腺病毒疫苗,该疫苗是通过将NR2B基因插入腺病毒载体构建的,其保藏号为:CCTCC NO:V200713。本发明采用重组腺病毒制备技术,将NR2B基因插入腺病毒重组载体,成功构建NR2B重组腺病... 田玉科 王公明 杨辉 田学愎 高峰 杨少兵文献传递 血管活性药物及中药麝香对内毒素性休克的影响及其在抗休克治疗中的作用 被引量:1 2004年 目的 :观察缩、扩血管西药及中药麝香对低排高阻型内毒素性休克的影响 ,评价其在抗休克治疗中的疗效。方法 :大鼠随机分为对照组 (A组 )、山莨菪碱组 (B组 )、去甲肾上腺素组 (C组 )、麝香组 (D组 )。颈外静脉推注脂多糖 (LPS)复制内毒素休克模型 ,实验组分别给予山莨菪碱、去甲肾上腺素、麝香药物后观察肠系膜微循环、血压变化。结果 :推注LPS后对照组及实验组动物均发生内毒素性休克 ,出现微循环障碍。山莨菪碱能提高休克后血流速度 ,但A、C、D组微循环未出现明显改善。结论 :山莨菪碱可改善内毒素性休克的微循环瘀滞状态 ,而去甲肾上腺素 ,麝香没有明显作用。 姚兰 谢甜 董俊莉 李璐 余芬 杨少兵 刘柳 杨莹关键词:血管活性药物 中药 麝香 内毒素性休克 抗休克治疗 rAd5/NR2B镇痛疫苗对神经病理性痛大鼠学习记忆功能的影响 N-甲基-D天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体2B亚基(NR2B)在慢性神经病理性痛的产生和维持中起着重要作用。本研究室构建的NR2B基因重组腺病毒(Recombinant adenovi... 杨少兵 王公明 杨辉 高峰 田学愎 刘希江 罗婷 田玉科关键词:腺病毒 神经痛 文献传递 NR2B重组腺病毒疫苗 本发明涉及一种NR2B重组腺病毒疫苗,该疫苗是通过将NR2B基因插入腺病毒载体构建的,其保藏号为:CCTCC NO:V200713。本发明采用重组腺病毒制备技术,将NR2B基因插入腺病毒重组载体,成功构建NR2B重组腺病... 田玉科 王公明 杨辉 田学愎 高峰 杨少兵文献传递