李轶杰
- 作品数：9 被引量：12H指数：3
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- 压力调控BMSCs/PRF双膜复合体修复髁突软骨缺损的实验研究
- 2013年
- 目的构建骨髓间充质干细胞(BMSCs)/富血小板纤维蛋白(PRF)双膜结构的基质复合体以构建优化的关节软骨再生微环境。筛选对BMSCs/PRF双膜结构适宜的压力刺激条件,并将压力微环境预调的BMSCs/PRF双膜结构用于动物髁突软骨缺损区移植,为关节软骨再生的生物力学调控提供直接实验依据。方法密度梯度离心法培养兔BMSCs并诱导成膜。取兔耳廓中动脉动脉血提取PRF,并与细胞膜片复合。采用液压加载系统对BMSCs/PRF双膜结构分别给予90 KPa、120 KPa、150 KPa静压每天加载1 h或6 h,实验2、4、6 d时取材。实时定量PCR检测BMSCs成软骨相关基因Sox-9,
- 张旻赵寅华陈慧李轶杰黄锦梅
- 关键词：复合体密度梯度离心成软骨双膜
- 骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白异位成软骨的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)复合兔骨髓间充质干细胞膜片在软骨微环境下异位成软骨的可行性。方法:取3～4月龄雄性新西兰兔骨髓,体外分离、培养骨髓间充质干细胞;经来源鉴定后,取第3代细胞诱导培养形成细胞膜片;抽取同一只兔动脉血制备PRF后与自体骨髓间充质干细胞膜片复合。取4周龄BALB/C裸鼠30只,随机分组;实验组(n=15)于背部两侧植入骨髓间充质干细胞膜片复合富血小板纤维蛋白与兔耳软骨碎块的双膜结构复合物;对照组(n=15)背部两侧仅植入骨髓间充质干细胞膜片与兔耳软骨碎块的单膜结构复合物。分别于植入后2、4、8周取材,HE、甲苯胺蓝染色,用IPP 6.0软件对图片进行着色强度分析。所得结果用SPSS 13.0软件进行统计处理。结果:HE染色显示,实验组2、4、8周均可见软骨细胞生成,对照组仅8周时有少量软骨细胞生成。IPP分析显示,实验组2、4、8周甲苯胺蓝着色强度呈逐渐增加趋势,各时间点间OD值相比差异均有统计学意义(P<0.05);而且实验组各时间点OD值均显著高于同时间点的对照组(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞与PRF复合的双膜结构在软骨微环境中具成软骨能力。
- 李轶杰陈慧刘鹏张旻陈永进
- 关键词：骨髓间充质干细胞富血小板纤维蛋白软骨分化裸鼠
- 压力对骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片复合富血小板纤维蛋白(PRF)双膜结构中BMSCs成软骨能力的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:观察压力对骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复合富血小板纤维蛋白(Platelet-rich Fibrin,PRF)(BMSCs/PRF)双膜结构中BMSCs的成软骨能力。方法:密度梯度离心法分离培养兔骨髓间充质干细胞,经表面标记分子检测及成骨、成脂能力鉴定后,制备细胞膜片。将取自同一个体的兔耳廓动脉全血通过离心获得PRF,将PRF压制成膜后与BMSCs细胞膜片复合并进行混合培养。培养2 d后按不同力值将复合膜随机分为0 kPa(对照)、90、120、150 kPa 4大组;每一大组再分为刺激1 h/d、6 h/d两组,然后置于加载装置中按分组分别施以不同静态压力。分别于加载第2、4、6天终止培养、取材;Real-time PCR法检测PCNA、SOX-9、Aggrecan、COL-ⅡmRNA表达水平。结果:实验所设定的各组压力刺激条件均可对双膜结构中的BMSCs产生显著的促增殖效应,其中以120 kPa/1 h持续4 d的压力条件下PCNA基因表达水平最高。2 d压力刺激明显上调Aggrecan水平,而对SOX-9与COL-Ⅱ的表达无显著作用;4 d压力刺激可同时促进Aggrecan、SOX-9及COL-Ⅱ mRNA的表达,其中以120 kPa/1 h/4 d的压力条件下的成软骨基因表达水平最高;6 d压力刺激下仅在90、120 kPa加压1 h时表现出对COL-Ⅱ mRNA的促进作用。结论:适当的压力刺激可明显促进BMSCs/PRF双膜结构中BMSCs的增殖与软骨向分化能力。
- 陈慧李轶杰程百祥杜静张旻陈永进
- 关键词：骨髓间充质干细胞富血小板纤维蛋白软骨形成
- 压力对BMSCs/PRF双膜结构成软骨能力影响的研究
- <正>骨髓间充质干细胞(BMSCs)因其良好的多向分化潜能已被广泛应用于骨软骨再生研究,但其所生成软骨质与量的提高一直是组织工程领域不断探索的课题。干细胞膜片技术为体外培养干细胞提供复层生长、基质支持的仿生微环境;富血小...
- 陈慧李轶杰杜静程百祥张旻陈永进
- 文献传递
- 压力对两种成体干细胞与PRF复合后成软骨能力影响的比较研究
- <正>骨髓间充质干细胞(BMSCs)和脂肪干细胞(ADSCs)两种成体干细胞因均具有成骨、成软骨等多向分化潜能且来源广泛、体外扩增能力强等特点而被广泛应用于骨软骨组织工程研究,但两种干细胞之间在相同的培养环境下成软骨能力...
- 李轶杰陈慧杜静程百祥张旻陈永进
- 文献传递
- 压力调控BMSCs/PRF双膜复合体修复髁突软骨缺损的实验研究
- ＜正＞目的构建骨髓间充质干细胞（BMSCs）/富血小板纤维蛋白（PRF）双膜结构的基质复合体以构建优化的关节软骨再生微环境。筛选对BMSCs/PRF双膜结构适宜的压力刺激条件,并将压力微环境预调的BMSCs/PRF双膜结...
- 张旻赵寅华陈慧李轶杰黄锦梅
- 文献传递
- NF-κB在压力调控BMSCs/PRF修复兔髁突软骨缺损中的作用研究被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨NF-κB信号通路在压力调控BMSCs/PRF双膜结构修复兔髁突软骨缺损中的作用。方法：取3~4月龄雄性新西兰兔30只,分离、培养骨髓间充质干细胞并制备成细胞膜片,抽取自体兔动脉血制备PRF,将二者复合制备BMSCs/PRF双膜结构。在所有实验动物双侧髁突作直径3 mm的缺损,制备髁突软骨缺损模型;将实验动物随机分为5组（n=6）,A组：即空白对照组,缺损处不充填;B组：双膜结构充填缺损;C组：压力预调双膜结构后充填缺损;D组：NF-κB抑制剂（PDTC）预处理双膜结构后充填缺损;E组：压力预调加抑制剂预处理双膜结构充填缺损。分别于术后2、4、8周取材,HE染色观察缺损修复情况,Real-time PCR方法检测I-κB、P-65和成软骨相关基因Aggrecan、Sox-9的表达水平,并进行统计分析。结果：C组新生髁突软骨组织中NF-κB各信号分子及成软骨相关基因的表达水平均明显高于相同时间取材的其他各组（P〈0.05）,其缺损修复的效果也最好;D组、E组各时间点的NF-κB信号通路相关信号分子及成软骨相关基因表达水平均明显低于A、B、C组（P〈0.05）。结论：BMSCs/PRF双膜结构能明显促进髁突软骨缺损的修复,以压力预调的双膜结构修复效果尤为显著;NF-κB参与了体内压力促双膜结构合成软骨的过程。
- 石磊李轶杰赵萤赵寅华邹德慧张旻陈永进
- 关键词：软骨缺损NF-ΚB
- NF-κB信号通路在压力调控兔BMSCs/PRF双膜结构成软骨响应中的作用
- 前期创立了一种干细胞膜片片段复合富血小板纤维蛋白膜双膜复合体移植材料的制备方法,将自体BMSCs膜片与自体PRF复合形成BMSCs/PRF双膜复合体用于动物下颌髁突软骨缺损的修复,并发现移植术前120kPa每天60 mi...
- 张旻石磊程百祥李轶杰陈慧
- BMPs信号通路在压力调控兔BMSCs成软骨响应中的作用被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMPs)信号通路在压力刺激兔骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)成软骨响应中的作用。方法:体外分离、培养兔BMSCs,经鉴定后随机分为4组:空白对照组、压力刺激组、BMPs拮抗剂Noggin刺激组、压力+BMPs拮抗剂Noggin刺激组,其中压力刺激组和压力联合Noggin刺激组置于静态液压细胞加载装置中培养,并给予120 kPa、每天1 h、连续4 d的力学刺激。Real-time PCR和Western Blot方法检测压力刺激前后细胞中BMPs信号相关分子BMP2、Smad1、Smad5表达的变化;Western Blot方法检测4个实验组中P-Smad1/Smad5和软骨特异性基因Col-II、Aggrecan的蛋白表达。结果:兔BMSCs传代后细胞生长状态稳定,细胞表面标记物CD29阳性率97.2%、CD44阳性率93.2%、CD45阳性率0.8%;成骨诱导3周后,茜素红染色可见矿化结节形成;成脂诱导2周后,油红O染色可见红色脂滴;压力刺激后BMP2、Smad1、Smad5的基因与蛋白表达均明显增加(P<0.05);Western Blot检测显示,压力加载方式作用于兔BMSCs后,软骨细胞特异性指标Col-Ⅱ、Aggrecan的表达明显上调(P<0.05);BMPs特异性拮抗剂Noggin能明显抑制压力刺激兔BMSCs中P-Smad1/Smad5、Col-Ⅱ、Aggrecan的蛋白表达。结论:BMP/Smad信号通路介导了压力刺激兔BMSCs成软骨响应的过程。
- 杜静程百祥陈慧李轶杰王忠山张旻陈永进
- 关键词：骨髓间充质干细胞软骨形成BMPS
