李仁清
- 作品数：49 被引量：198H指数：8
- 供职机构：北京市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市优秀人才培养资助北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 2022年北京市通州区一起霍乱疫情分离菌株的病原学特征分析被引量：3
- 2023年
- 目的分析2022年北京市通州区一起霍乱弧菌引起的疫情的病原学特征,并与引起通州区过往疫情的菌株进行比对分析。方法用实时荧光PCR方法检测样本中O1/O139群霍乱弧菌的特异性基因,同时按常规法对样本进行菌株的分离培养鉴定;用普通PCR方法检测霍乱弧菌的11种毒力基因;用微量肉汤稀释法进行12种药物的敏感性试验,采用NotⅠ限制性内切酶进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和聚类分析,基于全基因组序列进行菌株遗传学分析。结果本次疫情共检出5株O1群小川型非产毒霍乱弧菌,所有菌株均携带ompU、toxR、tcpI、tcpA^(EL)、hlyA^(EL)、hlyA^(CL)和rtxC基因,不携带ctxAB基因,5株菌耐药情况一致,均为美罗培南–头孢噻肟–头孢他啶–链霉素–氨苄西林–氨苄西林/舒巴坦6种药物耐药,为多重耐药菌株。PFGE分6种带型Ⅰ~Ⅵ,本次疫情菌株带型为Ⅱ型。与通州区既往检出的菌株相比,与2011年2株产毒O1群小川型霍乱弧菌带型较为接近,耐药情况一致,毒力基因携带情况有所差异,但都携带tcpA^(EL)基因。遗传学分析显示本次疫情菌株为不同于第七次世界大流行菌株的新出现的克隆群。结论通州区流行的O1群霍乱菌株以多重耐药小川型非产毒株为主,PFGE带型分散,本次疫情菌株是新出现的克隆群,以后的霍乱防控工作中应重视此类菌株并制定相应的策略。
- 张萍邹林高翔杨郝亮甄博珺李伟红郭晓晨林长缨李仁清严寒秋逄波
- 关键词：O1群霍乱弧菌毒力基因脉冲场凝胶电泳遗传学分析
- 人免疫缺陷病毒早期蛋白Nef的表达、纯化及免疫原性研究
- 2008年
- 目的:通过原核细胞表达人免疫缺陷病毒(HIV)Nef抗原,制备特异抗血清,为Nef抗原检测提供技术方法。方法:以HIV Botswana毒株基因组为模板,用PCR法获得Nef蛋白编码基因,将其克隆到pET30a载体中,在大肠杆菌中表达Nef融合蛋白;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得抗血清,用真核表达的Nef抗原对其特异性进行分析。结果:构建的Nef融合基因在大肠杆菌中获得表达,相对分子质量约为36×103,免疫BALB/c小鼠获得针对融合蛋白的高效价抗血清,ELISA抗体滴度为1∶6400;免疫荧光和Western blot检测表明,该抗血清能特异地与重组痘苗病毒表达的Nef抗原反应。结论:在大肠杆菌中表达了HIV Nef融合蛋白,制备了Nef融合蛋白的高效价小鼠免疫血清,该血清能特异性识别HIV Nef抗原,为HIV Nef抗原检测提供了技术方法。
- 陆柔剑齐建国邓瑶王世峰王文玲辛伟李仁清阮力
- 关键词：人免疫缺陷病毒原核表达抗血清
- 幼年接种天花疫苗对成年猴痘病例临床特征的影响分析
- 2024年
- 目的通过对比分析幼年是否接种天花疫苗的猴痘病例的临床特征、流行病学特征及实验室检测结果,探索猴痘确诊病例中幼年是否接种天花疫苗是否会对发病、临床特征及实验室检测产生影响.方法将北京市2023年5月至2023年8月猴痘确诊病例中接种过天花疫苗的病例纳入接种疫苗组,未接种天花或猴痘疫苗的人群纳入未接种疫苗组.通过流调、电子病历查询和电话随访的方式收集数据,对比分析两组人群的人口学资料、发病就诊情况、临床特征、流行病学信息和实验室检测结果.结果本研究共纳入90例,其中接种疫苗组(接种组)10例,未接种疫苗组(未接种组)80例,均为男性.接种组病例平均年龄(47.50±5.06)岁,未接种组病例平均年龄(31.68±5.34)岁;接种组中有9名为男男性行为(MSM)人群,6名HIV感染者;未接种组有78例MSM人群,43名HIV感染者.是否就诊、是否发病、发病与诊断时间差和21 d是否有性行为等指标中,接种组和未接种组差异均无统计学意义(P>0.05);发热、皮疹、皮疹发生部位、淋巴结肿大等临床特征在接种组和未接种组差异均无统计学意义(P>0.05);实验室指标中,咽拭子是否阳性在接种组和未接种组的差异有统计学意义(P<0.05);皮疹涂抹/痂皮是否阳性及Ct值分布在接种组和未接种组差异均无统计学意义(P>0.05).结论幼年接种天花疫苗,仍可以罹患猴痘.在猴痘确诊病例中接种天花疫苗的人群与未接种天花的人群相比,临床特征和流行病学特征无显著差异.但在后续猴痘疫苗的研发和接种过程中也不可忽视曾接种过天花疫苗的人群.
- 李丹任振勇窦相峰孙玉兰金昊源李仁清李夫张代涛
- 关键词：猴痘天花疫苗
- 按痘苗病毒优势密码子改造HIV-1 gag基因提高表达水平的研究被引量：10
- 2005年
- 为确定痘苗病毒密码子偏向性与基因表达的关系及其在痘苗病毒与宿主细胞相互作用过程中的作用,按痘苗病毒的优势密码子对HIV-1gag基因进行改造,并对合成基因与野生型HIV-1gag基因在痘苗病毒载体系统的表达水平进行了研究。结果显示:①各目的基因分别正向插入了痘苗病毒TK区7.5k启动子下游;②免疫荧光检测显示,改造前后的gag基因均能够很好地在痘苗病毒中表达;③Westernblot检测显示,在相同感染量时,改造后的gag基因具有更高的表达水平;④流式细胞术检测显示,密码子改造后的gag基因较野生型gag基因表达水平提高约17%。上述结果表明:按照痘苗病毒优势密码子进行外源基因改造,可作为提高外源基因在痘苗病毒中表达的策略,同时提示,密码子偏向性是痘苗病毒与宿主细胞相互作用的重要调控因素。
- 张相民辛伟王世峰李仁清陆柔剑王文玲吕亦晨阮力
- 关键词：痘苗病毒基因表达HIV-1GAG基因
- 2004—2015年北京市急性弛缓性麻痹病例疾病谱变化趋势被引量：8
- 2016年
- 目的分析北京市2004 2015年急性弛缓性麻痹（AFP）病例的疾病谱特征和变化趋势,为进一步指导AFP病例的监测工作提供科学依据。方法利用2004 2015年北京市AFP病例监测资料,将12年平均分为三个时间段,采用描述流行病学方法分析AFP病例疾病谱的分布特征和变化趋势。结果 2004 2015年北京市AFP病例报告发病率在1.26/10万~3.80/10万之间,临床诊断包括45种疾病,顺位前20名的疾病占所有病例数的87.05%;三个时间段期间,疾病谱顺位发生了一定变化,6种疾病一直居顺位前10名,7种疾病顺位上升至前10名,3种疾病顺位下降至10名外。结论可根据AFP病例疾病谱的变化特征,扩充检索疾病名称和关键词的范围,指导AFP病例的报告工作。
- 李娟李晓梅张朱佳子赵丹周涛张合润罗明龚成李仁清李爱华卢莉吴疆庞星火
- 关键词：急性弛缓性麻痹疾病谱
- 2011-2018年北京市鼠情和鼠疫血清学调查被引量：6
- 2019年
- 目的了解北京市2011-2018年啮齿动物的种群构成和种群密度,并探索其间是否存在鼠疫耶尔森氏菌感染。方法 2011-2018年,在门头沟、延庆、怀柔、密云和顺义区设立监测点,采用夹夜法捕捉啮齿动物鉴定种属并测算种群密度。用笼捕法捕捉啮齿动物,对其心脏取血,分离血清进行鼠疫F1抗体检测。结果 2011-2018年,夹夜法共捕获1 454只啮齿动物,可以分为8个种,其中社鼠、大林姬鼠和黑线姬鼠是鼠疫可染疫动物,其构成比居前三位,依次为43.5%、33.6%和11.6%。啮齿动物年平均密度变动于2.52%和6.02%之间(P>0.05),各区平均密度在4.01%和6.22%之间(P>0.05),密度受季节影响较大,一般在秋季较高,10月份密度最高可达17.25%。从827只啮齿动物心脏取血开展鼠疫感染调查,鼠疫F1血清抗体结果均为阴性。结论北京市未发现达乌尔黄鼠等鼠疫储存宿主,也未发现本地啮齿动物中存在鼠疫菌感染,但本地的优势种群社鼠、大林姬鼠和黑线姬鼠等是可染疫动物,可能在鼠疫菌输入后造成短暂传播。
- 窦相峰陈艳伟王小梅李爽吕燕宁田丽丽孙玉兰李仁清王全意陈丽娟
- 关键词：鼠疫啮齿动物宿主
- 肠道病毒共感染简易鉴定方法的建立及评价
- 2021年
- 目的在一代测序的基础上建立一种简易的肠道病病毒共感染鉴定方法。方法制备共感染的模拟样本,对其进行一代测序。使用Perl语言编写脚本对测序图谱进行分析,获得主峰和次峰序列。采用blastn与本地构建的肠道病毒数据库进行局部比对,同时采用stretcher进行全局比对,对主要和次要序列进行肠道病毒分型比较。结果编写了一个能够自动识别并分析一代测序色谱图结果中共感染状态并获得两个肠道病毒核苷酸序列的脚本。对于次要病毒DNA含量大于等于65ng的混合样本,只要次要病毒在混合样本中占比适中(如大于等于12.5%并小于等于25.0%)均能够顺利识别并准确分型。分型时,采用局部比对与采用全局比对的结果相当,但在1:1混合样本的分型时,局部比对的效果更好。结论本研究建立的肠道病毒共感染的简易鉴定方法可用于肠道病毒共感染的病毒识别与分型。
- 孙玉兰沈悦黎新宇杨扬梁志超李仁清
- 关键词：肠道病毒共感染
- 多次核酸检测两例新型冠状病毒肺炎病例的实验室确诊分析
- 2022年
- 目的对两例无明确新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19,以下简称新冠肺炎)流行病学史,经多次核酸检测确诊的新冠肺炎病例实验室确诊过程进行总结分析,为新冠病毒核酸检测提供经验。方法收集北京市2020年1-2月两例无明确新冠肺炎流行病史,且经多次核酸检测确诊的新冠肺炎病例的流行病学、临床表现等资料和实验室检测结果进行回顾性分析。结果病例A,2020年1月19日发热伴全身疼痛、头痛,先后就诊2家医院,发热和肺炎病情未缓解。发病前有京外旅行史,2020年1月22日患者收入A_(2)医院隔离治疗,诊断为“肺炎待查”并上报为新冠肺炎疑似病例。当日采集样本送北京市疾病预防控制中心(CDC)实验室进行荧光RT-PCR检测,N基因阳性。按当时《新型冠状病毒肺炎防控方案(第二版)》规定,实验室要求继续采样。1月23日再次采集样本,荧光RT-PCR检测ORF1ab和N基因阳性,该病例为新冠肺炎确诊病例。病例B,2020年2月3日发热,先后就诊3家医院,发热伴全身疼痛、头晕头痛。患者于2月9日在B_(3)医院发热门诊就诊,并单间隔离治疗,上报为新冠肺炎疑似病例。2月10日和11日分别采集样本送北京市CDC实验室进行荧光PCR检测,ORF1ab和N基因阴性,但2月10日样本的N基因在反应后期显示出荧光值小于判定阈值线的微弱信号。2月12日再次采集样本检测,ORF1ab和N基因阳性,该病例为新冠肺炎确诊病例。结论因新冠肺炎临床表现无特异性,实验室病原学的核酸检测非常重要;如果新冠肺炎疑似病例首次样本检测结果阴性或可疑,建议再次采集多种类样本进行检测,以便尽可能早诊断。
- 卢桂兰严寒秋李仁清孙玉兰吕燕宁张代涛王小梅任烁刘医萌赵佳琛张莉孙瑛马建新荆红波杨鹏陈丽娟王全意
- 关键词：病例报告核酸检测实验室确诊
- 北京市首例发热伴血小板减少综合征本土病例的病原学特征研究
- 2023年
- 目的对北京市首例发热伴血小板减少综合征(SFTS)本土病例进行病原学特征研究。方法对患者样本进行病毒分离、全基因测序,与不同基因型的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)进行同源性比较和遗传进化分析,并且对基因进行重组重配分析和氨基酸突变位点分析。结果从患者血液标本中分离到病毒,将其命名为BJ001-2021。该毒株的L、M片段与河南省的17-China_Henan-72株最为接近,S片段与来自山东省的SD2013-094最为接近,遗传进化分析结果显示BJ001-2021与HB29、SD24等同属于B基因型,无基因重配重组事件,但发现一些氨基酸突变位点。结论北京市首例本土SFTS病例由SFTSV的B基因型引起,未发生基因组的重组重配。
- 孙玉兰王志越宋丽君李仁清李夫任振勇金浩源李丹窦相峰张代涛
- 关键词：发热伴血小板减少综合征B基因型
- 流感病毒RNA聚合酶蛋白PB1在小鼠中可诱导亚型间交叉免疫保护被引量：2
- 2006年
- 目的探索流感病毒RNA聚合酶PB2和PB1亚基作为实验性流感疫苗候选抗原的可能性。方法以复制型质粒(pSCA)为载体分别构建表达甲1型和甲3型流感PB2和PB1的复制型 DNA疫苗,免疫小鼠后分别用甲1型流感病毒(A/PR／8／34)进行鼻腔攻击,观察针对不同亚型流感病毒的复制型DNA疫苗的免疫保护效果。结果本实验所构建的复制型DNA疫苗在真核细胞中均可表达外源基因;本实验采用的复制型质粒载体(pSCA)与传统质粒载体(pcDNA3)在诱导小鼠产生抗体方面无差异,并且都诱导了偏向T_H1类的免疫反应;表达甲1型和甲3型流感PB1基因的复制型DNA 疫苗均可保护小鼠抵御甲1型流感病毒(A/PR／8／34)的攻击。结论表达甲型流感病毒PB1的复制型 DNA疫苗能保护小鼠抵御同型和异型流感病毒的攻击,本实验为流感疫苗研究提供新的候选抗原。
- 李仁清鲁宁邓瑶王文玲辛伟张相民阮力
- 关键词：流感病毒
