方慧 作品数:15 被引量:40 H指数:4 供职机构: 武汉市公安局 更多>> 发文基金: 公安部应用创新计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 生物学 更多>>
用chelex-100提取骨骼DNA的研究 被引量:7 2000年 建立了应用chelex-100加蛋白酶K提取骨骼DNA的方法,并对1~30年31例骨骼进行了实验.该方法操作简单、快速、重复性好,灵敏度以及阳性率高,适用于法医学鉴定. 方慧 胡家伟 朱传红 刘翠兰关键词:骨骼 DNA提取 法医鉴定 联苯胺预试验处理血痕后样本DNA定量的研究 被引量:6 2012年 目的探讨联苯胺血痕预试验处理后样本DNA含量的变化及对STR分型检测的影响。方法选取10名无关个体EDTA抗凝血液制成滤纸血痕,保存干燥时间分0.5h、1h、3h、6h、12h、24h六个实验组,并采用磁珠提取法、QIAcube DNA提取纯化法、chelex-100提取法提取样本DNA,应用RT-PCR定量技术检测样本DNA含量,同时应用PCR-STR技术和Idfiler-plus试剂盒检测相应样本STR分型。结果联苯胺血痕预试验后处理样本,随保存时间的延长,其样本DNA含量显示逐渐降低的趋势。回归线性对数分析显示,磁珠提取法:Y=-0.4087ln(x)+0.7044R2=0.7633;QIAcube DNA提取纯化法:Y=-0.2393ln(x)+0.4764R2=0.8715;chelex-100提取法:Y=-0.1178ln(x)+0.2302R2=0.9571。不同DNA提取方法对同一保存时间的联苯胺血痕预试验试剂处理样本DNA含量间差异有极显著性,P<0.01。结论联苯胺血痕预试验后对后续STR分型影响较大,联苯胺血痕预实验后的血痕不能继续进行STR分型检测。 朱传红 郑道利 倪尧志 王海生 宁平 方慧 刘艳关键词:DNA提取 STR分型 杂合性丢失 现场血痕快速提取检验试剂盒的研制 郑道利 朱传红 倪尧志 王海生 宁平 方慧 方弘 熊义 王朝晖 血迹是刑事案件现场最常见的痕迹和物证之一,它客观的记录了人体的伤亡,反映了案件发生的过程,记录了犯罪行为,也描述了犯罪心理,因此,现场血迹不仅是案件现场重建的关键依据,也是对犯罪嫌疑刻画的重要依据。所以,对刑事案件现场可...关键词: 两个体混合样本比例的PCR-STR检测研究 被引量:8 2006年 目的探讨PCR-STR检测两个体混合样本比例的灵敏度。方法按不同比例将两个体全血、单个核细胞及纯DNA 3种不同的样本进行混合,应用AB I公司生产的profile p lus商品化试剂盒多重PCR扩增后,用AB I3100基因分析仪进行毛细管电泳,检测基因座及其峰面积,并就混合样本中两单个核细胞样本DNA含量百分比与扩增前混合样本比例的关系进行相关分析。结果当样本混合比例为4%+96%时,可明确区分混合样本中两个体的基因型,且扩增前混合细胞百分率与扩增后两者峰面积比值呈直线相关。结论PCR-STR检测两个体混合样本比例的灵敏度有一定范围,并可进行半定量。 方慧 常伟关键词:法医物证学 PCR-STR 灵敏度 毛细管电泳 线粒体DNA的PCR-RFLP分型法医学应用研究 被引量:3 2005年 目的建立PCR RFLP技术检测mtDNA序列多态性的方法,调查武汉汉族人群mtDNAHVⅠ区段限制性片段长度多态性,并对PCR RFLP技术在毛干、指甲等生物检材的个体识别案件中的应用进行评估。方法应用nest PCR技术和RFLP技术建立检测mtDNAHVⅠ区段限制性片段长度多态性的方法,调查150例武汉汉族人群无关个体,同时对实际案件中的毛干、陈旧骨骼、水浸血痕等不同种类、不同保存时间和条件的生物检材进行检测。结果RsaⅠ酶切检出4种表型,频率分别为0.760、0.167、0.066和0.007,遗传差异度(GD值)为0.393,随机匹配概率(P值)为0.607。应用PCR RFLP对毛干、20年陈旧骨骼、水浸血痕进行了检测以及在个体识别及母子关系亲子鉴定案例中应用。结论用PCR RFLP法检测mtDNA序列多态性在法医物证检验中具有应用价值。 方慧 杨庆恩 胡家伟关键词:法医物证学 MTDNA 多态性 PCR-RFLP 骨骼DNA提取方法刍议 被引量:4 2001年 近几年,自从 DNA 检测进入司法实践,逐步形成了稳定的检验方法如血液(痕)、精斑、毛发、组织等的检验,但是骨骼(尤其是陈旧骨骼)DNA 提取一直是实际检案的难点,在炎热潮湿季节的尸体以及开棺验尸等案件中,由于骨组织耐腐败即成为唯一的物证,这对骨骼 DNA 的提取提出了实际要求。多年来许多学者和法医工作者在这方面作过探索和实践,摸索了许多骨骼 DNA 的提取方法,如:Kurosaki 1999年将骨组织放于液氮中冷冻处理后。研成粉末状,经 EDTA 脱钙,TNE。 方慧 胡家伟关键词:法医物证 骨骼 运动器官 骨松质 松质骨 武汉汉族群体3个多拷贝Y-STR基因座的遗传多态性 被引量:7 2007年 目的提供DYS385、DYS459和DYS464基因座的群体遗传学资料。方法用荧光标记引物及ABI 3100型基因分析仪对武汉地区176名汉族男性无关个体的DYS385、DYS459和DYS464 3个多拷贝Y-STR基因座进行分型。结果在DYS385和DYS459基因座的个体,可观察到1~2个不同长度的扩增产物;DYS464基因座个体,可观察到1~4个不同长度的扩增产物。DYS385基因座检出14个等位基因及47种单倍型,DYS459检出4个等位基因及7种单倍型,DYS464检出9个等位基因及51种单倍型,其单倍型多样性分别为0.9591、0.6047和0.9560。3个基因座构成的联合单倍型共有133种,其多样性值达0.9909。结论3个多拷贝Y-STR基因座均为高多态性的遗传标记,联合应用具有较高的个体分辨能力。 黄代新 朱传红 方慧 刘翠兰 杨罕 杨庆恩关键词:法医物证学 Y-STR基因座 遗传多态性 Amelogenin基因座X片断变异1例 被引量:2 2011年 1案例资料
检验样本为本市一起伤害致死案件中的一名男性犯罪嫌疑人滤纸血样。1.1荧光法检测用chelex-100法提取滤纸血样DNA,分别用Identifiler试剂盒、Sinofile试剂盒、DNATyper15试剂盒和Y-filer试剂盒进行PCR扩增,扩增产物在3100遗传分析仪上电泳检测,Gene Mapper3.2软件分析结果。 罗毅 杨罕 刘翠兰 方慧线粒体DNA的PCR-RFLP分型法医学应用研究 <正> 目的建立PCR-RFLP技术检测mtDNA序列多态性的方法,调查武汉汉族人群mtDNA HV-I区段限制性片段长度多态性,并对PCR-RFLP技术在毛干、指甲等生物检材的个体识别案件中的应用进行评估。方法应用ne... 方慧 杨庆恩 胡家伟文献传递 陈旧骨骼中的DNA检验 2000年 金爱菊 方慧关键词:法医学 DNA检验 陈旧骨骼