张国庆
- 作品数：18 被引量：51H指数：5
- 供职机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项卫生行业科研专项中国全球基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 西藏墨脱县疟疾流行区多斑按蚊复合体种型鉴定被引量：12
- 2008年
- 目的鉴定西藏林芝地区墨脱县疟疾流行区多斑按蚊复合体的种型。方法墨脱县捕获的5190只按蚊经形态学鉴定为多斑按蚊复合体后,随机取575只,酚-氯仿法提取单蚊DNA作为模板,根据伪威氏按蚊、多斑按蚊、威氏按蚊、达罗毗按蚊和塞沃按蚊分别设计5对特异性引物,PCR扩增rDNA第二转录间隔区(ITS2)片段,进行种型鉴别。对目标片段进行测序、同源性比对,并运用MEGA(3.1)软件构建多斑按蚊复合体的系统进化树。结果575份DNA样本中有11份扩增出约231bp的条带,即威氏按蚊(1.9%);564份扩增出约119bp的条带,为伪威氏按蚊(98.1%)。PCR种型鉴定结果与同源性比对及系统进化树的结果一致。结论西藏林芝地区墨脱县疟疾流行区多斑按蚊复合体由伪威氏按蚊和威氏按蚊构成,伪威氏按蚊为优势蚊种。
- 武松潘嘉云王学忠周水森张国庆汤林华
- 云南恶性疟原虫对青蒿素的抗性变迁研究及应用
- 杨恒林汤林华刘慧黄芳聂仁华李美张国庆李春富李兴亮
- 主要技术内容：疟原虫抗性是全球公认的疟疾防治3大技术难题之一。了解恶性疟原虫对抗疟药抗性现状，是制定抗疟药物政策，有效防治疟疾，推进抗疟进程的关键。项目组开展多项WHO国际中标项目研究，系统开展了云南恶性疟原虫青蒿素抗性...
- 关键词：
- 关键词：疟疾防治青蒿素药物治疗
- 1998年以来人体寄生虫学领域国家自然科学基金资助项目浅析被引量：1
- 2012年
- 目的对近十多年来人体寄生虫学领域受国家自然科学基金资助项目特点做一总结,为寄生虫学领域科研人员的项目申请提供参考。方法利用国家自然科学基金委网站搜索工具的统计结果和丁香园网站国家自然科学基金搜索工具手工摘编相关的数据。结果针对人体寄生虫学领域的搜索结果进行分析,就原虫部分、蠕虫部分和媒介部分进行全面分析,获得国家自然科学基金资助人体寄生虫学领域、项目、资金和单位的资助趋势。结论国家自然科学基金资助的人体寄生虫学领域项目,在项目数、资助额度和涉及的虫种等方面均呈上升趋势。
- 周晓俊官亚宜熊彦红张国庆
- 关键词：国家自然科学基金人体寄生虫学
- 我国恶性疟原虫Pfcrt和Pfmdr1基因多态性及与氯喹敏感性关系的研究被引量：4
- 2009年
- 目的了解我国恶性疟原虫分离株Pfcrt基因K76T及Pf mdr1基因N86Y和D1246Y的点突变特征及发生率,并分析上述分子标志与恶性疟原虫对氯喹敏感性的关系。方法从我国恶性疟流行区云南和海南省采集恶性疟现症患者血样,根据恶性疟原虫Pfcrt基因和Pf mdr1基因序列设计巢式PCR引物,以血样中的恶性疟原虫DNA为模板,进行巢式PCR-RFLP分析,并对部分PCR产物进行测序验证。采用世界卫生组织制定的体外微量法测定同一批血样中恶性疟原虫对氯喹的敏感性。结果云南、海南省恶性疟原虫Pfcrt基因K76T的突变发生率分别为86.7%和64.3%;云南、海南省恶性疟原虫Pf mdr1 N86Y突变发生率分别为46.5%和3.4%。未发现云南、海南省恶性疟原虫分离株存在Pf mdr1 D1246Y突变。体外微量测定法显示Pfcrt 76T突变发生率氯喹抗性株与敏感株间差异有统计学意义(χ2=24.70,P<0.01)。Pf mdr1 86Y突变发生率氯喹抗性株与敏感株间差异无统计学意义(χ2=0.20,P=0.65)。结论在云南省和海南省现场未发现恶性疟原虫Pf mdr1 D1246Y点突变,抗氯喹恶性疟原虫的Pf mdr1 N86Y突变发生率与敏感株间无显著差异。Pfcrt K76T作为分子标志在我国恶性疟原虫氯喹抗性监测中具有应用价值。
- 官亚宜张国庆胡铃冯晓萍蔡玥姚俊敏刘德全汤林华
- 关键词：药物抗性单核苷酸多态性氯喹
- 巢氏PCR判定西藏疟疾流行区传疟媒介被引量：5
- 2010年
- 目的确定西藏墨脱县疟疾流行区的疟疾传播媒介。方法根据2005、2006和2007年疟疾发病情况,在墨脱县选择了3个疟疾发病较高的自然村,采用人诱、牛诱、灯诱及清晨人房全捕等方法捕获成蚊,经形态学鉴定后麻醉处死,密封干燥,带回实验室-20℃冻存备用,采用混合样本法随机抽取10只多斑按蚊复合体为一份混合标本,提取蚊虫DNA。根据文献采用巢氏PCR扩增疟原虫小亚单位核糖体脱氧核糖核酸(SSUrDNA),并对阳性结果克隆测序,比对证实。结果共捕获按蚊5345只,其中多斑按蚊复合体5190只,带足按蚊155只,提取的360份多斑按蚊复合体混合样本DNA中发现子孢子阳性扩增样品2份,种型鉴定2份阳性混合样本均为伪威氏按蚊,PCR产物经克隆测序,NCBIBLAST同源性比对证实为疟原虫SSurDNA基因片段。结论多斑按蚊复合体中的伪威氏按蚊为西藏林芝疟疾流行区的传疟媒介。
- 武松黄芳张国庆潘嘉云王学忠卓玛央金胡永红汤林华
- 关键词：子孢子传疟媒介
- 多重PCR技术检测恶性疟原虫抗药性相关分子标志的方法研究被引量：3
- 2007年
- 目的建立恶性疟原虫5个主要抗药性相关基因的单管多重PCR扩增方法,用于恶性疟原虫抗药性分子标志检测。方法依据各基因参考序列,运用Primer Premier 5.0和Oligo6.0软件,设计5对特异性引物,采用Hot Start Taq DNA聚合酶,设置递增延伸温度,对恶性疟原虫标准株(3D7、Dd2和HB3)、分离株(FCC1/HN、CMH/YN)、现场标本(来源于海南、云南和缅甸)、近缘虫种对照(间日疟原虫、伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫、杜氏利什曼原虫和牛源隐孢子虫)和空白对照(以H2O为模板)进行5个抗药性相关基因(包括恶性疟原虫氯喹抗性转运蛋白基因Pfcrt、多药抗性基因Pfmdr1、二氢喋酸合成酶基因Pfdhps、二氢叶酸还原酶基因Pfdhfr和三磷酸腺苷酶第6亚基基因PfATPase6)的单管多重PCR扩增,2%琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增结果,测定扩增产物序列,并与参考序列(3D7株)比对。结果经电泳,恶性疟原虫标准株、分离株和现场标本的多重PCR扩增产物均可见5条目标条带。测序结果与参考序列比对,高度同源,最低同源性为98.5%。模板DNA量达0.1ng即满足扩增要求,近缘虫种对照和空白对照未见扩增产物。结论多重PCR技术实现了单管1次反应完成5个抗药性相关基因的扩增,该方法灵敏,特异性好,有助于提高恶性疟原虫抗药性分子标志的检测效率。
- 张国庆汤林华官亚宜周水森郑彬黄芳武松刘燕
- 关键词：恶性疟原虫药物抗性单核苷酸多态性多重PCR
- 恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位预测及免疫学分析
- 2011年
- 目的对恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位进行预测，表达其重组蛋白并进行免疫学鉴定。方法利用生物信息学分析方法对MAL13P1．129基因的线性抗原表位进行预测，从亲水性、表面可及性、柔韧性及二级结构等方面对抗原表位进行筛选。人工合成经密码子优化的MAL13P1．129基因，构建至PET32a（＋）表达载体，获得PET32a129表达质粒，热激转化至宿主菌Rosettagami（DE3）中进行诱导表达，分别用抗His-标记的IgG及恶性疟患者的血清作Western印迹分析鉴定表达产物。结果MAL13P1．129基因具有2个潜在的抗原表位，分别位于氨基酸44～51、98～106。表达获得的重组蛋白与His-标记的IgG进行Western印迹有反应条带，与恶性疟患者血清无反应条带。结论MAL13P1．129蛋白具有2个抗原表位，其在大肠埃希菌中表达的重组蛋白能被His-标记的IgG识别，但不能被恶性疟患者血清识别。
- 陈勤张国庆徐馀信沈玉娟官亚宜冯晓平曹建平汤林华
- 关键词：恶性疟原虫抗原表位预测大肠杆菌基因表达
- 用于扩增恶性疟原虫药物抗性相关基因的多重PCR引物及方法
- 本发明涉及恶性疟原虫药物抗性相关基因多重PCR扩增方法，以恶性疟原虫基因组DNA为模板，采用本发明设计的多重PCR引物集，进行一次单管PCR反应，扩增特定的5个基因(恶性疟原虫氯喹抗性转运蛋白基因Pfcrt、恶性疟原虫多...
- 张国庆汤林华
- 文献传递
- 恶性疟原虫抗药性分子标志基因芯片检测方法的建立与应用
- 目的(1)建立一种基因芯片方法,用于检测恶性疟原虫抗药性分子标志。共涉及21个SNP,包括:恶性疟原虫氯喹抗性转运蛋白基因(pfcrt)的391 T/A、392G/C、399 G/T、400 A/G、402 T/A和40...
- 张国庆
- 关键词：恶性疟原虫药物抗性
- 文献传递
- 中国恶性疟原虫氯喹抗药性相关基因Pfcrt 72-76位点基因型分析被引量：5
- 2009年
- 目的了解我国云南和海南恶性疟原虫分离株Pfcrt基因72-76位点基因型,并分析该位置不同基因型与恶性疟原虫对氯喹敏感性的关系。方法从我国恶性疟流行区云南和海南省采集恶性疟现症患者血样,根据恶性疟原虫Pfcrt基因序列设计引物,进行巢式PCR扩增和测序。采用WHO制定的体外微量法测定同批血样中恶性疟原虫对氯喹的敏感性。结果云南、海南省恶性疟原虫Pfcrt基因第72-76位编码的氨基酸单元型在氯喹敏感株均为CVMNK。其中海南的氯喹抗性株Pfcrt基因第72-76位编码的氨基酸为单一的CVIET单元型,云南氯喹抗性株中除一株为CVIKT,另1株为SVMNT外,均为CVIET单元型。结论我国云南、海南省恶性疟原虫氯喹敏感株Pfcrt基因第72-76位编码的氨基酸基因型为CVMNK。抗性株主要为CVIET型,Pfcrt基因第72-76位编码氨基酸基因型可作为氯喹抗性分子标志。
- 张国庆官亚宜胡铃汤林华冯晓萍蔡玥姚俊敏刘德全
- 关键词：恶性疟原虫药物抗性单核苷酸多态性氯喹
