张军
- 作品数:15 被引量:32H指数:3
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- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 小鼠pcDNA3.1(+)-烯酰水合酶辅酶1真核表达质粒的构建及鉴定被引量:2
- 2011年
- 淋巴道转移是影响上皮来源恶性肿瘤患者预后的重要因素[1],澄清其转移机制意义重大.烯酰水合酶辅酶1(enoyl coenzyme A hydratase 1,ECH1)是一种具有烯酰辅酶水合酶活性的酶,该基因表达于细胞的过氧化物酶体,与多种肿瘤相关.
- 王梅唐建武宋波王波张军魏元怡张宇虹刘纪文
- 关键词:真核表达质粒合酶小鼠过氧化物酶体
- 烯酯酰辅酶A水解酶1基因在小鼠肝癌细胞株中的表达及其与增殖和迁移能力的关系被引量:2
- 2011年
- 目的 研究烯酯酰辅酶A水解酶1( ECH1)在小鼠肝癌高、低淋巴转移Hca-F/Hca-P细胞株中的表达及ECH1基因表达下调后对Hca-F细胞增殖和迁移能力的影响.方法 采用免疫荧光方法检测ECH1在小鼠肝癌细胞株中的表达.构建pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1表达载体,稳定转染至高淋巴转移Hca-F细胞中干扰ECH1基因的表达,通过CCK8法检测肿瘤细胞的增殖能力,Transwell小室检测肿瘤细胞的迁移能力,并应用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期情况.结果 ECH1在小鼠肝癌细胞株中主要表达于细胞质,且ECH1在Hca-F细胞的表达强于其在Hca-P细胞的表达.ECH1表达下调后,Hca-F细胞的增殖能力明显下降.Transwell小室检测穿膜细胞数pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组(27.07±17.49)较阴性对照组(72.38±18.83)和Hca-F组(59.06±30.33)明显减少,细胞周期S期pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组(86.1%)较阴性对照组(75.8%)和Hca-F组(66.2%)停留细胞数明显增多,G1期pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组(9.4%)较阴性对照组(24.2%)和Hca-F组(30.3%)停留细胞数明显减少.结论 ECH1可能在肿瘤淋巴转移中发挥作用,抑制ECH1的表达可有效降低体外高淋巴转移肿瘤细胞的增殖和迁移能力.
- 张军唐建武宋美英王波李荣宽侯力黄玉红王梅宋波金艳玲
- 关键词:淋巴转移
- Sorcin在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及定位被引量:3
- 2014年
- 目的:研究抗药蛋白sorcin(又称可溶性抗药相关蛋白)在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移潜能不同的细胞株Hca-F/Hca-cP中的定位及表达差异,进一步探讨其在肿瘤淋巴道转移中的作用。方法:以小鼠腹水肝癌高淋巴道转移株Hca-F和小鼠腹水肝癌低淋巴道转移株Hca-P为研究对象,采用实时定量PCR技术检测sorcin在Hca-F/Hca-P细胞中基因水平的表达差异;采用Western免疫印迹技术检测sorcin在Hca-F/Hca-P细胞中蛋白水平的表达差异;采用免疫荧光技术检测sorcin在细胞中的定位情况;采用细胞计数试剂盒-8检测肿瘤细胞的增殖能力;应用Transwell小室检测肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。结果:Hca-F细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力都明显高于Hca-P细胞;sorcin在Hca-F细胞中的基因水平和蛋白水平表达分别为Hca-P细胞的1.5和1.8倍;sorcin在两种小鼠腹水型肝癌细胞株中的定位主要位于细胞质。结论:sorcin在Hca-F中呈高表达,主要定位于细胞质,可能在其增殖、迁移和侵袭过程中发挥重要作用,为进一步探讨其作用机制和功能奠定了基础。
- 宋琳唐建武张军孙雷宋波黄玉红
- 关键词:SORCIN淋巴道转移肝癌增殖迁移
- 烯酯酰辅酶A水解酶1生物学特性及其与肿瘤的关系被引量:1
- 2010年
- 烯酯酰辅酶A水解酶1(Ech1)是脂肪酸β氧化的关键酶,主要位于过氧化物酶体和线粒体。近年来研究表明,其表达异常与肝癌、胃癌、慢性淋巴细胞白血病等肿瘤有关,但具体作用机制不清楚。Ech家族其他成员与临床疾病的关系也非常密切。
- 张军唐建武
- 关键词:肿瘤生物学
- Ech1的表达下调对小鼠肝癌淋巴道转移的影响及其可能机制
- 2015年
- 目的:探讨Ech1表达下调对小鼠肝癌淋巴道转移率的影响,及其与肿瘤相关蛋白Anxa7的相互关系。方法:将Ech1基因表达下调的Hca-F细胞植入小鼠足垫,28天后观察小鼠成瘤及转移情况。在Ech1基因表达下调的Hca-F细胞和对照Hca-F细胞中,通过Western blot检测Anxa7表达变化,同时在Anxa7表达下调Hca-F细胞和对照Hca-F细胞中通过Western blot检测Ech1表达变化。结果:下调Ech1基因的表达,使肿瘤细胞体内淋巴结转移率明显降低。Ech1表达下调后,肿瘤转移相关蛋白Anxa7表达增加;Anxa7表达下调后,Ech1蛋白表达下降。结论:肿瘤细胞Ech1基因表达水平与小鼠肝癌淋巴道转移密切相关,Ech1和Anxa7在Hca-F肿瘤淋巴道转移中可能相互作用。
- 张军金艳玲毛俊魏元怡黄玉红王波唐建武
- 关键词:淋巴道转移肝癌ANNEXIN
- 烯酯酰辅酶A水解酶1过表达对小鼠低淋巴道转移潜能肝癌细胞株Hca-P生物学行为的影响被引量:2
- 2013年
- 目的探讨烯酯酰辅酶A水解酶1(Eehl)过表达对小鼠低淋巴道转移潜能肝癌细胞株Hca-P体外增殖生长、迁移和侵袭能力的影响,及其Echl表达水平与肝癌淋巴道转移潜能的关系。方法将pcDNA3.1(+)-Echl重组质粒和空载体pcDNA3.1(+)分别稳定转染Hca-P细胞,通过半定量逆转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测目的基因及其蛋白表达水平;在获得过表达Echl的P‰。细胞株和实验对照组P空载体细胞株后,采用CCK.8法检测细胞分裂增殖能力,Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验评估Echl过表达对Hca-P细胞迁移和侵袭能力的影响。结果PEch1,组和P空载体组细胞中EchlmRNA相对表达水平分别为3.21±0.43和1.44±0.03,差异有统计学意义(P=0.029)。PEch1组、P空载体组和未经处理的Hca-P组(P组)细胞中Ecbl蛋白表达水平分别为0.140±0.005、0.088±0.003和0.078±0.006,差异有统计学意义(P〈0.05)。PEch1,组的细胞增殖能力明显高于P空载体组和P组(P〈0.05)。Transwell迁移实验显示,PEch1组、P空载体组和P组穿膜细胞数分别为(143.00±7.25)个、(95.73±3.88)个和(106.67±3.54)个,PEch1组与P空载体组和P组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。Transwell侵袭实验显示,PEch1组、P空裁体组和P组穿膜细胞数分别为(77.20±5.46)个、(46.34±4.35)个和(49.80±5.21)个,PEch1组与P空载体组和P组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论Ech1过表达可以显著促进Hca-P细胞增殖,增强其迁移和侵袭能力。Ech1有望成为临床基因治疗肝癌的靶点之一。
- 王梅宋波王波张军唐建武
- 关键词:细胞迁移肿瘤转移
- ECHL基因表达下调抑制小鼠肝癌细胞增殖、迁移和粘附能力等的研究
- 张军
- 文献传递网络资源链接
- 解偶联蛋白与阿尔茨海默病
- 2015年
- 解偶联蛋白(uncoupling protein,UCP)是线粒体内膜上的质子转运蛋白,被激活时能引发质子漏,质子经UCP渗漏回基质,使氧化磷酸化部分解耦联,降低线粒体膜电位,减少过量活性氧的产生。另外,UCP对ATP合成、钙离子稳态、能量代谢等也有调节作用。阿尔茨海默病是一种中枢神经系统退行性疾病,由多种因素共同作用引起,其中活性氧的作用越来越引起重视。UCP,特别是UCP2在中枢神经系统疾病方面的保护作用日益引起关注,有望成为阿尔茨海默病治疗的靶向目标。
- 张军于霄郭羽吴琼邹原
- 关键词:解偶联蛋白2阿尔茨海默病活性氧
- Ech1基因表达下调对小鼠肝癌细胞株Hca-F黏附能力的影响被引量:2
- 2012年
- 目的在蛋白质水平检测Ech1在小鼠肝癌高低淋巴道转移Hca—F细胞/Hca—P细胞中的表达及其对Hca-F细胞黏附能力的影响。方法采用荧光差异双向凝胶电泳(2DDIGE)和质谱技术定量分析鉴定Ech1在Hca—F细胞和Hca-P细胞中的表达;构建pGPU6/GFP/Neo--shRNA—Ech1质粒,稳定转染至Hca-F细胞中,并通过实时荧光定量PCR和Westemblot验证Ech1表达下调效果,检测Ech1基因表达下调后对细胞外基质和淋巴结的黏附能力。各组细胞间的差异采用单因素方差分析。结果Ech1在Hca-F细胞的表达明显高于其在Hca-P细胞表达;Ech1表达下调细胞株构建成功,Ech1基因表达下调后,降低Hca-F细胞对细胞外基质纤维连接蛋白和I型胶原成分的黏附能力,降低其对体内淋巴结的黏附能力。Hca-F组与pGPU6/GFP/Neo-shRNA-Ech1组黏附吸光度值的差异有统计学意义,层黏连蛋白和I型胶原吸光度值分别为1.42±0.26和1.14±0.07与1.01±0.27和0.90±0.09,P值均〈0.05。结论抑制Ech1基因和蛋白的表达,可以降低小鼠肝癌细胞株Hca—F细胞的黏附能力。
- 张军唐建武孙明忠刘淑清宋美英王波宋波黄玉红
- 关键词:淋巴转移SHRNA
- SNCG在肝癌高/低淋巴道转移细胞株中的差异性表达被引量:2
- 2015年
- 目的:研究SNCG蛋白在小鼠肝癌高/低淋巴道转移潜能细胞株中的定位和表达差异。方法:应用免疫细胞化学、Western blot方法检测SNCG蛋白在小鼠肝癌高/低淋巴道转移潜能细胞株Hca-F/Hca-P的定位情况和表达差异。结果:SNCG蛋白在Hca-F和Hca-P细胞株中均主要定位于细胞浆,细胞核区域也可见少量蛋白表达。SNCG在Hca-F中的表达[染色强度为(+++)]强于在Hca-P中的表达[染色强度为(++)]。检测到一条SNCG特异性蛋白条带,在Hca-F细胞中表达量为Hca-P细胞中的1.9倍。结论:SNCG的高表达可能与高淋巴道转移潜能有关。
- 魏元怡张军王波黄玉红王梅王璐唐建武
- 关键词:SNCG肝癌淋巴道转移