张作芳
- 作品数：20 被引量：80H指数：6
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 用OPD-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫法检测植物病毒ArMV、CMV、SBMV和TuMV被引量：9
- 1999年
- 首次将邻苯二胺(OPD) -H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系 ,应用于植物病毒南芥菜花叶病毒(ArMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)和芜箐花叶病毒(TuMV)的血清学检测。该法测定以上植物病毒感染病叶澄清液的最高稀释比(体积比)分别为1∶500000 ,1∶500000,1∶2500000和1∶2500000,而酶联免疫吸附分析(ELISA)测定的最高稀释比分别为1∶2500 ,1∶12500 ,1∶100000和1∶25000。该法测定以上植物病毒的灵敏度和测定范围均优于经典的ELISA光度法。
- 焦奎孙刚张书圣刘澄凡张成良张作芳刘靖宇魏澎
- 关键词：花叶病毒
- A 蛋白酶联法检测植物病毒的研究被引量：10
- 1990年
- 用一种动物的特异抗体,与市售 A 蛋白(SPA)、A 蛋白酶标记物(HRP-SPA)组合成 A 蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)检测南方菜豆花叶病毒(SBMV)、烟草花叶病毒(TMV)纯化抗原和病株粗澄清液,灵敏度分别为0.128μg/ml 和1:10000。使用的 A 蛋白包被的适宜工作浓度为2.5μg/ml,兔抗 SBMV 血清作第一抗体适宜工作浓度为1:100000,作第二抗体适宜工作浓度为1:1000。检测 TMV 也得到相似的结果。该法的灵敏度是 ELISA-异种动物抗体双夹心法的1～25倍;是 ELISA 间接法的10～125倍;是免疫双扩散法的3000～6000倍。应用这种酶联法既不需要纯化抗体、也不要自己制备酶标记抗体,又不需要制备第二种动物特异抗体就可以得到酶联双抗体夹心法和异种动物抗体双夹心法相似或更好的结果,使 ELISA 更适于在植物检疫上推广应用。
- 陆家珏张成良张作芳季良
- 关键词：酶联法夹心法酶标记物免疫双扩散法植物病毒纯化抗原
- 联苯胺-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒TMV和TRSV被引量：9
- 1999年
- 提出了联苯胺－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒烟草花叶病毒（ＴＭＶ）和烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的新方法。ＨＲＰ标记的羊抗兔酶标记抗体ＩｇＧ－ＨＲＰ可以催化Ｈ２Ｏ２氧化联苯胺的反应，其氧化产物在Ｂｒｉｔｏｎ－Ｒｏｂｉｎｓｏｎ（ＢＲ）缓冲溶液中在－０．６２Ｖ（ＳＣＥ）左右产生灵敏的线性扫描二阶导数伏安峰，可以测定ＩｇＧ－ＨＲＰ。根据ＩｇＧ－ＨＲＰ与植物病毒及其抗血清的免疫反应，可以间接测定植物病毒。本法测定ＴＭＶ的检出限为０．２５ｎｇ／ｍＬ，线性范围为０．２５～５０００ｎｇ／ｍＬ；测定ＴＲＳＶ的检出限为１．５ｎｇ／ｍＬ，线性范围为１．５～３０００ｎｇ／ｍＬ；测定ＴＭＶ烟草病叶澄清液的最高稀释比为１∶１００００。检测灵敏度高于酶联免疫吸附显色光度法（ＥＬＩＳＡ）
- 牛淑妍焦奎张成良张成良刘靖宇张作芳
- 关键词：酶联免疫分析烟草环斑病毒
- OAP -H_2O_2 -HRP伏安酶联免疫分析测定烟草花叶病毒(英文)
- 2000年
- 本文提出了邻氨基酚 (OAP) -H2 O2 -辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系并用于烟草花叶病毒 (TMV)的测定。本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H2 O2 氧化OAP的产物 ,用于HRP测定的检出限为 1 5× 1 0 - 1 mU·L- 1 ,线性范围为 2 5× 1 0 - 1 ～ 1 .0× 1 0 3mU·L- 1 。本法对TMV测定的检测限为 2 .0ng·mL- 1 。用所建立的方法测定病毒感染病叶澄清液的最高稀释比为 1∶3.9× 1 0
- 焦奎张书圣林洁华张成良张作芳
- 关键词：烟草花叶病毒辣根过氧化物酶伏安法
- 邻联茴香胺-H_2O_2-辣根过氧化物酶伏安酶联免疫分析检测四种重要植物病毒被引量：1
- 1998年
- 将邻联茴香胺（ＯＤＡ）Ｈ２Ｏ２辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系应用于测定南芥菜花叶病毒（ＡｒａｂｉｃＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓＡｒＭＶ）、黄瓜花叶病毒（ＣｕｃｕｍｂｅｒＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓＣＭＶ）、南方菜豆花叶病毒（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｅａｎＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓＳＢＭＶ）和芜菁花叶病毒（ＴｕｒｎｉｐＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓＴｕＭＶ）等四种重要植物病毒，其灵敏度高于酶联免疫吸附显色光度法（ＥＬＩＳＡ）。
- 焦奎韦璐张书圣刘澄凡张成良张作芳刘靖宇魏澎
- 关键词：南芥菜花叶病毒黄瓜花叶病毒芜菁花叶病毒
- 黄瓜花叶病毒异常分离物自然感染甜菜的首次报道
- 从新疆石河子地区春季采种甜菜和夏播母根用甜菜上分离到3个黄瓜花叶病毒(CMV)分离物,代号为石-B-2、石-B-5和石-B-D,自然感染甜菜引起叶片黄色花叶、扭曲、皱缩和植株严重矮化。它们均含有分子量约为
- 席德慧向本春刘升学朱水芳张成良张作芳
- 关键词：黄瓜花叶病毒分离物甜菜
- ODA_H_2O_2-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析检测植物病毒GFV、TAV和PVY被引量：9
- 1998年
- 将邻联茴香胺（ＯＤＡ）＿Ｈ２Ｏ２＿辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）偶合反应伏安酶联免疫分析新体系，应用于植物病毒葡萄扇叶病毒（ｇｒａｐｅｖｉｎｅｆａｎｌｅａｆｖｉｒｕｓ，ＧＦＶ）、番茄不孕病毒（ｔｏｍａｔｏａｓｐｅｒｍｙｖｉｒｕｓ，ＴＡＶ）和马铃薯Ｙ病毒（ｐｏｔａｔｏｖｉｒｕｓＹ，ＰＶＹ）的测定。该法对以上各种植物病毒叶澄清液的测定的稀释比均高于酶联免疫吸附分析（ＥＬＩＳＡ）法，检测范围均宽于ＥＬＩＳＡ法。
- 焦奎韦璐张书圣刘澄凡张成良张作芳刘靖宇魏澎
- 关键词：葡萄扇叶病毒番茄不孕病毒马铃薯Y病毒ODA
- 烟草花叶病毒单克隆抗体研究和应用
- 张作芳张成良阙晓枫陈伯权孙月英
- 利用国内现有条件，建立中国第一株植物病毒-烟草花叶病毒(Tobaccomosdicvirus-TMV)单克隆抗体(MCAB)杂交瘤细胞株，其效价、特异性、稳定性等方面相当于国际同类水平。相继研制出20多个TMV-MCAB...
- 关键词：
- 关键词：植物病毒烟草花叶病毒单克隆抗体抗病育种
- MAP-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析测定南方菜豆花叶病毒被引量：3
- 2000年
- 提出间氨基酚 ( MAP) -H2 O2 -辣根过氧化物酶 ( HRP)伏安酶联免疫分析新体系 ,并用于南方菜豆花叶病毒 ( SBMV)的测定 .以线性扫描二阶导数伏安法检测 HRP催化 H2 O2 氧化 MAP的产物 ,用于游离 HRP及 SBMV的测定 ,灵敏度均高于经典的 ELISA显色光度法 .本法对 HRP测定的线性范围为 1 .0× 1 0 - 8～1 .0× 1 0 - 6 g/L,检测限为 3 .8× 1 0 - 9g/L;对 SBMV测定的线性范围为 4 .0～ 50 0 0 ng/m L,检测限为 4 .0ng/m L.用所建立的方法测定病毒感染病叶澄清液的最高稀释比为 1∶ 1 .5× 1 0 5 ,并与现行的 ELISA显色光度法进行对照 。
- 张书圣焦奎陈洪渊王曼霞张成良张作芳
- 关键词：南方菜豆花叶病毒HRP免疫分析伏安法
- 关于我国植物隔离检疫圃工作设想
- 1990年
- 前言隔离圃检疫是实施入境后检疫的一个重要环节。在国际上已受到足够的重视,不少国家,如美国、英国、日本、苏联、澳大利亚、尼日利亚、印度、西南太平洋领地、加拿大、意大利、土耳其、肯尼亚、坦桑尼亚、乌干达、匈牙利等国都先后建立了各种不同类型的隔离检疫圃,并积累了一套成功的隔离检疫经验。
- 张作芳
- 关键词：隔离检疫检疫技术病毒类鉴别寄主植物病毒学
