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崔丽春: 作品数：33 被引量：178H指数：8; 供职机构：东北林业大学更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金黑龙江省博士后基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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乳酸杆菌基因表达系统的研究进展被引量：10: 2007年; 乳酸杆菌是人及动物肠道中重要的益生菌,被公认为安全级(generally recognized as safe,GRAS)微生物。乳酸杆菌表达系统是近几年发展起来的一种表达系统,随着乳酸杆菌分子生物学的发展、各类表达调控元件的分离,相继发展了乳酸杆菌的克隆载体、表达载体和整合载体。乳酸杆菌具有免疫佐剂、吸附黏膜、抗胆汁酸能力,以乳酸杆菌为载体,作为外源基因的传递和表达系统,研制口服疫苗,刺激黏膜免疫系统产生有效的免疫应答,具有重要开发前景。; 徐义刚崔丽春; 关键词：乳酸杆菌外源基因

多重PCR-DHPLC检测4种主要致腹泻性大肠埃希氏菌方法的建立与应用被引量：6: 2010年; 肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)和肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)是引起腹泻、危害食品安全和人类健康的4种主要大肠杆菌。本实验基于ETEC LT基因、EPEC bfpA基因、EHEC O抗原基因和EIEC侵袭性质粒基因序列,设计了4对特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)和变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术,通过体系优化,建立了致腹泻性大肠杆菌多重PCR-DHPLC检测方法,达到同时检测4种致病菌的目的。该方法灵敏度高,最低检测限为EHEC6×101拷贝/μL、ETEC1.3×102拷贝/μL、EPEC9×101拷贝/μL、EIEC7×101拷贝/μL。特异性试验表明,对22种共41株细菌进行检测,所试6株致腹泻性大肠杆菌均为阳性。实践证明,该方法具有良好的实用性,可用于ETEC、EPEC、EHEC和EIEC的单一或混合感染的检测。; 徐义刚崔丽春李苏龙曹际娟姜艳春张子群刘新亮; 关键词：聚合酶链式反应变性高效液相色谱

梅花鹿同期发情技术的研究: 于2000年9月9日,在吉林松花湖鹿场对30头东北梅花鹿,分两试验群进行了同期发情试验。两试验群分别采用不同的试验药物进行处理:第一试验群（共14头）采用了18甲基炔诺酮埋植并配合PMSG、HCG和雌二醇的处理方法,其中...; 马泽芳田长永刘家亮张艳禾崔丽春姜晓东崔凯雷振中靳占江刘桂彬王玉华; 关键词：梅花鹿同期发情技术同期发情率受胎率; 文献传递

动物医学专业基础课实验教学体系的改革与实践被引量：4: 2008年; 针对动物医学专业基础课,对实验教学体系的改革模式进行了构建与实施。在新的实验教学体系中,综合设计性实验,特别是多门课程综合交叉和学生自主设计的实验环节对培养大学生的创新能力具有重要的实践意义。; 杜荣秦健杜娟崔丽春; 关键词：动物医学专业基础课综合设计性实验

猪细小病毒VP2蛋白在干酪乳杆菌表面的表达被引量：6: 2007年; 将编码猪细小病毒主要免疫保护性抗原VP2基因插入干酪乳杆菌细胞表面表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌系统,经2%乳糖在MRS培养基中的诱导表达,SDS-PAGE检测表明,有约74kD蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符。Western-blot结果分析表明,表达的蛋白可被鼠源PPV抗血清所识别,间接免疫荧光实验结果表明,所表达的蛋白能够在干酪乳杆菌菌体表面检测到。; 徐义刚崔丽春马广鹏唐丽杰葛俊伟夏春丽乔薪媛赵丽丽李一经; 关键词：猪细小病毒 VP2蛋白干酪乳杆菌

食品中沙门氏菌DNA环介导等温扩增快速检测方法的建立被引量：10: 2010年; 根据沙门氏菌属高度保守的fimY基因序列设计了2对特异性引物,采用环介导等温扩增方法(LAMP)建立了食品中沙门氏菌的LAMP快速检测方法。结果表明,建立的LAMP方法具有高度特异性,经对40种共68株细菌进行扩增,所试32株沙门氏菌均为LAMP阳性,其他菌株为LAMP阴性。建立的LAMP方法对培养的沙门氏菌的检测灵敏度为5CFU/管,对污染食品中沙门氏菌的检测灵敏度为9CFU/管,60min内即可完成检测。用建立的LAMP方法对802份肉类、蛋、奶及其制品和动物腹泻物、人工污染样品等进行检测,共检出165份LAMP阳性样本,与国标(GB/T4789.4-2008)方法的检测结果一致。建立的LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。; 徐义刚崔丽春杨君宏李苏龙李丹丹姜艳春张子群; 关键词：沙门氏菌环介导等温扩增

不同饲养时期雄性梅花鹿血中尿嘧啶和次黄嘌呤含量的HPLC分析被引量：2: 2009年; 采集梅花鹿不同饲养时期的血液,经离心、过微孔滤膜后上HPLC柱,测定尿嘧啶和次黄嘌呤的含量。结果发现,用HPLC测定尿嘧啶线性方程为y=6478.2x-75.5,r=0.99996;次黄嘌呤线性方程为y=4372.36x-0.74,r=0.9981;分别计算出待测样品中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量。经统计学分析发现,梅花鹿血液中尿嘧啶含量在生茸期和配种期差异不显著,恢复期和生茸前期差异不显著;而生茸期、配种期和恢复期、生茸前期之间具有显著性差异;而不同饲养时期次黄嘌呤含量不存在差异性。; 曹荣峰崔丽春马泽芳; 关键词：梅花鹿尿嘧啶次黄嘌呤

应用DPO-PCR技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7被引量：11: 2014年; 利用双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7。根据DPO引物设计原则,以肠出血性大肠杆菌O157∶H7 rfbE基因为靶基因设计一对DPO引物,经过反应体系的优化,建立了肠出血性大肠杆菌O157∶H7 DPO-PCR检测方法,其检测灵敏度约为94 CFU/mL。与常规PCR方法相比,所建立的DPO-PCR方法对退火温度不敏感,在引物设计和实验过程中不需要对引物及其退火温度反复优化,同时基于DPO引物的特殊结构又增强了其特异性。DPO-PCR方法设计简易、特异性强,为致病性微生物的快速准确检测提供了新途径。; 徐义刚李丹丹崔丽春刘忠梅李苏龙

肠出血性大肠埃希菌O157∶H7环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用被引量：7: 2010年; 目的肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义。方法基于EHEC O157∶H7保守的rfbE基因序列,设计4条引物,利用环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP),成功建立了EHEC O157∶H7LAMP快速检测方法 ,60min内即可完成致病菌检测。结果利用该LAMP方法对30种共38株细菌进行检测,所试EHEC O157∶H7均为阳性结果 ,说明该方法具有高度特异性。本方法对纯培养的EHEC O157∶H7检测限为12CFU/mL,污染食品中EHEC O157∶H7的检测限为18CFU/g。实践应用表明,对1121份进出口肉类、奶类制品及人工污染样品等进行检测,检出57份LAMP阳性,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%。结论该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。; 徐义刚崔丽春李苏龙于恒纯李丹丹谢晓峰姜艳春

分泌型和非分泌型表达猪细小病毒VP2蛋白的重组乳酸菌经口免疫小鼠的效果分析被引量：4: 2007年; 对比分析在不同细胞部位表达猪细小病毒(PPV)主要免疫保护性抗原VP2蛋白的重组干酪乳杆菌系统作为口服疫苗的免疫效果。将构建的细胞表面表达和分泌表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌分别经口免疫BALB/c小鼠,免疫分3次进行,时间间隔为2周,每次连续接种3 d,每只小鼠每次接种100μL 1010CFU/mL的菌量,对照组小鼠接种相同剂量的PBS。初免后不同时间收集免疫小鼠粪便及肠黏液样本测定小鼠产生抗PPV的特异性sIgA抗体水平,采集小鼠血液样本测定其血清中抗PPV的特异性IgG抗体水平。间接ELISA检测结果表明,两种表达系统均能诱导小鼠产生黏膜及系统免疫应答,分泌型的重组菌系统免疫小鼠诱导机体产生的抗PPV的特异性sIgA和IgG抗体水平高于细胞表面表达型的重组菌系统的免疫效果,表明分泌型的重组乳酸菌作为活菌疫苗具有更好的免疫性。; 徐义刚唐丽杰崔丽春赵丽丽李一经; 关键词：猪细小病毒 VP2蛋白干酪乳杆菌

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