夏平安
- 作品数：178 被引量：492H指数：12
- 供职机构：河南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株M基因的原核表达与重组蛋白的复性研究被引量：2
- 2009年
- 采用PCR方法从重组质粒pTG19-T-M扩增得到缺失N端疏水区序列的基因片段tM.将tM与原核表达载体pET-32 a进行连接并转化,重组质粒经鉴定并测序.结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21细胞中成功地表达了醉繁殖与呼吸病毒重组蛋白pET-tM,表达量为31%.表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为29 kD的重组蛋白且以包涵体形式存在.8 mol.L-1尿素变性溶解包涵体,再用稀释与透析相结合的方法对重组蛋白进行复性.复性蛋白经W estern-b lot检测,结果证明复性蛋白可被PRRSV阳性血清识别用.
- 刘明莉张凤华范旭赵琳刘玉松徐红运夏平安崔保安
- 关键词：PRRSVM蛋白原核表达
- 鸭白介素-18基因重组真核表达载体的构建及其表达产物的生物学活性被引量：1
- 2008年
- 从克隆质粒pGEM-DuIL-18扩增出鸭IL-18全基因片段,克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pcDNA3.1/DuIL-18(简称pDuIL-18)。将重组质粒pDuIL-18转染Cos7细胞,转染细胞中含鸭IL-18基因的mRNA。SDS-PAGE分析表明,表达产物是与鸭IL-18相符的约23000的蛋白条带。鸭淋巴细胞转化试验表明,表达产物对鸭淋巴细胞具有明显诱导转化作用。重组质粒pDuIL-18对H9亚型禽流感灭活疫苗免疫增强作用的研究表明重组质粒pDuIL-18能够提高禽流感灭活疫苗诱发的细胞免疫应答,为研究能够更好地防制禽流感的新型疫苗提供了新的思路。
- 陈红英李新生崔保安夏平安张红英杨明凡
- 关键词：真核表达
- 鸡约氏乳杆菌的分离鉴定及进化分析被引量：3
- 2010年
- 从3日龄健康小鸡肠道中分离到1株乳杆菌,用PCR方法从分离菌株扩增16S rRNA基因,获得大小为1340 bp的DNA片段,该片段的核酸序列已提交GenBank,登录号为EU290749。将分离株的16S rRNA基因核苷酸序列与GenBank上其它乳杆菌进行同源性分析并建立进化树。结果表明,分离株的16S rRNA基因核苷酸序列与NCBI公布的鼠约氏乳杆菌分离株(AB295648)的同源性为99.6%,因此该分离菌株被鉴定为鸡约氏乳杆菌(chicken Lactobacillus johnsonii),命名为HN/0711。
- 张凤华夏平安崔保安张红英郭国富
- 关键词：RRNA进化分析
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒河南分离株的遗传变异分析
- 经间接免疫荧光试验和RT-PCR鉴定,用Marc-145细胞从河南省不同地区送检的疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征的病料中分离到16株猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV).扩增分离株的ORF5基因并进行序列测定.比较分析和...
- 李伟娟夏平安卢高峰党占国尹彦涛王中明邱璜崔保安
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒ORF5基因基因克隆
- 猪伪狂犬病病毒流行毒株JZ-45的分离鉴定与变异分析
- 2022年
- 利用ST细胞从猪伪狂犬病(PR)阳性样品中分离到1株猪伪狂犬病病毒(PRV),并对其生物学特性进行鉴定,扩增该毒株gC、gE全基因,进行测序和遗传进化分析。结果显示:该毒株在ST细胞盲传2~3代后出现稳定且典型的细胞病变(CPE),经6轮空斑纯化后,测其TCID_(50)为10^(-6.58)/0.1 mL;接毒培养12 h后,间接免疫荧光方法检测,可在荧光显微镜下观察到特异性免疫荧光。将纯化后的病毒液接种小鼠,测其LD_(50)为10^(-2.68)/0.1 mL,组织病理切片分析显示死亡小鼠的心脏、肝脏、脾脏等各组织具有明显的病理损伤,将100个LD_(50)病毒液接种家兔,2 d后接种兔子出现PR典型症状;同源性对比结果显示gC基因与国内经典、变异毒株同源性分别为99.2%~99.7%和99.9%~100.0%,与国外经典株同源性为96.0%~96.2%;氨基酸序列与国外经典株相比,在63位氨基酸位点处有连续7个氨基酸插入(AAASTPA);gE基因与国内经典、变异毒株同源性分别为96.7%%~99.4%和99.7%~99.8%,与国外经典株同源性为95.3%~97.8%;氨基酸序列与国外经典株相比,在492位氨基酸位点处有2个氨基酸插入(DG);遗传进化分析显示,该毒株的gC、gE基因与国内变异株位于同一进化分支,将该毒株命名为JZ-45。本试验研究结果为河南省PRV的流行病学遗传进化分析以及防控提供参考。
- 苗信永孔令昊陈雨赵世杰崔志莹李闻徐朋丽陈静张宜娜李新生夏平安吴斌
- 关键词：猪伪狂犬病病毒GC基因GE基因生物学特性
- 一种留兰香精油的提取方法
- 本发明的目的在于，提供一种超临界CO<Sub>2</Sub>萃取留兰香精油工艺，为留兰香的综合开发和高效无毒利用奠定了基础。一种留兰香精油的提取方法，包括下列步骤：1)将干燥留兰香茎叶粉碎后，2)投入萃取釜中，当萃取釜的...
- 张红英崔保安王亚宾夏平安
- 文献传递
- 鸡新城疫病毒V_4株的生物学特性研究被引量：5
- 1994年
- 鸡新城疫病毒Ｖ４株对１日龄雏鸡安全；对１０日龄雏鸡一次饮水或滴鼻免疫．半年内，ＨＩ抗体平均效价为２５左右；以１００ＥＩＤ５０Ｆ系标准强毒（毒力为１０８．５ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ）攻击，保护率１００％。并成功地培育了能在５６℃水浴中处理５小时而血凝效价稳定的耐高温毒株Ｖ４－９２．该毒株在２５℃至少保存５周，血凝效价不降。
- 夏平安候安祖
- 关键词：鸡病新城疫病毒V4株生物学特性
- tPA信号肽和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原核表达载体的构建被引量：5
- 2009年
- 根据GenBank(序列号E00896)上公布的人组织型纤溶酶原激活因子(tissue plasminogen activator,tPA)的序列,利用在线信号肽分析工具Signal P3.0 Server预测出人tPA的信号肽共有63bp,设计1对能互为模板直接进行扩增的特异性引物,通过重叠PCR的方法扩增出tPA信号肽。另设计1对连接引物,利用PCR方法将tPA信号肽与已删除自身信号肽的ORF5基因相连,成功构建了用tPA信号肽取代猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原有信号肽的原核表达质粒,为下一步GP5蛋白分泌表达及猪繁殖与呼吸综合征疫苗开发、诊断试剂盒的研制与应用奠定基础。
- 邱璜夏平安卢高峰王中明刘明莉李伟娟党占国
- 关键词：PRRSVORF5基因原核表达载体
- 口蹄疫与经典猪瘟二联RT-PCR诊断方法的建立及其应用被引量：3
- 2004年
- 根据口蹄疫病毒 (FMDV)与猪瘟病毒 (CSFV)基因组序列高度保守区 ,设计合成 2对引物 ,以 CSFV和 FMDV培养物提取 RNA并反转录 ,进行 RT- PCR特异性片段扩增 ,扩增片段大小分别为 2 0 0 bp、14 1bp。结果表明 ,扩增产物与设计的2对引物之间的序列大小一致。通过特异性与敏感性试验 ,CSFV与 FMDV培养物均可扩增至 10 - 5倍稀释 ,最终建立的二联RT- PCR方法对上述 2种病毒的敏感性亦可达 10 - 4倍稀释 ,约 10 pg的总 RNA,证明本法对上述 2种病毒具有快速、特异和高度敏感的特点。
- 刘海鹏刘维全江禹夏平安王本旭王吉贵马兴元王萍赵玉军
- 关键词：口蹄疫猪瘟RT-PCRRNA病毒反转录
- 猪繁殖与呼吸综合征和猪流感复合RT-PCR诊断方法的建立及应用
- 根据猪流感(SIV)A/Swine/HeNan/703/2001(H3N2)株的NP基因保守序列、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCC VR-2332)的ORF6及部分ORF7保守序列,设计合成了两...
- 夏平安李艳伍张红英杨霞崔保安卢中华
- 关键词：PRRSVSIV
- 文献传递
