卢华定
- 作品数:102 被引量:787H指数:17
- 供职机构:中山大学附属第五医院更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学交通运输工程建筑科学更多>>
- 柱状分层的胶原-羟基磷灰石复合支架负载软骨细胞体外培养被引量:17
- 2006年
- 目的观察具有柱状分层结构的胶原-羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)复合支架对软骨细胞的吸附作用及对软骨细胞生物学性状的影响,评价其作为软骨组织工程支架的可行性及价值。方法以胶原复合HA逐层制备胶原-HA复合支架,体外培养新西兰大白兔关节软骨细胞并扩增,吸附于多孔胶原-HA复合支架材料上进行三维立体培养3周,通过倒置相差显微镜、组织学、扫描电镜及免疫组织化学检测支架对软骨细胞的表型、增殖及功能的影响。结果胶原-HA复合支架为柱状,支架表层为胶原。平均孔径为147μm,孔隙率89%;中层为多孔胶原-HA复合;底层为HA,平均孔径为85μm,孔隙率85%。胶原-HA复合支架亲水性好,软骨细胞吸附于支架表面24h后,增殖并逐渐顺孔隙迁徙至支架内部,在孔壁贴附良好,表型维持稳定,分泌细胞外基质,型胶原免疫组织化学染色阳性。结论具有柱状分层结构的胶原-HA复合支架其细胞相容性良好,较胶原纤维具有更强的力学性能,有望成为一种比较理想的软骨组织工程支架材料。
- 卢华定蔡道章冯智英吴刚曾春史德海李晓峰
- 关键词:组织工程软骨胶原羟基磷灰石
- 壳聚糖酶基因在软骨细胞中的表达及对壳聚糖介导基因转染的影响
- 2014年
- [目的]探讨携带壳聚糖酶(CSN)基因的重组慢病毒感染软骨细胞后影响CSN活性的因素,及CSN在壳聚糖(CS)/DNA纳米粒介导基因转染软骨细胞中的作用。[方法]构建携带CSN和红色荧光带白(RFP)基因的重组慢病毒(LV-CSN)并感染兔关节软骨细胞,流式细胞仪及荧光显微镜检测其感染率;二硝基水杨酸比色法(DNS)检测对CSN活性的影响因素;以CS/DNA纳米粒介导体外基因转染软骨细胞,检测CSN对CS/DNA纳米粒介导基因转染软骨细胞的作用。[结果]带RFP基因的LV-CSN感染软骨细胞后48 h和第7 d,RFP表达率分别为(91.40±0.98)%和(91.67±1.00)%,二者差异无统计学意义(P=0.583)。p H值、温度及铜离子浓度对CSN的活性有明显影响。LV-CSN感染软骨细胞后CS/DNA组的基因转染效率显著高于裸p DNA组和CS/DNA组(P<0.05),但铜离子可以拮抗这种作用。[结论]在一定时间内LV-CSN感染软骨细胞后可稳定表达CSN,CSN的活性受p H值、温度及铜离子浓度的影响;CSN可提高CS/DNA对软骨细胞的基因转染效率,铜离子则可拮抗这种作用。
- 连礼熠卢华定陈明伟
- 关键词:壳聚糖酶壳聚糖非病毒基因载体基因转染软骨细胞
- 人骨髓基质干细胞体外诱导向软骨细胞分化被引量:5
- 2005年
- 目的:探讨应用壳聚糖支架三维立体培养人骨髓基质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs),体外诱导其分化成为软骨细胞的可行性。方法:实验于2004-02/11在中山大学附属第三医院中心实验室完成。相分离法制备三维多孔壳聚糖支架,检测支架的孔隙率、孔径。抽取人骨髓,密度梯度离心法分离纯化,体外培养扩增。将第3代MSCs复合于支架中培养,应用无血清诱导液诱导细胞向软骨细胞分化,通过组织学染色及扫描电镜观察细胞的形态、增殖及功能的改变。结果:通过相分离法可制备出高孔隙率的三维壳聚糖支架,孔隙率达86.5%,孔隙分布均匀且相互连通,平均孔径182μm。诱导分化的MSCs在支架中贴附良好,呈现典型的软骨细胞形态,并有细胞外基质分泌。结论:人MSCs在三维立体培养环境下可诱导分化为软骨细胞,作为种子细胞在组织工程软骨的构建及软骨损伤的修复中有良好的应用价值。
- 曾春蔡道章全大萍布丽斯卢华定李晓峰史德海
- 关键词:干细胞软骨壳多糖
- 全膝关节表面置换术术中骨折的预防和处理
- 目的:探讨全膝关节表面置换术术中发生骨折的原因及预防方法。方法:通过对自1995年9月至2005年10月,在我科行全膝关节表面置换术的168例患者(218膝)的回顾性分析。本组患者中女性居多共女133例,男性35例,年龄
- 蔡道章王昆戎利民王其友卢华定
- 钢丝内固定治疗后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折
- 目的 应用钢丝通过钻孔牵拉内固定治疗后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折,评价其疗效.方法 2003年1月至2009年6月,28例膝关节后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折患者,男19例,女9例,年龄16~55岁,平均35.3岁;X线检查示...
- 卢华定蔡道章曾春温小粤
- 关键词:膝关节后交叉韧带撕脱骨折
- Ⅰ型胶原负载骨髓基质细胞修复兔膝关节软骨缺损被引量:8
- 2006年
- 目的探讨同种异体骨髓基质细胞(MSCs)-Ⅰ型胶原复合移植修复关节软骨缺损的疗效。方法构建Ⅰ型胶原支架,将体外培养的兔MSCs吸附于该支架上培养,检测支架对MSCs的吸附及增殖的影响,再移植于兔膝关节全层软骨缺损处,分批取材,进行大体、组织学观察。结果MSCs在Ⅰ型胶原支架内贴附良好,分泌胞外基质,MSCs-胶原复合移植组软骨缺损处在术后12周为透明软骨样修复,空白对照组为纤维瘢痕样修复。结论Ⅰ型胶原支架与MSCs相容性良好,MSCs-胶原复合移植可达到透明软骨样修复软骨缺损。
- 卢华定蔡道章秦骥黄冬梅
- 关键词:软骨骨髓基质细胞
- 膝关节镜术后注射透明质酸钠对关节功能恢复的探讨被引量:1
- 2003年
- 目的:通过临床随机对照研究探讨膝关节镜术后关节腔内注射透明质酸钠治疗的效果。方法:对关节镜手术118例于手术结束时在关节腔内注射透明质酸钠2ml,术后第4天抽出关节积液,再注入透明质酸钠2ml;1次/周,连续4次为1个疗程,根据病情注射一二个疗程。观察患者关节疼痛(休息痛及运动痛)、肿胀、压痛、活动度及行走情况6个项目综合评分。与同期手术未用药的58例进行比较。结果:用药组术后疼痛程度、关节肿胀、压痛、活动度评分均低于未用药组。结论:透明质酸钠在膝关节镜手术后关节腔内注射是一种行之有效的关节保护剂和生物止痛剂,有助于关节功能恢复。
- 卢华定蔡道章戎利民
- 关键词:膝关节镜术注射治疗透明质酸关节功能恢复
- 胶原/羟基磷灰石支架负载软骨细胞修复兔膝关节骨软骨缺损被引量:10
- 2010年
- 目的探讨胶原复合梯度羟基磷灰石(Col/HA)双相支架负载软骨细胞修复兔膝关节骨软骨缺损的可行性及疗效。方法构建Col/HA双相支架,将软骨细胞种植于支架培养1周,再将软骨细胞-支架复合体移植修复兔膝关节股骨髁的骨软骨缺损,并对骨软骨缺损的修复进行检测。结果光镜及扫描电镜观察显示软骨细胞在Col/HA支架中贴附良好,表型维持稳定,分泌胞外基质。大体观察和组织学检测显示,植入体内16周后实验组软骨层呈透明软骨样修复,软骨下骨缺损有新骨构建;对照组骨软骨缺损修复不良,组织学检测以纤维性组织或纤维软骨组织形成。Wakitani评分显示实验组修复组织优于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论双相Col/HA复合支架可作为骨软骨组织工程支架,负载软骨细胞可修复兔膝关节骨软骨缺损,重建关节软骨的结构和功能。
- 卢华定曾春蔡道章吴刚王昆温小粤
- 关键词:胶原羟基磷灰石软骨细胞骨软骨缺损
- 壳聚糖微球介导人IL-1Ra与TGF-β1基因转染兔软骨细胞的研究被引量:1
- 2009年
- 目的探讨壳聚糖微球介导人IL-1Ra与TGF-β1基因转染兔软骨细胞。方法制备壳聚糖微球介导IL-1Ra质粒与TGF-β1质粒转染系统,检测其载药、体外释药、降解,转染体外培养的兔膝软骨细胞,荧光显微镜、荧光定量PCR、MTF检测。结果壳聚糖-IL-IRa DNA和壳聚糖-TGF-β1 DNA微球平均径粒(2.8±0.2)μm和(2.6±0.1)μm,包封率(88.3±4.1)%和(87.2±2.6)%;缓释分3个阶段。荧光显微镜观察、荧光定量PCR证实软骨细胞转染基因得到30d表达。MTY提示转染促进软骨细胞增殖。结论壳聚糖微球介导IL-1Ra与TGF-β1基因转染软骨细胞可获得较长期目的基因表达,可促进软骨细胞增殖,为用于基因治疗软骨退变和促进软骨修复提供基础。
- 温小粤蔡道章卢华定曾春刘斌
- 关键词:壳聚糖微球转化生长因子Β基因转染软骨
- 经关节镜半月板部分切除治疗半月板无血管区损伤被引量:9
- 2004年
- 目的 分析关节镜下半月板部分切除治疗半月板无血管区损伤的手术疗效 ,提出较适宜的手术时机。方法 随访 2 76例 (侧 )半月板无血管区损伤关节镜下部分切除的患者 ,从手术时间、镜下部分切除术后疗效进行分析、比较。结果 半月板损伤后 15d~ 2个月组行半月板部分切除术后优良率达 79% ;2~ 4年组治疗术后优良率为 5 7 2 %。结论 半月板损伤应早期诊断、早期治疗 ;早期关节镜下部分切除无血管区损伤半月板的疗效明显优于晚期手术治疗。
- 王其友蔡道章徐义春卢华定
- 关键词:半月板损伤关节镜检查内窥镜