- 脂质体干扰素对恶性肿瘤切除术后抑制肺转移的研究
- 1994年
- 恶性肿瘤术后发生远处器官转移是造成肿瘤治疗失败的主要原因。本实验用脂质体干扰素治疗已切除了恶性原发灶的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，结果用脂质体干扰素的治疗组其生存期较对照组有明显延长（Ｐ＜０．０１）；肺部转移灶比对照组显著减少（Ｐ＜０．０１）。提示脂质体作为一种理想的载体包裹干扰素后能通过激活巨噬细胞的途径，有效的防止恶性肿瘤术后肺转移延长生存期，这为临床应用抑制肿瘤转移探索了一条新途径。
- 尤庆生陈荫椿石仲歧刘运义陈刚
- 关键词：肿瘤转移脂质体干扰素肺肿瘤
- Heymann肾炎致病原受体相关蛋白cDNA分子克隆及其mRNA在肾小球上皮细胞的表达被引量：4
- 1994年
- Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎是一种用于人类膜性肾病的自身免疫病模型。ｇｐ３３０糖蛋白和４４ｋＤ受体相关蛋白（ＲＡＰ组成Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎抗原复合物（ＨＮＡＣ），被证明是ＨＮ的主要致病原。本研究中，我们用ＲＴ－ＰＣＲ技术，克隆了ＲＡＰ基因，用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ技术克隆了ＲＡＰ羧基端１１８个氨基酸的基因，ＤＮＡ序列分析克隆基因与ＲＡＰ相同，原位杂交发现ＲＡＰｍＲＮＡ在肾小球上皮细胞表达。
- 张卫苏朱爱平刘运义
- 关键词：肾炎受体相关蛋白
- 逆转录病毒介导的人促红细胞生成素基因在淋巴细胞中的表达被引量：1
- 1997年
- 本实验设计和构建了人促红细胞生成素（Epo）重组逆转录病毒载体（LXSN-Epo）,载体中小鼠白血病病毒长末端调控序列翻译调控人Epo基因的表达。通过重组逆转录病毒,将Epo基因转导到大鼠T和B淋巴细胞中,DNA-PCR分析证明带有人Epo基因的逆转录病毒已整合到T和B淋巴细胞基因中,RT-PCR分析显示了在两种细胞中均表达了 Epo mRNA。体外生物学活性测定显示,在转导的T淋巴细胞培养上清中Epo表达水平高达243mU/ml,在感染的B淋巴细胞培养上清中Epo活性达43mU/ml。在感染的B细胞中,Epo表达在mRNA和蛋白水平均证明了逆转录病毒能有效地和迅速地转导Epo基因到新培养的B细胞中,而不需要药物选择。这些研究开始了逆转录病毒介导的基因转移走向体内Epo基因治疗研究的过程。
- 张卫苏顾星星刘运义顾晓松朱爱平蒋季杰
- 关键词：促红细胞生成素基因转移逆转录病毒
- Heymann肾炎致病原受体相关蛋白羧基端多肽表达的研究被引量：2
- 1996年
- 本研究中，用ＰＣＲ方法扩增了受体相关蛋白基因第６３３～９５７碱基ｃＤＮＡ片段。将编码成熟分子量为４４×１０３受体相关蛋白和羧基端１０８氨基酸多肽的ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１内，限制性图谱分析测定了插入子的方向并用ＤＮＡ序列分析加以证实。带有质粒ｐＧＥＸ－Ｒ９３（包含完全ＲＡＰｃＤＮＡ９５７碱基）的重组菌过度表达了分子量为６５×１０３融合蛋白，其含量占总蛋白的３９．４％。带有质粒ｐＧＥＸ－Ｒ３５（包含ＲＡＰｃＤＮＡ３２４碱基）表达了４０×１０３的融合蛋白，蛋白含量３２．２％。通过谷胱甘肽亲和层析柱，从细菌溶解物中纯化了融合蛋白，每升培养物能纯化到１０～２０ｍｇ的蛋白，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证明抗Ｒ９３和抗Ｒ３５两种抗血清特异性结合到大鼠肾皮质微绒毛提取物中的４０×１０３的带。间接免疫荧光显示抗Ｒ９３和抗Ｒ３５两种抗体标记肾近曲小管刷状缘抗原。文中对表达的受体相关蛋白的意义和其抗原性进行了讨论。
- 张卫苏达展云朱爱平胡迎青蒋季杰夏志银刘运义
- 关键词：肾炎受体相关蛋白聚合酶链反应
- Heymann肾炎自身单克隆抗体C_（3－6）制备和特征被引量：1
- 1996年
- 为了进一步研究Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）的病理损伤机制，发展有效的治疗手段。方法应用大鼠肾小管刷状缘抗原ＦＸＩＡ免疫近交系Ｌｅｗｉｓ大鼠，诱导了主动型ＨＮ模型。并用该ＨＮ大鼠的淋巴细胞与小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，建立异种大鼠／小鼠之间的杂交瘤细胞株，产生了大鼠抗致病原Ｃ３－６自身单克隆抗体（ＭｃＡｂ）。结果ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ显示，ＭｃＡｂＣ３－６识别分子量为３３００００的刷状缘抗原。ＭｃＡｂＣ３－６诱导的被动型ＨＮ大鼠免疫组化和免疫电镜表明该ＭｃＡｂＣ３－６在体内识别肾小球基底膜上皮足突表面抗原，并与之结合形成免疫沉积，其识别的抗原分布与文献报导ｇｐ３３０抗原分布相似。结论证明ＭｃＡｂＣ３－６是针对致病原ｇｐ３３０的自身ＭｃＡｂ。
- 朱爱平张卫苏蒋季杰刘运义钱桐荪
- 关键词：肾炎HEYMANN肾炎单克隆抗体致病原
- RT-PCR法检测肝炎患者血清中庚型肝炎病毒核酸
- 1997年
- 为了对庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的进一步研究提供基础，设计了针对ＨＧＶ基因组５’－ＮＣＲ区的引物，建立了ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＧＶ核酸的方法。通过对１１６例肝炎患者血清中ＨＧＶ－ＲＮＡ检测，分别在乙肝、丙肝患者血清中各检出２例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性，阳性率分别为４．７％和８．７％。甲肝患者血清中未检出ＨＧＶ－ＲＮＡ。
- 程纯钱绩虎胡迎青胡迎青刘运义
- 关键词：庚型肝炎病毒核酸逆转录聚合酶链反应
- Ⅰ型嗜肺军团菌杂交瘤细胞株的建立和鉴定
- 1989年
- 用Ⅰ型嗜肺军团菌(Ⅰ型LDB)颗粒生抗原免疫的BALB／C小鼠脾细胞与小鼠骨髓癌SP2／0细胞在PEG怍用下融合，经二次克隆化后建立了一株分泌抗Ⅰ型LDB单克隆抗体的细胞株(No．19 McAb)。经ELISA、间接血凝试验、双向琼脂扩散试验、结合力试验，染色体检查及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测，证实此杂交瘤所分泌的McAb属小鼠IgG类，对Ⅰ型LDB是特异的。No．19 McAb将有助于Ⅰ型LDB的检测及其亚型的分析与流行病学调查．
- 刘运义成能斌胡玉香张卫苏袁正宏荣慧文
- 关键词：嗜肺军团菌杂交瘤细胞株克隆化染色体检查脾细胞SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 逆转录酶病毒载体介导的人EPO基因在PA317细胞中的表达
- 1996年
- 本研究首先将人 EPO 基因构建到逆转录酶病毒载体 LXSN 中,经 DNA-磷酸钙共沉淀法,将重组载体转染到包装细胞 PA317中,转染的 PA317细胞在含 G418条件培养基中选择生长。通过 DNA-PCR 分析证明,重组逆转录酶病毒载体 LXSN-EPO 基因整合到 PA317细胞基因组 DNA 中。RT-PCR 和细胞原位杂交分析表明,EPO mRNA 在 PA317细胞中表达。转染 PA317细胞培养上清体外 EPO 生物活性测定显示,EPO 表达水平高达40 U/L,证明 EPO 基因在逆转录酶病毒载体的启动子控制下转录 EPO mRNA。我们的这一研究,为EPO 基因在靶细胞中表达的基因转移治疗肾性贫血提供了可能性。
- 朱爱平邵维斌张卫苏蒋季杰刘运义顾晓松
- 关键词：促红细胞生成素基因转移药理学肾性贫血
- Tamm-Horsfall糖蛋白单克隆抗体制备及其临床应用被引量：2
- 1991年
- 用0.58mol/L NaCl沉淀提取Tamm-Horsfall糖蛋白(THP)制备了三株抗THP单克隆抗体(McAb)。免疫印迹技术(Immunoblotting Technigue,IBT)证明这些McAb特异性地和94kD THP抗原结合,ELISA抑制试验表明三株McAb识别THP抗原的不同位点。用McAb双夹心ELISA法测定尿THP的含量,表明尿THP含量与血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)呈显著负相关(P<0.01),与内生肌酐清除率(Ccr)呈明显正相关(P<0.01),BUN、Scr、Ccr正常的各种肾病尿THP含量无明显异常(P<0.05)。测定尿THP含量可作为判断肾功能损害程度的良好指标。
- 张卫苏刘运义朱爱平钱桐荪
- 关键词：抗体制备免疫印迹技术内生肌酐清除率肾组织纤维化肾小管细胞
