刘纪文
- 作品数:10 被引量:62H指数:4
- 供职机构:大连理工大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金大连市科技计划项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学经济管理更多>>
- 胡桃楸提取液对肿瘤细胞细胞周期的影响被引量:3
- 2011年
- 目的考察胡桃楸提取液对Hela和K562细胞周期的影响。方法用流式细胞仪分析胡桃楸提取液对Hela、K562细胞细胞周期的影响。结果胡桃楸提取物体外作用于Hela细胞可引起细胞周期在S期的停滞,这种效果随药物浓度和作用时间的增加而增加,胡桃楸提取物体外作用于K562细胞,可引起细胞周期在G1期的停滞,随药物浓度的增加而增加。结论胡桃楸提取液对Hela细胞的生长抑制作用可能通过S期阻滞实现,对K562细胞抑制作用可能通过G1期阻滞实现。
- 文姝刘纪文包永明张红梅刘建辉姜波金礼吉栾雨石安利佳
- 关键词:肿瘤细胞细胞周期
- 盐角草甜菜碱合成相关基因的共表达提高转基因烟草的耐盐性被引量:5
- 2010年
- 植物在逆境下能合成甜菜碱,其中磷酸乙醇胺N-甲基转移酶(PEAMT)和胆碱单加氧酶(CMO)是甜菜碱合成过程中的关键酶。将盐角草SePEAMT基因、SeCMO基因以及烟草的核基质结合区序列(Mar)利用Cre/loxP重组系统构建到同一表达载体上,得到植物表达载体pYLTAC747N-Mar-SePEAMT-SeCMO-Mar。该载体用电击转化法转入农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化烟草,经PCR检测确定转基因植株。在含250mM NaCl的MS培养基上培养35天后,转基因植株生根而野生型植株不能生根;转基因烟草植株甜菜碱积累量显著高于野生型植株,约是野生型植株的5.6~7.7倍;转基因植株与野生型相比,相对电导率显著降低,叶绿素含量明显升高。以上结果表明共表达SePEAMT和SeCMO能有效提高烟草甜菜碱表达量从而提高烟草的耐盐性。
- 胡艳梅苏乔祖勇刘纪文
- 关键词:甜菜碱耐盐多基因表达载体
- 小鼠pcDNA3.1(+)-烯酰水合酶辅酶1真核表达质粒的构建及鉴定被引量:2
- 2011年
- 淋巴道转移是影响上皮来源恶性肿瘤患者预后的重要因素[1],澄清其转移机制意义重大.烯酰水合酶辅酶1(enoyl coenzyme A hydratase 1,ECH1)是一种具有烯酰辅酶水合酶活性的酶,该基因表达于细胞的过氧化物酶体,与多种肿瘤相关.
- 王梅唐建武宋波王波张军魏元怡张宇虹刘纪文
- 关键词:真核表达质粒合酶小鼠过氧化物酶体
- 百合无症病毒衣壳蛋白基因克隆和蛋白分析被引量:3
- 2012年
- 根据已报道的LSV CP基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,模板为感染LSV的百合叶片的总RNA,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出大小为876bp的LSV CP基因,经测序后,对该基因编码区全长序列及相应的氨基酸序列用生物信息学软件系统进行序列分析及结构功能预测.结果表明:该基因由876个核苷酸组成,编码291个氨基酸;与GeneBank公布的其他LSV分离物的基因序列同源性为93.4%~99.0%,氨基酸同源性为84.8%~99.5%;它含有一个卷曲螺旋结构和多个磷酸化位点,平均疏水值为-0.432;含有Carlaviruses完整的衣壳蛋白保守结构域,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主.
- 徐品三刘纪文高晓蓉尹雅蕾
- 关键词:百合无症病毒衣壳蛋白
- Gateway技术快速构建百合双价抗病毒RNAi表达载体被引量:6
- 2011年
- 为获得适合转化百合的双价RNAi表达载体,以感病百合叶片的总RNA为模板,分别扩增400bp左右的LSV和LMoVCP基因。通过重叠延伸PCR技术获得长约800bp的LSV-LMoV融合基因。利用Gateway技术,通过BP反应及LR反应将LSV-LMoV融合基因克隆到双元载体pH7GWIWG2(Ⅱ),成功构建了含2种病毒基因的RNAi表达载体pH7GWIWG2(Ⅱ)-LSV-LMoV。将构建好的双价表达载体导入农杆菌EHA105,PCR和测序表明所构建的载体及获得的工程菌与预期的完全一致。
- 徐品三白建芳刘纪文李焕改
- 关键词:百合无症病毒百合斑驳病毒RNAI载体重叠延伸PCRGATEWAY技术
- 胡桃楸提取液对肿瘤细胞增殖的抑制作用被引量:6
- 2011年
- 目的考察胡桃楸提取液对肿瘤细胞Hela、K562的抑制作用和相关机制。方法用MTT方法分析胡桃楸提取液对Hela、K562细胞增殖的影响。采用端粒酶PCR ELISA试剂盒分析胡桃楸提取液对Hela、K562细胞端粒酶的影响。结果 Hela细胞24、48和72 h的LD50分别为406.18μg/mL、319.48μg/mL和112.84μg/mL。K562细胞24 h LD50为154.50μg/mL。HLF细胞LD50为918.69μg/mL。胡桃楸提取液可抑制Hela细胞和K562细胞的端粒酶活性,而对HLF细胞端粒酶活性影响不大。结论胡桃楸提取液对Hela细胞、K562细胞有抑制作用,在低浓度下对HLF细胞杀伤不大。对肿瘤细胞抑制作用可能与抑制端粒酶活性相关。
- 文姝刘纪文包永明张红梅刘建辉姜波金礼吉安利佳
- 关键词:肿瘤细胞端粒酶
- 嗜热菌在纤维素乙醇中的研究进展及应用前景被引量:3
- 2010年
- 利用纤维素生产乙醇的研究中,传统的中温微生物在基质范围、酶活性及热稳定性等方面存在不足,难以满足工业需求.嗜热菌具有独特的降解纤维素、半纤维素和生产乙醇的耐高温酶系和代谢途径,不但热稳定性高、而且底物范围广泛,在生物质能学领域有重要的研究价值和应用潜力.综述了在纤维素乙醇研究中具有潜力的嗜热菌的种类、特性、代谢机理和研究进展,并对嗜热菌的应用前景进行了分析与展望.
- 蒋西然刘纪文李文利
- 关键词:嗜热菌纤维素乙醇
- 农杆菌介导菊花遗传转化效率的研究进展被引量:4
- 2011年
- 结合近年来菊花遗传转化的研究,从菊花再生体系建立和农杆菌介导的菊花遗传转化出发,讨论了影响菊花遗传转化效率的因素。诸多的菊花遗传转化研究表明,不同基因型的菊花转化受体、外植体类型、转化条件、激素添加是决定转化效率的关键因素。
- 张志玲徐品三刘纪文刘梅子
- 关键词:菊花农杆菌介导影响因素
- 百合不定芽培养脱毒种球生产的研究被引量:31
- 2003年
- 百合不定芽培养再生植株的病毒脱毒效果因百合品种和病毒种类而有所差异 ;‘卡萨布兰卡’百合潜在病毒 (LSV)容易脱去 ,脱毒率达 76% ,‘魅丽’黄瓜花叶病毒 (CMV)能全部脱去。‘卡萨布兰卡’不定芽培养在固体培养基和液体培养基都能很好形成子球 ;在含有抗病毒剂 ( 1 0mg/LDHT)的液体培养基中子球增大显著 ,LSV脱毒效果理想。无病毒子球移到有防虫网的户外栽培 ,2年后部分植株被检测出病毒 ,再感染率因品种而不同 ,‘卡萨布兰卡’高达 73 % ,麝香百合‘乔治亚’仅 1 7% ;无病毒植株‘乔治亚’ 。
- 徐品三栾雨时刘纪文新美芳二
- 关键词:百合抗病毒剂病毒检测