刘立岩 作品数:18 被引量:47 H指数:4 供职机构: 中国科学院长春应用化学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 中国科学院科研项目 更多>> 相关领域: 生物学 理学 医药卫生 化学工程 更多>>
具有甲状腺素脱碘酶活性的抗体酶的制备及性质研究 2002年 首次以具有适当疏水性的甲状腺素衍生物 O-methyl-T4为半抗原 ,用杂交瘤技术得到相应的抗体( 6 E8) ,又经过苯甲基磺酰氟和 Na HSe的化学修饰引入了催化基团硒代半胱氨酸 ,制备出具有较高甲状腺素脱碘酶活力的抗体酶 ( Se-6 E8) .用 SDS-PAGE电泳对 Se-6 E8的纯度进行了鉴定 ,同时研究了其解离常数、温度及 p H等酶学性质 .结果表明 ,Se-6 E8活力为 2 0 1 0 U /μmol protein,纯度达到电泳纯 ,催化反应的最适温度为 5 7℃ ,最适 p H为 8.2 . 孙立伟 刘立岩 赵大庆关键词:甲状腺素 抗体酶 酶活性 半抗原 杂交瘤技术 酶法大量合成^(13)C标记尿苷二磷酸葡萄糖 被引量:3 2004年 建立了一种经济、简便的一步酶法 ,大量合成尿苷二磷酸葡萄糖 (UDPG) .在酶法合成中 ,用UTP代替ATP ,并建立了UTP的再生系统 ;建立了反复补加法和酶回收法 ,使酶的利用率达到 85% .在 0 .5g规模上用该法合成UDP [4 13 C] 葡萄糖 ,总产率为 6 9.7% . 祁超 刘立岩关键词:酶法合成 抗meso—四(α,α,α,α—o—苯乙酰苯)卟啉的单克隆抗体制备 被引量:4 2000年 祁超 刘立岩 等关键词:单克隆抗体 稀土离子诱导钙调蛋白与单克隆抗体的分子识别 稀土离子具有和钙离子相近的离子半径和配位环境,研究表明,它们可以取代CaM中的钙离子而参与蛋白链的配位,并对CaM的构象产生微扰. 李伟国 刘立岩 倪嘉缵关键词:钙调蛋白 稀土离子 单克隆抗体 分子识别 文献传递 正常及肿瘤染色质的荧光寿命法、精确量热法和荧光能量转换 2003年 通过DNA染色剂 染色质配合过程的荧光寿命、精确量热和荧光能量转换的测定 ,研究了正常染色质 (NC)和肿瘤染色质 (TC)的结构。结果表明 ,NC中溴化乙锭插入DNA的成分比TC增加了 4 86 % ;溴化乙锭与TC中DNA的配合焓为 - 15 38kJ/mol,NC中DNA的配合焓为 - 13 2 5kJ/mol;TC中丹磺酰氯和吖啶橙之间的荧光能量转换效率比NC中的低 ,而平均供体 受体距离比NC的大 ,说明TC刚性结构较少、与溴化乙锭结合的可能性较大及基因活性较强。 祁超 赵剑非 李伟国 杜丽 刘立岩关键词:量热学 染色质 能量转换 荧光寿命 抗meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉抗体的酶学性质研究 被引量:1 2002年 利用小分子meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉作为全抗原免疫小鼠,通过细胞融合等技术制备了单克隆抗体(McAb)1F2,利用高效液相色谱(HPLC)、基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI/TOFMS)证明纯化得到的单抗是很纯的.McAb1F2的保留时间是2.63 min,亚型为IgG2a,相对分子量为156 678.8.McAb 1F2-卟啉复合物形成时,卟啉Soret带最大吸收峰从408nm红移到416nm,并有增色效应,说明McAb1F2-卟啉是刚性且紧密结合.抗体酶稳定性很高,但比活力只有4.687 5 U/mg,为天然酶HRP的1.899%.抗体酶的Km=20.29 mmol/L,kcat=396.82 min-1,kcat/Km=1.955 7×104L·mol-1·min-1. 丁兰 刘志强 刘立岩 赵大庆 祁超 丁天兵 丁天兵关键词:过氧化物酶 细胞融合 酶学性质 抗体酶 稀土离子对钙调蛋白与单克隆抗体分子识别的影响 被引量:2 2003年 分别采用酶联免疫吸附 (ELISA)法和荧光标记技术比较了 Ca2 +,La3 +,Eu3 +和 Yb3 +离子对钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3之间分子识别的影响 .结果表明 ,金属离子与钙调蛋白作用后会诱导其发生不同的构象变化 ,并进一步影响到钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3分子之间的结合强度 .当钙调蛋白分别与 La3 +,Eu3 +,Yb3 +作用后 ,它与单抗 2 C3分子之间的解离常数为 (2 6 .8± 2 .5 ) ,(2 1 .8± 3.4 )和 (6 4 .8± 5 .1 ) nmol/ L,而结合 Ca2 +前后的钙调蛋白与单抗分子的解离常数分别为 (1 77.2± 2 .8)和 (1 5 7± 4 .2 ) nmol/ L.这一结果表明 ,稀土离子诱导钙调蛋白发生的构象变化明显不同于钙离子的作用 ,这种差异可能是稀土与钙离子对钙调蛋白调控作用表现出差别的原因 . 李伟国 祁超 杜丽 刘立岩 赵大庆关键词:稀土离子 钙调蛋白 单克隆抗体 分子识别 酶联免疫吸附 人工模拟加卤酶Ⅰ.半抗原合成,表征和生物活性测定 被引量:9 2000年 rac-Tetra(m-nitrobenzene)porphyrin, H2TNO2PP, synthesized from o-nitro-benzaldehyde and pyrrole was reduced to H2TamPP, from which tetra(o-phenylacetyl benzene) porphyrin and especially its α,α,α,α-isomer were obtained. The α,α,α,α-isomer was used as hapten to immunize BALB/C mice. The latter gave antibody value of 320 as determined by ELISA method, indicating that the artificial hapten could induce the production of antibody without use of carrier. 祁超 丁兰 刘立岩 耿昊 张玉静 赵大庆 刘仔 倪嘉缵关键词:半抗原 卟啉衍生物 生物活性 具有生物活性的人带3蛋白胞质片段融合蛋白的克隆、表达与纯化 2003年 用 PCR法从质粒 p HB3中扩增了人红细胞带 3蛋白胞质片段 (CDB3 )基因 .PCR产物经限制性内切酶切割后与多克隆位点处带有编码 6个组氨酸序列的高效表达载体 p ET2 8b连接 ,构建为重组子p CDBHistag.重组子经酶切及序列测定后在大肠杆菌 BL2 1 (DE3 )中获得高效表达 ,可溶性目的蛋白占菌体总蛋白的 4 0 %左右 .C端带有 6个连续组氨酸的带 3蛋白胞质片段作为融合蛋白不仅可以降低宿主菌蛋白酶对其水解程度 ,而且简化了目的蛋白的纯化过程 .经一步螯合 Ni2 +的亲和层析获得了电泳纯的带 3蛋白胞质片段融合蛋白 .活性测定结果表明 ,带 3蛋白胞质片段融合蛋白能够抑制醛缩酶 (Aldolase)活性的70 % ,与文献报道的人红细胞内带 3蛋白胞质片段具有相同的功能 . 郑玉娟 邢菲菲 孙立伟 刘立岩 赵大庆 倪嘉缵关键词:融合蛋白 纯化 基因表达 基因克隆 圆二色谱和紫外可见光谱研究抗体-卟啉的相互作用 被引量:8 2002年 圆二色谱 (CD)和紫外可见光谱 (UV VIS)可用来研究单克隆抗体 (McAb) 卟啉之间的相互作用。卟啉形成McAb 卟啉复合物 ,在Soret带区域最大吸收峰有显著红移和增色现象。在 3 5 0~ 45 0nm区域 ,形成复合物时能检测诱导的CD光谱。CD光谱遵守朗伯 比尔定律 ,显示等吸收行为。McAb 卟啉复合物的紫外可见吸收及诱导的CD光谱在pH 6~ 1 1的范围内保持不变 ,说明复合物异常稳定 ,也说明McAb 卟啉结合位点之间疏水相互作用是主要因素。 祁超 李伟国 张玉静 刘立岩 赵大庆关键词:圆二色谱 紫外可见光谱 相互作用