刘海东 作品数:17 被引量:71 H指数:5 供职机构: 潍坊市公安局 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 国家自然科学基金 辽宁省教育厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 更多>>
藏族CYP17与CYP19基因多态性与身高的相关关系 被引量:5 2010年 目的:探讨西藏藏族人群CYP17与CYP19基因多态性与人体身高发育的关系。方法:收集长期居住西藏且体检健康的藏族人血液标本200例(男108例,女92例),并同时测量其身高,提取DNA,设计引物,通过RFLP-PCR法对CYP17基因多态性进行检测;对CYP19基因经PCR扩增,电泳并回收后进行直接测序。结果:CYP17基因MspAII酶切位点基因多态性与藏族男性身高发育有关;与女性身高发育无明显相关性。CYPl9基因多态性与男、女身高均无相关。结论:CYP17基因可能是影响藏族男性身高个体差异的基因之一,而CYP19基因对藏族人群身高影响不明显。 邢瑞仙 任甫 李隆广 刘海东 李革 方伯言 席焕久 温有锋 黄克强关键词:CYP17 CYP19 基因多态性 身高 藏族 L6细胞胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型 被引量:11 2009年 背景:在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少。目的:拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-05在辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室完成。材料:L6细胞株由中国协和医科大学细胞中心提供。α-MEM培养基为美国Gibco公司产品。方法:复苏后的L6细胞置于α-MEM培养基中诱导培养14d,以考马斯亮蓝染色观察肌管出现来确定L6成肌细胞株分化完成。将分化后的细胞建立胰岛素抵抗模型,按1×106/孔接种于24孔板内,用含体积分数为0.02胎牛血清的α-MEM培养,以L6细胞贴满24孔板的板底为宜。换液后,向各孔内分别加入含体积分数为0.02牛血清白蛋白的α-MEM无血清培养基饥饿培养5h。设立2组,实验组的板孔内加入含1×10-7mol/L胰岛素的HEPES缓冲液(136mmol/LNaCl,4.7mmol/LKCl,1.25mmol/LMgSO4,1.2mmol/LCaCl2,0.2%牛血清白蛋白,20mmol/LHEPES,pH7.4)孵育1h;对照组的板孔内加入不含胰岛素的HEPES缓冲液孵育1h。弃上清后用HBS缓冲液冲洗,每孔内分别加入含0.1mol/L葡萄糖的HBS缓冲液100μL,孵育10min后取出置于冰板上快速回收上清。主要观察指标:考马斯亮蓝染色观察L6细胞出现肌管结构情况,葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖浓度。结果:诱导前L6细胞未见肌性结构出现,诱导分化后L6细胞内出现肌管结构。使用α-MEM无血清培养基饥饿培养1,3h,两组上清中葡萄糖浓度基本相似(P>0.05);使用α-MEM无血清培养基饥饿培养5h后,实验组上清中葡萄糖浓度明显高于对照组(P<0.05)。结论:诱导分化成肌后的L6骨骼肌细胞经α-MEM无血清培养基饥饿培养5h,在胰岛素浓度为1×10-7mol/L的刺激下可形成胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。 杨亮 迟戈 张俊 王良君 刘丽娜 樊淼 刘海东 李伟伟 张健飞 杨菁 隋鸿锦关键词:胰岛素抵抗 辽宁满族15个短串联重复序列基因座遗传多态性 被引量:1 2010年 随着人类基因组研究的深入,人类已发现许多短串联重复序列(short tandem repeats,STR)属于微卫星DNA序列,STR基因座因其在人类基因组中分布广泛、片段小、易扩增、所需检材微量及其高度杂合性、高度多态性而广泛应用于构建人类遗传连锁图谱、基因定位、遗传病连锁分析、 徐国昌 朱艳 任甫 刘海东 席焕久 喻少波 郝春雨关键词:短串联重复序列 STR基因座 遗传多态性 人类基因组 联合偶合概率与似然比率在炭化骨骼个人识别中的计算及分析 被引量:1 2012年 目的探讨联合偶合概率(RMP)与似然比率(LR)在炭化骨骼个人识别中的计算方法及意义。方法常压下以300℃对两例成人股骨焚烧1h后,液氮下研磨得到骨粉,乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙,改良的酚-氯仿法提取DNA并纯化,5色荧光标记,PCR复合扩增,基因分析仪进行电泳,数据收集与分析。结果累积识别力(TDP,男):0.999 999 980 3,TDP(女):>0.999 999 999 999 99;RMP(男):2.322 5×10-12,RMP(女):4.931 3×10-24;LR(男):4.305 7×1011,LR(女):2.027 9×1023。结论 300℃炭化骨骼可提取到DNA,利用存留基因图谱比对及TDP、RMP、LR的计算可进行个人识别。 徐国昌 齐静 任甫 刘海东关键词:法医物证学 DNA检验 辽宁省汉族人群15个短联重复序列基因座的遗传多态性 被引量:3 2010年 目的:获得15个短串联重复序列(Short tandem repeat, STR)基因座在辽宁地区汉族人群的等位基因频率分布及群体遗传学数据.方法:调查15个STR(D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO、D3S1358、TH01、D13S317、D16S539、2S1338、D19S433、VWA、TPOX、D18S51、D5S818、FGA)在141名辽宁汉族人群中等位基因频率分布.提取基因组DNA,利用多重PCR和五色荧光(6FAM、VIC、NED、PET、LIZ)自动化检测技术,获得基因分型图,然后进行统计分析,获得15个STR基因座等位基因频率及群体遗传学指标.结果:15个STP在辽宁地区汉族人群中具有较高的遗传多态性,15个STR基因座分别检测到5~16种等位基因,共136个,频率分布在0.0035~0.5248之间,DP值在0.7896~0.9528之间,H值在0.6225~0.8534之间,PIC值在0.6140~0.8480之间,EPP值在0.4324~0.8281之间,累积个体鉴别力为0.99999999,累积非父排除率为0.99999999.结论:15个STR位点适合作为辽宁地区汉族人群的遗传标记,用于人类学、疾病连锁分析、法医学亲子鉴定和个体识别等领域的研究. 李克研 喻少波 郝春雨 刘海东 李宁 任甫 温有峰 席焕久关键词:短串联重复序列 多态性 汉族 肌肽对ECV304细胞缺氧损伤的保护作用 被引量:4 2009年 目的研究肌肽对缺氧所致人体内皮细胞系ECV304细胞损伤的影响。方法建立缺氧条件下ECV304细胞损伤模型,用MTT法观察肌肽对缺氧损伤的ECV304细胞活性的影响,测定细胞培养基中乳酸脱氨酶(LDH)活力,并对细胞骨架进行考马斯亮蓝R-250染色观测其细胞结构。结果浓度为10~20 mmol/L肌肽孵育ECV304细胞6 h后,可以抑制缺氧12 h和24 h引起的ECV304细胞活性下降,同时减少LDH的释放,保持细胞骨架完整。结论肌肽对缺氧所致的ECV304细胞伤具有保护作用。 白剑 张俊 迟戈 刘丽娜 樊淼 刘海东 李伟伟 杨菁关键词:肌肽 细胞骨架 ECV304细胞 缺氧 线粒体DNA多态性在人类学研究中的应用 被引量:3 2010年 背景:线粒体DNA具有多拷贝数、母系遗传、突变率高、极少发生重组等特性,在分子生态学、分子遗传学、法医学和人类学研究上都有重要的意义。目的:综合分析线粒体DNA研究方法的发展,探讨其在人类学研究方面的应用。方法:以mitochondrial DNA,polymorphism,haplogroup为检索词,检索Pubmed数据库(1999-01/2009-04)。文献检索语种限制为英文。纳入人类学相关的内容,排除动物实验。结果与结论:计算机初检得到235篇文献,33篇符合纳入标准。线粒体DNA具有多拷贝数、母系遗传、突变率高、极少发生重组等特性,通过分析变异及其分布范围与频率等信息,来推断不同人群体之间的关系以及重建群体事件。线粒体DNA变异信息的提取方法经历了低分辨率RFLP、高分辨率RFLP、测序和RFLP与高变区测序相结合的变迁。线粒体DNA多态性在推断不同人群亲缘关系、不同人群族源和不同人群迁移路线3个方面的应用具有极其重要的意义。世界范围内各个群体的线粒体DNA数据库不完整制约着其在人类学方面的应用。改进现有的数学统计模型并且建立、丰富全球范围内各个群体的线粒体DNA数据库是今后研究的主要方向。线粒体DNA在分子生态学、分子遗传学、法医学和人类学以及组织工程研究上都有重要的意义,特别是在研究人类起源和比较不同人群亲缘关系方面更具有重要的辅助作用。 裴林国 席焕久 刘海东关键词:线粒体DNA 多态性 细胞工程 烧骨个体识别的研究进展 被引量:5 2009年 烧骨DNA检测在火灾、焚尸、爆炸等事故中的个体识别和亲权鉴定方面,发挥着越来越重要的作用。STR作为重要的遗传标记系统,已广泛应用于法医学个体识别、亲权鉴定等领域。本文从焚烧温度及时间对烧骨STR分型的影响、烧骨STR基因座的选择和烧骨DNA的提取方法三个方面结合目前的研究进展进行了概述。 刘海东 任甫 邢瑞仙 裴林国关键词:法医遗传学 短串联重复序列 烧骨基因位点保存状况及检测方法比较 被引量:1 2009年 目的:探讨不同温度焚烧的股骨中基因位点的保存状况及其检测方法。方法:常压下以100℃~500℃对30例成人股骨进行焚烧,提取其存留DNA,用Identifiler试剂盒和Minifiler试剂盒进行荧光标记和复合扩增,ABI3130xl Genetic Analyzer软件对DNA基因位点进行检测和分析。结果:提取骨密质中的DNA可以获得正确分型,未烧和5个温度焚烧后基因位点存留不同,Mifiler试剂盒比Identifiler试剂盒更能从烧骨DNA中得到STR基因座分型结果。D21S11、FGA2个位点在2个试剂盒中的检出率差异无统计学意义。2个试剂盒中的FGA位点检出率都不高。结论:温度对骨DNA的保存有很大影响,检测焚烧程度高的骨骼DNA时用Minifiler试剂盒更容易得到基因分型结果。FGA位点不适合作为miniSTR位点用于检测烧骨等降解检材。 刘海东 李革 任甫 席焕久 徐国昌 邢瑞仙 喻少波 郝春雨关键词:DNA检验 短串联重复序列 2型糖尿病患者糖化血红蛋白和血脂检测及临床意义 被引量:18 2012年 目的检测2型糖尿病患者的糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FPG)、血脂水平并观察它们之间的关系及其临床意义。方法选择100例2型糖尿病患者进行HbAlc、FPG、TC、TG、LDL-C、HDL-C检测。糖化血红蛋白检测采用层析法;FPG检测采用葡萄糖氧化酶法;TC检测采用酶法(CHOD-PAP法);TG检测采用酶法(GHO-PAP法);低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)采用直接酶法。结果空腹血糖增高,糖化血红蛋白水平随之增高,二者呈显著正相关(P<0.01);甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)随血糖和糖化血红蛋白值的上升而数值增大,呈正相关(P<0.05);高密度脂蛋白(HDL)随血糖和糖化血红蛋白值的上升反而逐渐减小,呈负相关(P<0.05)。结论糖尿病患者的血脂和糖化血红蛋白增高程度与血糖的增高有关;联合检测HbAlc和血脂对糖尿病早期预防诊断及治疗有重要意义和价值。 王静 刘海东关键词:2型糖尿病 糖化血红蛋白 血脂