刘朝良
- 作品数:155 被引量:455H指数:12
- 供职机构:安徽农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 柞蚕卵巢移植于雄体后的发育及其卵黄原蛋白的吸收积累被引量:4
- 2000年
- 卵黄原蛋白 ( Vn)是昆虫卵中主要的蛋白质。正常的柞蚕卵里 ,卵黄原蛋白 ( Vn)占卵全蛋白的70 %以上 ,把柞蚕的卵巢移植于雄体 ,不仅能发育 ,而且能形成卵 ,在此把该卵称之为柞蚕雄卵。 SDS— PAGE和免疫印迹分析的结果表明 ,卵黄原蛋白在柞蚕雄卵里也有一定的积累。并确认该卵黄原蛋白来自于雄体柞蚕液里的卵黄原蛋白前驱体。由于雄体柞蚕液含有的卵黄原蛋白前驱体的量少 (卵全蛋白的 2 .2 %,刘朝良等未发表 ) ,每个移植体只能形成 2~ 3粒成熟卵。卵巢的移植成功率以幼虫
- 刘朝良木尾浦善太中垣雅雄武井隆三
- 关键词:柞蚕卵巢卵黄原蛋白
- 家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株、其中性蛋白酶基因和原核表达载体及制备方法
- 本发明家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株、其中性蛋白酶基因和原核表达载体及制备方法,属于基因工程技术领域。所述家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株是对家蚕肠道内菌体进行富集培养,用NA酪蛋白筛选培养基进行筛选获得的。同时通过基因工程技...
- 刘朝良王在贵杨文静朱保建魏国清李大辉刘金阳
- 文献传递
- 家蚕肠液蛋白酶消化生理参数的研究
- 2014年
- 家蚕肠液蛋白酶对家蚕消化吸收蛋白质及其生长发育有着十分重要的作用。为探明影响家蚕肠道蛋白酶活力的因素,从家蚕肠道内容物中分离出蛋白酶酶液,在不同温度、pH及金属离子处理条件下,用福林-酚法测定酶活力变化情况,确定家蚕肠液蛋白酶的最适作用条件,同时研究了家蚕中肠蛋白酶活力随龄期增长的变化规律。结果表明,在35℃、pH10.0左右条件下蛋白酶活力最大,低浓度Mn2+、Fe2+、Cu2+对酶活有抑制作用,高浓度Ca2+对酶有抑制作用,Mg2+浓度对酶活物影响不明显,家蚕中肠蛋白酶活力随龄期增长而增强。
- 程佳刘朝良王在贵张宏福杨文静韩薇程昌粟项菲菲
- 关键词:家蚕肠道内容物蛋白酶活性
- Folin-ciocalteu比色法测桑叶中多酚含量被引量:21
- 2012年
- 采用以没食子酸为标准,研究了Folin-ciocalteu比色法测定桑叶中多酚含量的适宜条件。结果表明,桑叶提取液在Folin-ciocalteu试剂2.0 mL、20%Na2CO3溶液5.0 mL、反应温度30℃、反应时间2 h的条件下,测定其760 nm处的吸光值,多酚浓度在10.0~100.0 mg/L范围内与吸光值呈良好的线性关系;稳定性、精密度、重现性和回收率实验的相对标准偏差为0.2969%~2.502%。该法是一种简便、快速、准确测定桑叶多酚含量的可靠方法。
- 张军李江遐陆翠珍宛晓春刘朝良
- 关键词:桑叶多酚
- 柞蚕真菌蛋白酶抑制剂基因CP8的克隆与表达分析被引量:1
- 2015年
- 蛋白酶抑制剂在昆虫免疫中发挥着重要的作用。首次克隆获得了一个柞蚕真菌蛋白酶抑制剂基因ApCP8的开放阅读框(ORF)序列。该基因的ORF序列全长318 bp,编码了一个由106个氨基酸组成的蛋白(包括19个氨基酸的信号肽)。预测蛋白的等电点和分子量大小分别为9.05和11.3 kD。序列分析和进化树构建结果表明,ApCP8与已知的几种昆虫相应蛋白具有很高的同源性,且与印度柞蚕的CP8聚在同一进化分支上。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果表明,ApCP8主要在柞蚕脂肪体中高表达;且ApCP8在被白僵菌诱导的初期高表达,推测其可能参与了柞蚕抗真菌的免疫反应。同时,利用pET-32a(+)载体对ApCP8进行了原核表达,并对重组表达蛋白进行了纯化和抗体制备。本研究将为进一步探索ApCP8的抗真菌功能奠定前期基础。
- 钱岑王芳李胜刘朝良
- 关键词:柞蚕克隆原核表达RT-QPCR
- 白僵蚕高效毛细管电泳指纹图谱研究被引量:9
- 2007年
- 【研究目的】采用高效毛细管电泳法(HPCE)建立白僵蚕的指纹图谱。【方法】:电解质溶液由以10mmol/L磷酸二氢钠-20mmol/L的硼砂溶液(pH8.62)作缓冲液,在25℃,20kV的压力下进行电泳,201nm波长处检测,线性关系良好,在25min内完全分离。【结果】:上述条件下,白僵蚕成分得到了较好的分离,方法学考察结果符合定量测定和定性研究的要求。【结论】:该方法具有较好的分离效果和良好的精密度,可考虑作为白僵蚕的质量控制方法。
- 张军穆莉刘朝良陆翠珍
- 关键词:白僵蚕高效毛细管电泳指纹图谱
- 柞蚕脂肪酶相关蛋白的表达模式和活性分析
- 脂肪酶是自然界中无处不在的酶,在脂肪代谢中催化三酰甘油水解成游离脂肪酸和甘油的过程中有重要作用。本实验研究了柞蚕脂肪酶相关蛋白(Lipase-related protein,ApLSP)在柞蚕体内的表达模式和体外的酶活活...
- 王磊邱建烽钱岑朱保建刘朝良
- 关键词:柞蚕
- 文献传递
- 家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂15抑制酚氧化酶原及抗菌肽的表达
- 丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)在调节蛋白酶生物学功能上具有重要作用,本研究探讨了家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂15的功能。将Bmserpin-15在大肠杆菌中进行原核表达、纯化、并制备了相应的多克隆抗体。另外采用荧光定量PC...
- 刘栋然王磊杨柳钱岑魏国清戴立上李俊朱保建刘朝良
- 关键词:家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂免疫酚氧化酶抗菌肽
- 文献传递
- 柞蚕Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂ApKTSPI基因克隆及表达特征分析
- 本研究旨在克隆柞蚕Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂(ApKTSPI)基因的cDNA序列并进行序列分析,研究ApKTSPI基因的组织表达分布及病原物免疫刺激后的表达模式,原核表达ApKTSPI。利用RACE-PCR方法扩增柞...
- 王磊邱建烽钱岑朱保建刘朝良
- 关键词:柞蚕KAZAL基因克隆
- 文献传递
- 桑类药材拟糖类化合物的生物活性及研究进展
- 桑叶中生物碱类化合物是糖环上的氧原子被氮原子取代的一系列多羟基生物碱,为高效的糖苷酶抑制剂,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤等药理作用。桑叶富含生物碱类化合物,通过研究桑叶生物碱类化合物的生物活性及其作用机理,可为桑叶药用水平...
- 张军刘朝良
- 关键词:桑叶活性
- 文献传递