- 人端粒酶逆转录酶-双自杀基因对肝癌的靶向杀伤作用被引量：1
- 2009年
- 目前联合基因治疗最常用的是有单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV—TK）和大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（CD）。同时，肿瘤的基因治疗要求导入的自杀基因表达严格限制于靶细胞（肿瘤细胞），而对正常细胞的生长无影响，因此寻找肿瘤细胞的靶点成为亟待解决的现实问题。端粒酶是维持端粒长度的一种逆转录酶，对细胞增殖、衰老及永生化和癌变超重要作用。
- 刘京龙邓志华杨长青刘燕贾静郭素雅杨强撖绍锦李倩倩郎伟宁
- 关键词：人端粒酶逆转录酶双自杀基因靶向杀伤作用单纯疱疹病毒胸苷激酶联合基因治疗肝癌
- 去唾液酸糖蛋白-人端粒酶逆转录酶-胸苷激酶／丙氧鸟苷的靶向促HepG2细胞凋亡作用及旁观者效应被引量：2
- 2008年
- 目的观察去唾液酸糖蛋白（AF）-pGL3-人端粒酶逆转录酶（hTERT）-胸苷激酶（TK）对肝癌细胞株HepG2细胞生长及凋亡的影响。方法培养细胞并构建pGL3-hTERT-TK质粒、AF脂质体复合物后，转染HepG2细胞和L02细胞，通过单光子液闪计数仪，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法和流式细胞仪观察自杀基因对肝癌细胞生长和凋亡的影响，以及其对自杀基因的旁观者效应。结果在肝癌细胞HepG2中，TK基因可以被hTERT启动子驱动高效的表达，而不影响正常肝细胞L02的生长，AF通过识别去唾液酸糖蛋白受体结合到HepG2细胞表面，其携带的TK基因更易进入肝癌细胞，同时增强自杀基因TK的高效表达，在旁观者效应机制的参与下，肝癌细胞总的凋亡率达85％±3％，而正常肝细胞则仅为16％±2％。结论AF-pGL3-hTERT-TK可以靶向攻击肝痛细胞．对正常肝细胞几平无影响．其皋因传递系统具备靶向治疗肝痛的潜力。
- 杨长青邓志华刘燕刘京龙曹燕
- 关键词：旁观者效应自杀基因
- Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统对肝癌腹水抑制效应的实验研究
- 2010年
- 目的:探讨由人端粒酶逆转录酶启动子驱动单纯疱疹病毒胸腺激酶基因的重组腺病毒,联合更昔洛韦(GCV)对肝细胞癌腹水生成的影响。方法:将H22细胞注入小鼠腹腔建立肝癌腹水瘤模型,并通过观察各组小鼠体质量、腹围、腹水量、生存时间、脏器及细胞凋亡率等指标的差异,揭示Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统对肝癌腹水的治疗作用。结果:经过Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV治疗的小鼠,显示出明显的腹水抑制作用,其腹水量显著低于各对照组(P<0.01),生存时间延长(P<0.01),细胞凋亡率提高(P<0.01),并且无明显毒副反应。而单独使用Ad-hTERTp-HSV-TK和GCV对腹水生成无明显作用。结论:Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统对肝癌细胞有较强的靶向杀伤作用,治疗肝癌腹水效果显著,对其临床应用具有理论意义。
- 杨强邓志华刘燕贾静郭素雅刘京龙
- 关键词：胸苷激酶腺病毒科基因疗法腹水
- 芬太尼透皮贴联合复方苦参注射液治疗中、重度癌痛临床观察被引量：8
- 2010年
- 目的:观察芬太尼透皮贴(多瑞吉durogesic)联合复方苦参注射液治疗中、重度癌痛的近期疗效、不良反应以及抗肿瘤机制的探讨。方法:96例癌痛患者随机分成治疗组(50例)和对照组(46例),分别给予芬太尼透皮贴联合复方苦参注射液治疗和单用芬太尼透皮贴治疗。结果:治疗组癌痛显效36例,有效10例,总有效率92.00%;对照组癌痛显效20例,有效14例,总有效率73.91%。两组间显效率有显著性差异(P<0.05)结论:芬太尼透皮贴联合复方苦参注射液治疗对中、重度疼痛晚期癌症患者疗效显著,复方苦参注射液将作为端粒酶抑制剂成为广谱低毒的新型抗癌药物。
- 刘京龙张瑾罗珊
- 关键词：芬太尼透皮贴复方苦参注射液癌痛端粒酶
- Ad-hTERTp-单纯疱疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷系统联合奥沙利铂对人类肝癌细胞的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究腺病毒介导的Ad—hTERTp一单纯疱疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷（Ad-hTERTp—HSV—TK／GCV）自杀基因系统联合奥沙利铂对人类肝癌细胞HepG2的体外杀伤作用。方法将带有hTERT启动子驱动HSV—TK基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-hTERTp-HSV-TK作为载体。感染复数（MOI）为100转染HepG2细胞，观察不同浓度的Ad-hTERTp—HSV-TK／GCV、奥沙利铂及二者联合对HepG2细胞生长的影响。用锥虫蓝活细胞拒染法、四甲基偶氮唑盐比色（MTF）法检测各干预组肝癌细胞生长的抑制率。结果3组HepG2细胞的生长均不同程度被抑制，且随药物浓度的增加抑制作用显著增强。Ad—hTERTp—HSV。TK／GCV联合奥沙利铂组抑制率最高（86．63％），与Ad—hTERTp—HSV．TK／GCV组抑制率（72．12％）及奥沙利铂组抑制率（59．41％）相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论Ad—hTRTq：Tp—HSV—TK／GCV联合奥沙利铂可显著增强对HepG2细胞的杀伤作用，增加靶向性的同时可以降低药物浓度，对临床用药有指导意义。
- 刘京龙邓志华郭素雅张瑾
- 关键词：肝肿瘤基因疗法药物疗法
- 重组腺病毒Ad-hTERTp-HSV-TK／GCV系统对小鼠肝癌腹腔种植腹腔积液生成的影响
- 2010年
- 目的研究重组腺病毒Ad—hTERTp—HSV，TK／GCV系统对小鼠肝癌腹腔种植腹腔积液生成的影响及其作用机制。方法SX，近交系小鼠腹腔内接种肝癌H22细胞株后，随机分为四组，48h后分别给予相应的治疗。观察各组小鼠腹腔积液及生存时间的变化；流式细胞术测定肿瘤细胞凋亡百分率；透射电镜观察腹腔内肿瘤细胞的形态学变化。结果与Ad-hTERTp—HSV-TK组、GCV组和空白对照组三组相比，Ad—hTERTp—HSV—TK／GCV组可以显著抑制小鼠腹腔积液的生成（P〈0．01），延长生存期（P〈0．01），肿瘤细胞凋亡率为（27．12±2．12）％明显高于其他各组（P〈0．01），并且在治疗期间未发现明显不良反应。结论Ad—hTERTp—HSV—TK／GCV系统可通过诱导肝癌细胞凋亡而抑制小鼠腹腔积液生成，并延长生存期，是一种安全可行的治疗方法。
- 杨强邓志华刘燕贾静郭素雅刘京龙
- 关键词：胸苷激酶腹腔积液
- 巨细胞病毒感染的难治性溃疡性结肠炎优化治疗方案被引量：5
- 2019年
- 溃疡性结肠炎(UC)是一种病因尚不十分清楚的结肠和直肠慢性非特异性炎症性疾病,病变主要局限于结肠黏膜及黏膜下层[1],好发于乙状结肠和直肠,病变广泛者,可累及整个结肠,病程较长,常反复发作.关于UC的治疗,大多数轻度UC患者可通过传统药物治疗(美沙拉嗪、柳氮磺胺吡啶),中重度UC患者可通过静脉或口服激素,使症状得以缓解或控制,近年来,随着工业化,饮食结构及环境的改变,UC的发病率逐年升高,出现对常规治疗反应差或者无反应的患者,即难治性溃疡性结肠炎(RUC),对于这类患者则需应用多种免疫抑制剂、生物制剂等药物治疗或者借助于干细胞移植、白细胞吸附、手术等非药物治疗[2].但是,到目前为止,关于RUC的诊断标准还未达成共识,激素抵抗和激素依赖是定义RUC的两个主要的要素,所以如何处理好激素抵抗及激素依赖,已经成为能否有效控制难治性溃疡的关键.
- 刘京龙席静静
- 关键词：难治性溃疡性结肠炎巨细胞病毒感染慢性非特异性柳氮磺胺吡啶激素依赖
- pcDNA3.1(+)/hTERT-tk真核表达质粒的构建及其在HepG-2细胞中的表达
- 2009年
- 目的:研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的人单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HSV-tk/GCV)系统对肝癌HepG-2细胞的体外杀伤作用。方法:构建hTERT基因启动子调控的tk基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/hTERT-tk,用脂质体法分别转染肝癌细胞(HepG-2)和正常肝细胞(L-02)后给予更昔洛韦(GCV),用TUNEL法观察自杀基因对肝癌细胞生长的影响。结果:HETRT启动子调控下的HSV-tk/GCV系统对肝癌HepG-2细胞有明显的杀伤作用,而对正常肝细胞则作用不明显。结论:hTERT-tk/GCV基因体系能够靶向杀伤肝癌细胞,有靶向治疗肝癌的潜力。
- 刘京龙邓志华杨长青刘燕
- 关键词：靶向基因治疗自杀基因
- 重组腺病毒Ad—hTERTp—HSV—TK载体的构建及抗肝癌实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的构建hTERT启动子调控的HSV—TK基因重组腺病毒载体系统，观察Ad—hTERTp—HSV-TK／GCV自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用。方法将穿梭质粒pSU-Tp-TK与腺病毒骨架质粒pBHGE3共转导至HEK293细胞，利用细胞内同源重组法构建出hTERT启动子调控的携带TK基因的复制缺陷型腺病毒Ad—hTERTp—HSV—TK载体系统；将不同感染复数（MOI=1、10、100、1000）的重组腺病毒Ad—hTERTp—HSV—TK感染肝癌细胞HepG2及正常肝细胞L-02，加入不同浓度的GCV（0、1、10、100、1000ug／ml），MTT、法检测细胞活性。结果HEK293细胞出现病毒空斑，提取病毒DNA，经PCR鉴定正确后扩增、纯化，滴度为1．5×10^10pfu／ml；MTT法检测到Ad—hTERTp—HSV-TK／GCV能靶向杀死肝癌细胞HepG2，且细胞存活率随着病毒滴度和GCV浓度的增加而降低。结论该实验构建的Ad—hTERTp—HSV—TK载体系统，可靶向抑制肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L-02几乎无影响。
- 刘燕邓志华杨长青刘京龙贾静郭素雅杨强
- 关键词：HTERT启动子胸苷激酶
- 心理干预配合药物治疗对轻中度溃疡性结肠炎的疗效分析被引量：4
- 2018年
- 溃疡性结肠炎（UC）发病率逐年升高^（[1]）,其病程迁延,常反复发作,可出现危及生命的严重并发症,影响患者的生活、生存质量。它的发生和发展是易感基因、环境与免疫系统相互作用的结果,环境因素中,精神心理异常能够改变疾病的病程能在临床观察到,而且也被结肠炎动物模型及神经反应模型结果所证实^（[2]）,同时,疾病活动度的加重被认为同持续的而非短暂的精神心理异常有关。因此,更多学者倾向于精神异常参与了UC的发生与发展。
- 刘京龙郭晓峰席静静
- 关键词：溃疡性结肠炎疗效分析药物治疗心理干预轻中度精神心理异常
