目的系统地评价血清西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为在人群和宿主动物中进行WNV感染血清流行病学调查提供技术支持。方法利用构建的包膜蛋白重组质粒(pQE-30)表达纯化西尼罗病毒包膜蛋白,以此为抗原进行ELISA检测。在对抗原包被量、酶标抗体浓度、血清稀释度进行优化的基础上,对本方法的灵敏度和特异度进行评价。结果确定最适抗原包被量为0.034μg,酶标抗体工作浓度和血清稀释度分别为1∶4 800和1∶80;批内变异和批间变异分别为6.7%和22.6%;对小鼠WNV抗体阳性血清53份、JEV抗体阳性血清48份和阴性对照血清94份进行检测,灵敏度为86.8%,特异度分别为93.8%和92.6%。结论本研究建立的ELISA方法灵敏、检测抗体特异,结果可重复,是一种有价值的血清学调查方法。
