何似
- 作品数:71 被引量:289H指数:9
- 供职机构:福建省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:福建省卫生厅青年科研基金福建省重大科技项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学哲学宗教更多>>
- 弓形虫抗原成分的分析被引量:2
- 1997年
- 本研究对3株不同宿主分离的弓形虫抗原成分进行分析。通过制备兔免疫血清及使用免疫印迹技术,证实这些虫株具有免疫反应性的蛋白抗原至少有11种,其中分子量为32000道尔顿的P32蛋白具有很强的免疫原性,在弓形虫早晚期免疫血清中也均能检出P32抗体,确认P32蛋白的生物学功能高度保守,与其它研究报道一致,可以利用P32蛋白进行弓形虫病特异诊断试剂盒的研制。
- 严延生何似翁育伟杨婷婷于恩庶
- 关键词:弓形虫抗原分析免疫印迹
- 不同型别登革病毒融合外膜基因重组腺病毒的构建及表达
- 2008年
- 目的构建登革病毒1型和2型外膜蛋白(E蛋白)DⅢ区融合基因的重组腺病毒,在BHK-21细胞中表达。方法用PCR法扩增登革病毒1型和2型EDⅢ基因,依次克隆入pCDNA3.1(+),构建重组质粒pCDNA-D1/D2EDⅢ。以此为模板,扩增包含CMV启动子-D1/D2EDⅢ-BGHpA的表达片段,与pENTR4载体连接形成质粒pENTR4-D1/D2EDⅢ,与pAd/PL-DEST进行体外同源重组,形成重组腺病毒载体pAd-D1/D2EDⅢ,在293A细胞系中包装成具有感染性的重组腺病毒,进一步感染BHK-21细胞,用间接免疫荧光法和Westernblot法检测重组蛋白在细胞中的表达情况。结果重组腺病毒构建成功,转染293A细胞后获得2×109pfu/mL滴度的重组腺病毒,感染哺乳动物细胞后能够表达1型和2型EDⅢ区目的蛋白。结论不同型别融合基因的重组腺病毒表达载体能有效地表达相应型别的目的蛋白,为进一步构建单一的四价重组腺病毒应用于登革疫苗研究奠定基础。
- 张志珊严延生翁育伟何似
- 关键词:登革病毒外膜蛋白腺病毒载体
- 温度对白纹伊蚊传播登革2型病毒易感性影响的研究被引量:4
- 2012年
- 目的研究不同温度下白纹伊蚊对登革病毒的易感性差异。方法登革2型病毒人工经口感染白纹伊蚊,冻麻挑出吸饱血的雌蚊放入新的蚊笼,分别置于18%、21℃、26℃、31℃、33℃和36℃的人工气候箱中饲养,经外潜伏期后,解剖蚊虫,间接免疫荧光法分别检测蚊虫的头部、唾液腺和胸腹部内的登革2型病毒抗原,并计算蚊虫的播散感染率。结果18℃白纹伊蚊感染率最低,胸腹部感染率为8%,头部和唾液腺未检出。31℃胸腹部感染率最高为82%,头部和唾液腺感染率33℃时最高。36℃各部位感染率均较33℃下降。18℃的播散感染率最低为0,36℃播散感染率最高,达到了100%。结论白纹伊蚊感染率随温度的升高,呈现先升后降趋势。18%可能是白纹伊蚊传播登革病毒的最低温度。播散感染率随温度的升高逐渐升高。
- 肖方震张仪何似施文琦谢汉国邓艳琴周晓农严延生
- 关键词:伊蚊属登革热病毒温度
- 肾综合征出血热抗体快速诊断试剂盒的应用研究被引量:3
- 2009年
- [目的]评估所研制的肾综合征出血热(HFRS)抗体快速诊断试剂盒在临床诊断和血清流行病学调查中应用的可行性。[方法]在6个不同疫区省份应用HFRS快速诊断试剂盒(胶体金法)检测患者血清中IgM和IgG抗体。在福建省抽选有代表性的18个县市作为调查地区,用双抗原夹心ELISA法检测鼠血清中抗汉坦病毒(HV)抗体,分析鼠间HFRS流行情况。[结果]此试剂盒可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体,已通过国内6省的临床应用评价。以间接免疫荧光试验(IFA)及ELISA为参照标准,其敏感性为98.1%,特异性为97.9%,总符合率为98.0%;福建省HFRS疫区主要以家鼠型为主,主要分布在闽北及东南沿海地区。[结论]HFRS抗体快速诊断试剂盒提供了早期快速检测的新方法,已成为商品化并向全国推广。双抗原夹心法ELISA可用于监测鼠间带病毒状况和人间疫情动态,为控制HFRS的流行提供依据。
- 吴守丽严延生颜苹苹李世清王灵岚何似
- 关键词:汉坦病毒金标免疫层析法血清流行病学调查
- 恙虫病东方体sta56部分基因的克隆和表达被引量:3
- 2001年
- 目的 构建恙虫病东方体sta5 6基因的重组表达质粒 ,并在E .coli中表达Sta5 6重组抗原。方法 从恙虫病东方体Karp株基因组中扩增出sta5 6基因的ORF及其中长 10 5 3bp的大片段 ,用TA克隆技术将此大片段克隆 ,并以重组质粒为模板 ,扩增编码Sta5 6抗原亲水氨基酸区的一段长 3 4 2bp的DNA ,插入 pProEXHTb载体 ,转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,用SDS -PAGE及Westernblot进行分析。结果 从恙虫病东方体基因组中扩增出sta5 6基因的ORF ,以截短片段构建了重组表达质粒 pHTbOt3 4 2 ,SDS -PAGE显示蛋白表达带的分子量约为 15 .4kDa ,Westernblot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清所识别。结论 在大肠杆菌中表达的Sta5
- 邓艳琴严延生何似翁育伟陈亮
- 关键词:恙虫病东方体克隆蛋白表达微生物
- 福建省登革热的血清流行病学调查被引量:6
- 2002年
- 何似李世清陈润许龙善严延生翁育伟
- 关键词:登革热血清流行病学调查
- 接种肾综合征出血热双价疫苗流行病学效果初步观察被引量:5
- 2006年
- [目的]观察肾综合征出血热2针双价疫苗免疫效果、临床副反应情况及现场流行病学效果。[方法]选择16~60岁健康人群,于0(即当天),14d在上臂三角肌内各注射疫苗1ml,注射第1针后6个月,再加强免疫1针,并于疫苗免疫前、全程免疫后14d;注射第1针后180d、加强免疫后14d及180d采静脉血,分离血清,以IFAT检测特异性IgG抗体,以疫苗保护率衡量其流行病学效果。[结果]基础2针免疫后14d荧光抗体阳性率89.3%,抗体几何平均滴度为1:39.6,但半年后抗体水平明显下降,加强免疫1针后抗体水平又快速回升,抗体几何平均滴度提高至1:59.4;疫苗接种总反应率为6%;疫苗接种后2.5年,疫苗观察点无病例发生。[结论]肾综合征出血热2针双价疫苗流行病学效果观察表明近期和中期疫苗对人群保护效果良好,值得推广。
- 陈阳李世清何似陈昌平伊仁义周安平
- 关键词:肾综合征出血热双价疫苗流行病学效果疫苗免疫
- 福建省霞浦县钩端螺旋体病疫源地调查被引量:2
- 2011年
- 目的调查钩端螺旋体病(钩体病)疫源地主要传染源及感染情况,为钩体病防治提供科学依据。方法对2008年8月宁德市霞浦县水门乡钩体病暴发流行后疫源地主要宿主动物及其带菌情况、血清抗体与人群感染情况进行调查。结果钩体疫源地平均鼠密度为25.3%,黄毛鼠占93.8%;鼠血清抗体阳性率为43.5%,感染血清群主要为爪哇群(95.0%)。从黄毛鼠血中分离出1株秋季群钩体。人群钩体感染率为55.3%,血清群均为秋季群,与黄毛鼠中检出菌型相一致。结论调查地区是钩体病自然疫源地,黄毛鼠是2008年当地钩体病暴发流行传染源,携带秋季群和爪哇群,人群感染血清群均为秋季群。
- 潘敏楠陈阳林代华李述杨何似林庆和陈良斌邓艳琴
- 关键词:钩端螺旋体病疫源地疾病控制
- 福建省2010年肾综合征出血热监测结果分析被引量:6
- 2012年
- 目的掌握我省肾综合征出血热(HFRS)疫情动态,为防治提供依据。方法对全省疫情报告进行统计分析。采用笼夜法捕鼠,计算鼠密度及鼠种构成,应用免疫荧光法对鼠肺进行HFRS病毒抗原检测。结果 2010年全省共报告HFRS病例171例,死亡1例。病例分布于58个县、市(区),发病率居前3的是南平、宁德和福州市;宿主动物监测,室内平均鼠密度5.6%,褐家鼠占48.0%(178/371),鼠携带HFRS病毒率为5.8%。混合型疫区周宁县野外鼠密度4.8%,黑线姬鼠占17.2%,黑线姬鼠和针毛鼠携带HFRS病毒率17.2%(5/29)。首次从华安褐家鼠中检出HFRS病毒抗原。调查证实HFRS的主要传染源仍为褐家鼠。结论 2010年福建省HFRS发病数较2009年下降了14.8%,但福州、漳州及泉州社区市疫情呈上升趋势,地区分布呈高度散发。HFRS的主要宿主动物及传染源仍以褐家鼠为主,周宁县野外鼠带毒率高,须进一步加强闽北地区混合型疫区野外鼠HFRS的监测,严防疾病暴发流行。
- 何似陈阳林文王家熊李述杨邓艳琴
- 关键词:肾综合征出血热宿主动物鼠密度鼠带毒率
- 登革热病毒Ⅰ型外膜蛋白DⅢ区的克隆、表达及重组蛋白的应用被引量:1
- 2006年
- 目的选取DVⅠ外膜蛋白DⅢ区基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断的纯化重组蛋白。方法用RT-PCR和套式PCR法扩增登革病毒Hawaii株外膜蛋白DⅢ区基因,与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白经Western-blot鉴定活性后用电洗脱法进行纯化。纯化的重组蛋白用间接ELISA法和捕获ELISA法应用于血清学检测,检测结果与间接免疫荧法进行比较。结果重组表达质粒在大肠杆菌中表达高产量的重组蛋白,Western-blot结果显示重组蛋白具有免疫活性。纯化的重组蛋白对登革热病毒Ⅰ型感染者具有很高的检出率,与间接免疫荧光法检测结果基本相符。结论DVⅠ外膜蛋白DⅢ区基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白可应用于血清学检测。
- 张志珊严延生翁育伟沈晓娜李世清何似
- 关键词:登革热病毒外膜蛋白基因基因表达