严阿勇 作品数:12 被引量:26 H指数:3 供职机构: 上海交通大学医学院 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
小鼠ICSI技术 本文以Piezo操作系统为技术支撑,在掌握小鼠胞浆内精子注射技术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的基础上,进行了ICSI技术生产试管小鼠的尝试.来自成年昆明(KM)小鼠附睾尾... 严阿勇 安晓荣 刘彦 李明 侯健 陈永福 苟克勉关键词:小鼠 胚胎移植 囊胚率 显微操作 繁殖生物技术 文献传递 小鼠胞浆内精子注射的研究 该研究以piezo操作系统为技术支撑,在掌握小鼠卵母细胞胞浆内精子注射技术(ICSI)的基础上,进行了ICSI技术生产试管小鼠及转基因小鼠的尝试.实验结果表明1、Piezo系统对小鼠卵膜损伤比较大,DBA♂×C57♀杂交... 严阿勇关键词:精子载体 转基因 小鼠 文献传递 胞浆内精子注射技术生产小鼠 被引量:11 2005年 以piezo操作系统为技术支撑 ,在掌握小鼠卵母细胞胞浆内精子注射技术 (ICSI)的基础上 ,进行了ICSI技术生产试管小鼠的尝试。来自成年昆明 (KM)小鼠附睾尾的新鲜精子 ,剪切去尾后 ,直接将精子头注射到B6D2F1小鼠卵母细胞质中 ,注射后 1h ,83 .3%的卵母细胞存活。6h时 ,84 . 0 %的成活卵子成功受精 ,形成原核 ,排出PB2 体外培养的ICSI胚胎 ,卵裂率 (98%vs 94 . 7% )和 4_细胞期胚胎比率 (89 5 %vs 92 . 1% )均与培养的体内受精卵没有差异 (P >0 . 0 5 ) ;但是 ,桑椹胚(6 3 8%vs84 . 2 % )和囊胚发育率 (2 5 .7%vs 6 8. 4 % )极显著地 (P <0 . 0 1)低于对照组。12 0枚原核期胚胎移植给 7只假孕受体后 ,4只受孕小鼠共产出 2 8只ICSI小鼠 (2 3. 3% )。健康成年的 2 5只ICSI小鼠都没有明显的生理和行为异常。随机选择其中的 2 0只小鼠 ,分别进行ICSI小鼠间、ICSI与KM小鼠间共 12组的交配 ,结果所有雌鼠妊娠产仔。在成功建立小鼠ICSI技术的基础上 ,成功获得了我国的首例ICSI小鼠 ,并且证明这些ICSI小鼠都具有正常的繁殖后代的能力。 严阿勇 李明 安晓荣 侯健 关宏 陈永福 苟克勉关键词:ICSI 囊胚 小鼠 生殖力 卵母细胞胞浆内精子注射(ICSI)技术的研究进展 被引量:3 2006年 利用人工辅助的显微操作技术,直接将精子注射至成熟卵母细胞质的方法,称为胞浆内精子注射技术,简称ICS I(in tracytop lasm ic sperm in jection)技术。目前,该项技术已经成功地用于生产试管婴儿、研究哺乳动物的受精机理、动物转基因、家畜性控胚胎生产等领域。本文详述了ICS I技术体系的发展背景、现状及其应用等方面。 刘占才 陈学进 严阿勇 朱锦亮 苟克勉关键词:动物 精子 卵母细胞 利用ICSI技术生产转基因小鼠 在掌握小鼠ICSI技术的基础上,本文进行了ICSI技术生产转基因小鼠的研究。来自成年KM小鼠附睾尾的精子,使用未加抗冻剂的HEPES-CZB溶液,在液氮中冻融1次后,用于本实验。解冻精子与DNA混匀1 min后,精子头被... 李明 严阿勇 姚慧 王宇 安晓荣 陈永福 苟克勉文献传递 卵母细胞胞浆内精子注射(ICSI)技术的研究进展 本文利用人工辅助的显微操作技术,直接将精子注射至成熟卵母细胞质的方法,称为胞浆内精子注射技术,简称ICSI(intracytoplasmicsperminjection)技术.目前,该项技术已经成功地用于生产试管婴儿、研... 刘占才 陈学进 严阿勇 朱锦亮 苟克勉关键词:卵母细胞 动物转基因 性控胚胎 文献传递 指导外源基因在动物乳腺特异性表达载体的构建 周云 林爱星 刘建喜 冯继东 严阿勇 侯健 陈永福 为了实现外源蛋白质在动物乳腺中特异性表达,采用PCR法扩增了BLG 3′端含第6,7外显子及poly(A)加尾信号下游约200 bp的0.87 kb片断。以山羊BLG 5′的3.2 kb(含第1,2外显子)启动子,山羊B...关键词:关键词:外源基因 基因表达 表达载体构建 用冻干精子生产ICSI小鼠 前期研究中,我们采用小鼠卵母细胞胞浆内精子注射(ICSI)技术,成功地用新鲜精子获得了生理健康的 ICSI 小鼠。在此基础上,本文结合细胞冻干技术,进行了冻干精子 ICSI 生产试管小鼠的尝试。B6D2F1成年公鼠的精子... 朱锦亮 严阿勇 陈学进 苟克勉关键词:小鼠 精子 冻干 文献传递 小鼠ICSI及其转基因技术 <正>实验一:以Piezo操作系统为技术支撑,进行了ICSI(intracytoplasmic sperm injection)技术生产试管小鼠的尝试。来自成年昆明(KM)小鼠附睾尾的新鲜精了头,直接注射到B6D2F1小... 李明 严阿勇 安晓荣 姚慧 苟克勉文献传递 利用卵胞浆精子注射(ICSI)技术生产转基因小鼠 被引量:11 2006年 在掌握小鼠ICSI技术的基础上,进行了ICSI技术生产转基因小鼠的研究。来自成年KM小鼠附睾尾的精子,使用未加抗冻剂的HEPES-CZB溶液,在液氮中冻融1次后,用于本实验。解冻精子与DNA混匀1min后,精子头被显微注射到B6D2F1小鼠成熟卵母细胞质中。精子头与pEGFP-N1环状DNA共注射生产的ICSI受精卵,在CZB溶液中培养至囊胚期时,39.1%(9/23)的囊胚表达GFP基因。精子注射后6h,直接移植ICSI受精卵后,7只妊娠受体一共产仔30只,效率为23.8%(30/126)。Southernblot分析其中16只小鼠发现,3只(18.8%)转基因小鼠同时整合了GFP和Neomycin基因,它们全部来自精子和线性DNA混合的实验组(阳性效率为33.3%,3/9),相反,精子与环状质粒DNA共注射生产的7只ICSI后代中,没有检测到外源基因。转基因小鼠整合的外源基因能够传递给它们后代。结果说明,利用ICSI技术可以高效地生产转基因小鼠,宿主基因组可能更容易整合线性化的外源基因。 李明 严阿勇 姚慧 安晓荣 苟克勉关键词:ICSI 囊胚 SOUTHERN BLOT