黄秀芳
- 作品数：32 被引量：92H指数：4
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- 抑癌基因p14ARF对顺铂诱导的骨肉瘤细胞凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨抑癌基因p14ARF对顺铂诱导的骨肉瘤细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 在不表达p14ARF的MG63细胞（p53突变）中稳定转染pcDNA3.1-p14ARF质粒,构建稳定表达株MG63-ARF;经反向聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹法鉴定;使用顺铂处理MG63和MG63-ARF细胞,通过MTT法测定细胞生长抑制和IC50;采用流式细胞术和Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡;采用免疫印迹检测p53、Bax、p21、Mdm2、Fas、Caspase-3、Caspase-9、PARP的表达;通过RNA干扰进行p53的表达沉默.采用Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理各组细胞,检测该作用是否依赖Caspase-9.结果 mRNA和蛋白水平,MG63和MG63-vec细胞未见p14ARF表达,MG63-ARF细胞可见p14ARF的高表达.经顺铂处理72 h后,细胞活力在MG63、MG63-vec和MG63-ARF组为84.2％±4.3％、80.8％±4.3％和58.9％±5.4％,IC50值为（11.1±0.6）、（10.7±0.9）、（7.2±0.7） μmol/L,（P＜0.05）.流式细胞术显示MG63、MG63-vec和MG63-ARF组经顺铂处理72 h的凋亡率为：13.6％、18.5％和35.9％.荧光染色表明MG63-ARF细胞相对出现更多更明显的凋亡,在MG63-ARF还出现了更明显的Caspase-3,9和PARP的活化裂解.在顺铂处理的MG63-vec和MG63-ARF细胞中,p53、Bax、p21、Mdm2、Fas的表达无任何改变.在U2OS-vec和U2OS-ARF细胞中转染p53-siRNA明显减弱了p53的表达,再经顺铂处理72 h后,U2OS-vec细胞的转染空白组、转染对照siRNA组和转染p53-siRNA组细胞活力差异无统计学意义（P＞0.05）,U2OS-ARF细胞的转染空白组、转染对照siRNA组和转染p53-siRNA组细胞活力差异无统计学意义（P＞0.05）.Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理后,Z-LEHD-FMK、顺铂、顺铂＋Z-LEHD-FMK组细胞活力为：96.8％±3.6％、54.1％±5.8％和89.5％±5.1％.结论 p14ARF可通过p53非依赖Caspase-9依赖性途径增强顺铂诱导的骨肉瘤MG63细胞凋亡,该作用与内源性线粒体凋亡通路有关.
- 黄秀芳原向伟陈忠羡梁胜根
- 关键词：骨肉瘤顺铂
- p14ARF增强顺铂诱导的骨肉瘤U2OS细胞凋亡的研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨p14ARF对顺铂诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡的影响及其机制,为提高骨肉瘤化疗敏感性提供依据。方法在不表达p14ARF的U2OS细胞中稳定转染pcDNA3.1-p14ARF质粒,构建稳定表达株;采用RT-PCR和Western blot法鉴定其表达;台盼蓝拒染法测定生长抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测凋亡;Western blot法检测Caspase-3,9和PARP的表达和活化。结果 mRNA和蛋白水平,U2OS和U2OS-vec细胞未见p14ARF表达,U2OS-ARF细胞可见p14ARF的高表达;p14ARF单独对U2OS细胞的生长无影响,但顺铂(5μM)处理72小时后,U2OS-ARF细胞的生长抑制率明显高于U2OS和U2OS-vec细胞,相对于U2OS和U2OS-vec细胞,U2OS-ARF细胞不仅表现更为明显的凋亡形态学变化,还明显出现了Caspase-3,9和PARP的活化裂解。结论 p14ARF能够增强顺铂诱导的骨肉瘤U2OS细胞毒作用和凋亡,通过激活Caspase-PARP级联活化,提高骨肉瘤U2OS细胞对顺铂的敏感性。
- 原向伟廖威明黄秀芳梁胜根陈忠羡范全秦英朱孝峰
- 关键词：顺铂骨肉瘤细胞凋亡化疗敏感性
- PICC置管结合奥伦自理模式在胃肠癌行5-FU泵化疗患者中的应用被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨经外周穿刺中心静脉置管(PICC)结合奥伦自理模式在胃肠癌行5-氟尿嘧啶(5-FU)泵化疗患者中的应用效果。方法:选取2019年1月1日~8月31日行5-FU泵化疗的46例胃肠癌患者为对照组,采取PICC常规护理;选取2019年9月1日~2020年6月30日行5-FU泵化疗的42例胃肠癌患者为观察组,采取奥伦自理模式护理;比较两组自护能力[采用自我护理能力测定量表(ESCA)]、疾病健康知识掌握情况、置管并发症发生率、舒适度(采用Kolcaba舒适度量表)和护理满意度评分。结果:护理后,两组ESCA评分均高于护理前(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05);观察组疾病健康知识掌握程度评分高于对照组(P<0.05);化疗期间,观察组渗血发生率低于对照组(P<0.05);观察组舒适度量表中心理、精神维度评分和总分均高于对照组(P<0.05);观察组护理满意度评分均高于对照组(P<0.05)。结论:使用PICC置管结合奥伦自理模式对滴注5-FU泵进行化疗的胃肠癌患者实施护理,可提高患者自护能力、疾病健康知识掌握程度和舒适度,减少渗血的发生,提高患者护理服务满意度。
- 温棉棉黄秀芳
- 关键词：外周中心静脉置管奥伦自理模式化疗泵胃肠癌
- 经皮椎体后凸成形术治疗多发骨质疏松性胸腰椎压缩骨折疗效分析被引量：2
- 2017年
- 目的观察并分析经皮后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)在多发骨质疏松性胸腰椎压缩骨折中的应用及其疗效。方法对2013年1月~2015年12月本院确诊超过2个节段的骨质疏松性胸腰椎新鲜压缩骨折患者42例共94椎进行PKP治疗,并获得完整随访,比较治疗前后视觉模拟评分(VAS)、后凸Cobb角、椎体矢状位指数(VSI)、生活质量评分(Barthel指数)等指标及手术并发症。结果术前、术后3天和术后1年的VAS评分为(7.56±1.24)、(2.65±1.31)、(1.96±0.89)分,Cobb角为(32.83±6.78)°、(10.11±5.75)°、(9.79±4.81)°,VSI为(0.61±0.21)、(0.89±0.26)、(0.85±0.19),Barthel指数为(29.11±11.95)、(75.75±13.88)、(71.47±12.03)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。42例发生并发症15例,发生率35.71%,其中穿刺并发症2例,骨水泥渗漏7例,发生率为16.67%,至术后1年发生临近椎体骨折6例(14.29%)。结论 PKP治疗多发骨质疏松性胸腰椎压缩骨折可明显改善患者症状、恢复椎体前缘高度、恢复Cobb氏角、改善生活质量。
- 原向伟黄秀芳陈忠羡范全梁胜根秦英
- 关键词：经皮椎体后凸成形术骨质疏松症
- 乳腺癌差异表达的MicroRNA的筛选研究被引量：27
- 2009年
- 【目的】应用miRNA芯片技术筛选乳腺癌及癌旁组织差异表达的miRNA,发现与乳腺癌相关的miRNA,为进一步阐明其在乳腺癌发病机制中的作用打下基础。【方法】收集8例新鲜的乳腺癌及其癌旁组织,抽提总RNA并分离出小RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,应用实时定量RT-PCR方法验证miRNAs芯片结果的可靠性。【结果】对芯片数据进行SAM分析,结果筛选获得16个乳腺癌相关miRNAs,相对于癌旁组织,在乳腺癌组织中9个miRNAs表达上调,7个miRNAs表达下调。其中显著上调的有miR-21,miR-365,显著下调的有miR-497,miR-31。【结论】筛选得到乳腺癌miRNA差异表达谱,其可能与乳腺癌的发生发展有关。
- 黄秀芳邵建永颜黎栩李晓霞杜紫明邓玲梁小曼
- 关键词：MIRNA乳腺癌MIRNA芯片实时定量RT-PCR
- 原发性脑淋巴瘤的CT、MRI表现与病理对照研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨原发性脑淋巴瘤(PLB)的CT、MRI表现特征及病理基础。方法收集经手术、病理和免疫组化证实,资料齐全的PLB 17例,分析其CT、MRI及病理表现。结果17例患者中单发11例,多发6例,共25个病灶,分布于脑深部中线附近病灶19个(76.00%),分布于灰白质交界区及脑表面病灶6个(24.00%)。肿瘤形态多为类圆形肿块或结节,瘤周水肿多为轻至中度水肿。CT平扫多呈等密度或略高密度影。T1WI呈等、低信号,T2WI呈等、高信号,增强后呈明显均匀增强。B细胞来源的14例,多为LCA、CD20、CD79阳性;T细胞来源的3例,多为LCA、CD45RO、CD3阳性。结论PLB的病理学基础决定其CT及MRI表现特征,结合临床及影像学表现特征可以对该病作出正确诊断。
- 金志发龙晚生罗学毛左克扬胡茂清黄秀芳
- 关键词：淋巴瘤计算机体层摄影磁共振成像
- α干扰素增强阿霉素诱导的骨肉瘤细胞凋亡被引量：1
- 2014年
- 目的探讨α干扰素（Interferonα，IFNα）联合化疗药物阿霉素诱导人骨肉瘤U20S细胞凋亡的作用及其机制，为提高骨肉瘤化疗敏感性探索新的治疗方法。方法应用台盼蓝拒染法测定IFNα和阿霉素单用以及联用对U20S细胞的生长抑制作用；Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡形态学变化；Westernblot法检测Caspase-3、PARP的活化；采用Caspase抑制剂Z—VAD—FMK预处理各组细胞，检测该作用是否依赖Caspase。结果IFNα处理24h、48h、72h对U20S细胞无抑制作用，却明显增强阿霉素诱导的生长抑制作用，具有时间依赖性；联合用药72h后U20S细胞出现更为明显的凋亡形态学变化；联合用药组的凋亡关键酶Caspase-3、PARP均发生断裂活化；Caspase抑制剂Z—VAD—FMK预处理明显减弱联合用药引起的生长抑制。结论IFNd通过Caspase依赖性凋亡通路增强阿霉素诱导的骨肉瘤U2OS细胞生长抑制和凋亡，二者联合应用可能成为提高骨肉瘤化疗敏感性的有效途径。
- 黄秀芳原向伟
- 关键词：Α干扰素阿霉素骨肉瘤凋亡天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶
- 应用microRNA微阵列技术研究乳腺癌microRNA的差异表达谱
- 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。近年来，乳腺癌发病率不断上升，严重危害女性健康。然而乳腺癌发生发展的分子机制至今仍不清楚，进一步探索乳腺癌的分子发生机制对提高乳腺癌诊断与治疗水平有重要意义。
miRNA(Mi...
- 黄秀芳
- 关键词：乳腺癌差异表达谱
- 文献传递
- p14ARF经p53凋亡通路增强骨肉瘤U2OS细胞对顺铂的敏感性被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨抑癌基因p14ARF增强骨肉瘤U2OS细胞对顺铂的敏感性及其作用机制.方法 使用顺铂处理不表达p14ARF的U2OS细胞和稳定表达p14ARF的U2OS-ARF细胞,采用噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞毒作用和半数抑制浓度值;流式细胞术和Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡;免疫印迹法检测p53以及其下游基因Bax、p21、Mdm2、Fas的表达;比色法检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶（caspase）-3、caspase-8、caspase-9蛋白酶的活性.结果 顺铂处理72 h后,U2OS、U2OS-vec和U2OS-ARF组的细胞活力分别为（84.8％±4.4％）、（86.9％±5.0％）和（66.7％±4.6％）,相比U2OS-ARF的细胞活力明显降低,U2OS、U2OS-vec和U2OS-ARF组的IC50分别为（15.8±0.9）、（16.3±0.6）μmol/L和（8.9±0.8）μmol/L,相比U2OS-ARF的IC50明显降低（P＜0.05）.流式细胞术和形态学鉴定表明相对于U2OS和U2OS-vec细胞,U2OS-ARF细胞表现更为明显的凋亡比例和凋亡特异性形态学变化.在U2OS-ARF细胞中,p53、Mdm2和p21的基础表达水平稍稍高于U2OS-vec对照细胞,顺铂处理在U2OS-vec和U2OS-ARF细胞均明显激活p53、Mdm2和p21的表达,但在U2OS-ARF细胞中更加明显;另外,顺铂处理对U2OS-vec细胞中Bax和Fas的表达没有影响,却在U2OS-ARF细胞中明显增强了Bax的表达,但对Fas无影响.p14ARF还增强顺铂对caspase-9和caspase-3的活化.结论 p14ARF通过p53凋亡通路增强骨肉瘤U2OS细胞对顺铂的敏感性,并与内源性线粒体通路有关.
- 原向伟黄秀芳陈忠羡梁胜根廖威明
- 关键词：骨肉瘤顺铂蛋白质P53P14ARF
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝细胞癌组织中的表达及临床意义被引量：1
- 2016年
- 目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3，GPC3）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测2011年6月～2015年3月期间的54例HCC组织、46例癌旁组织、22例肝硬化组织、12例正常肝组织中的GPC3表达情况，分析GPC3表达与临床和病理因素的相关性。结果正常肝组织中不表达GPC3蛋白，肝癌组织GPC3评分（7．39±3．64）和阳性率（81．48％）均显著高于癌旁组织（1．15±0．99，13．04％）、肝硬化组织（0．32±0．56，4．54％），差异有统计学意义（P〈0．05）；随着肝癌临床分期的增高，GPC3评分逐步升高，Ⅲ／Ⅳ期（10．05±3．59）与Ⅰ期（4．31±3．41）、Ⅱ期（7．14±3．63）比较，差异有统计学意义（P〈0．05），GPC3阳性率也升高（Ⅰ期69．23％，Ⅱ期81．81％，Ⅲ／Ⅳ期89．47％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；肝癌组织GPC3阳性率与性别、年龄、血清HBsAg、甲胎蛋白（alpha—fetoprotein，AFP）、肿瘤直径、转移情况、临床分期无关（P〉0．05），与是否并发肝硬化相关（P〈0．05），GPC3高表达率与血清AFP、肿瘤直径、是否并发肝硬化、转移情况、临床分期均相关（P〈0．05）。结论GPC3在HCC的诊断方面具有重要的临床意义，其表达水平与HCC的病情进展相关。
- 杨文丽申旺黄秀芳李青刘琼茹
- 关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖3肝细胞癌免疫组织化学
