高方方
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVY^N)外壳蛋白基因的克隆、表达及其间接ELISA方法的建立被引量：3
- 2008年
- 【目的】制备马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)多克隆抗体,建立间接ELISA法用于检测PVYN病毒。【方法】依据PVYN的CP基因序列设计引物,利用RT-PCR方法获得CP基因并连接构建到原核表达载体,进行原核表达,以纯化的重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得PVYN的抗血清并纯化。【结果】测序结果与其他已知序列比较,PVYNCP基因的核苷酸同源性95%,推断氨基酸的同源性达98%。以纯化蛋白为抗原进行免疫,成功获得了PVYN外壳蛋白抗血清,纯化后的IgG采用间接ELISA法检测抗原,抗体效价达1:500,使用该抗体稀释度检测感染植株,结果呈阳性。【研究结论】通过分子生物学途径获得了PVYN的多克隆抗体,建立的间接ELISA方法可以用于PVYN的病毒检测。
- 高方方吴忠义黄丛林孙惠生曾申明
- 关键词：马铃薯Y病毒脉坏死株系多克隆抗体ELISA
- 牛干扰素-tau的原核表达及生物活性鉴定
- IFN-τ是反刍动物妊娠后胚胎向母体发出的最初妊娠信号，在母体妊娠识别过程中起着重要的作用。本试验以牛体内胚胎为材料，通过一步法PCR从胚胎基因组中扩增牛IFN-τ基因(含信号肽)，扩增产物与中间载体pGEM-T Vec...
- 高方方
- 关键词：干扰素原核表达生物活性
- 文献传递
