高亚萍
- 作品数:66 被引量:83H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学军事更多>>
- 人甲状旁腺素_(1-34)及其聚乙二醇修饰物对鸡血钙含量的影响被引量:2
- 2004年
- 目的 :通过观察人甲状旁腺素 (hPTH1 3 4 )及其聚乙二醇修饰物对鸡血钙含量的影响判断它们的体内活性。方法 :12日龄的小鸡分别翼静脉注射赋形剂 ,hPTH1 3 4 ,Cys(mPEG50 0 0 MAL) hPTH1 3 4 和hPTH1 3 4 Cys(mPEG50 0 0 MAL) NH2 。 6 0min和 12 0min后翼静脉采血 ,分离血清并测定钙含量。结果 :给药后 6 0min ,hPTH1 3 4 ,Cys(mPEG50 0 0 MAL) hPTH1 3 4 和hPTH1 3 4 Cys(mPEG50 0 0 MAL) NH2 组静脉血清钙含量均明显升高 ;12 0min后 ,Cys(mPEG50 0 0 MAL) hPTH1 3 4 组血清钙含量仍维持升高水平 ,而hPTH1 3 4 和hPTH1 3 4 Cys(mPEG50 0 0 MAL) NH2 组血清钙含量则明显回落。结论 :合成人甲状旁腺素 (hPTH1 3 4 )及其聚乙二醇修饰物可以明显升高小鸡的血清钙水平 ;N端聚乙二醇修饰的hPTH1 3 4 维持血钙升高的时间较长。
- 高亚萍潘和平王良友柳川
- 关键词:人甲状旁腺激素生物活性测定钙
- 一种新型多肽在干燥综合征诊断中的应用
- 本发明提供了一条新型多肽用于干燥综合征的诊断。这种多肽抗原的IgG型抗体,在干燥综合征的诊断中具有很高的敏感性和特异性。
- 杨光高亚萍柳川董洁刘玉
- 小鼠sidt2基因的可变剪接验证
- 2008年
- 目的:验证小鼠基因sidt2中sidt2(l)和sidt2(s)为同一基因经可变剪接所得的结果。方法:对小鼠sidt2基因进行生物信息学分析及基因组PCR,确定其基因组定位情况;通过提取总RNA、RT-PCR,了解sidt2在小鼠多种组织中的表达情况;构建可变剪接报告载体,转染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,并提取细胞总RNA、RT-PCR,检测其在细胞中的剪接行为,验证该基因存在可变剪接。结果及结论:证实小鼠sidt2存在可变剪接,其两条序列sidt2(l)和sidt2(s)为可变剪接的产物。
- 刘舒云李洁陈留存曹国军李少华赵强丁红梅高亚萍刘农乐王芳杨光邵宁生
- 关键词:可变剪接组织表达谱
- 一种A型副鸡嗜血杆菌的抗原模拟表位肽及其用途
- 本发明涉及一种A型副鸡嗜血杆菌的抗原模拟表位肽及其用途。一种A型副鸡嗜血杆菌的抗原模拟表位肽,其氨基酸序列通式为:X<Sub>1</Sub>X<Sub>2</Sub>X<Sub>3</Sub>X<Sub>4</Sub>A...
- 王宏俊高亚萍龚玉梅柳川孙惠玲安烨张培君
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌RNaseH Ⅰ、RNaseH Ⅱ和RNaseH Ⅲ突变菌株的构建及功能研究
- 2010年
- 目的:在金黄色葡萄球菌中分别构建RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ的突变菌株,并研究它们在金黄色葡萄球菌中的生物学功能。方法:利用同源重组的方法在金黄色葡萄球菌中分别构建RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ的插入突变菌株,检测突变株生长速度、溶血活性及外分泌蛋白表达水平与野生型的差异,进一步通过流式细胞术检测突变株外分泌蛋白细胞毒性的改变,同时在体外检测突变株在全血中的存活能力。结果:构建了金黄色葡萄球菌RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ的插入突变菌株;表型检测结果显示,与野生型菌株相比,3种突变株的生长速度减慢,溶血素和外分泌蛋白明显减少;流式细胞术检测结果显示3种突变株毒性比野生型菌株减弱;全血杀伤实验结果显示3种突变株在全血中的存活率低于野生型菌株。结论:RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ在金黄色葡萄球菌生长繁殖、毒素产生和侵袭机体的过程中有重要作用,它们可能与金黄色葡萄球菌的致病性相关。
- 吴娜刘玉董洁高亚萍张鑫牟春花邵宁生杨光
- 关键词:金黄色葡萄球菌突变
- 变形链球菌葡糖基转移酶催化活性区的分子克隆及表达被引量:6
- 2005年
- 目的:克隆变形链球菌葡糖基转移酶中催化活性区(CAT)的基因片段,并在大肠杆菌中表达。方法:通过PCR技术克隆CAT的基因片段并通过蛋白重组融合表达技术使其在大肠杆菌中表达。结果:成功克隆了CAT的基因片段,并在大肠杆菌中得到其融合蛋白的表达。结论:成功克隆葡糖基转移酶CAT基因并获得其融合蛋白的表达,为后续研究奠定了基础。
- 夏伟王成龙董洁高亚萍杨光邵宁生刘洪臣
- 关键词:变形链球菌葡糖基转移酶克隆分子克隆
- 磁珠-流式细胞术SELEX技术的建立被引量:3
- 2007年
- 目的:建立磁珠—流式细胞术SELEX技术方法。方法:不对称PCR扩增并制备ssDNA文库,选用商品化的、表面包被链霉亲合素的磁珠作为分离介质进行SELEX筛选,流式细胞术检测筛选得到的配基与链霉亲合素结合的特异性,及配基竞争生物素与链霉亲合素的结合情况。结果:筛选获得了特异识别链霉亲合素的ssDNA配基,流式细胞术检测确定:筛选得到的配基与链霉亲合素特异结合,并能竞争生物素与链霉亲合素的结合。结论:成功建立了磁珠—流式细胞术SELEX技术方法。
- 汪林王成龙储冰峰邵宁生杨光董洁高亚萍
- 关键词:SELEX技术磁珠流式细胞术龋病
- 金黄色葡萄球菌β-溶血素的表达、纯化及中和性抗体的制备被引量:4
- 2016年
- 目的利用大肠杆菌重组表达金黄色葡萄球菌外分泌毒素β-溶血素(β-hemolysin,Hlb)及其突变体HlbH-149-N,检测其生物学活性,并制备其功能性抗体,探讨Hlb蛋白在金葡菌感染中的生物学意义。方法以金葡菌NCTC-8325基因组为模板,利用PCR技术扩增目的基因hlb,进一步构建重组表达载体p ET28a-hlb,并转至大肠杆菌BL21(DE3),利用点突变技术构建重组表达载体p ET28a-hlbH-149-N,经IPTG诱导表达目的蛋白,通过Ni2+柱亲和纯化获得Hlb蛋白及突变体HlbH-149-N蛋白;通过溶血实验检测Hlb及突变体HlbH-149-N蛋白的生物学活性,并制备Hlb特异性抗体,检测抗体的中和活性。结果获得了纯度较高的重组Hlb蛋白和突变体HlbH-149-N蛋白,溶血活性实验结果表明,重组Hlb蛋白能够裂解绵羊红细胞,而突变体HlbH-149-N蛋白不能裂解绵羊红细胞;不同物种红细胞对Hlb敏感性不同;制备了抗Hlb蛋白的多克隆抗体(anti-Hlb),ELISA和Western印迹实验结果表明,anti-Hlb能特异结合Hlb蛋白和突变体HlbH-149-N蛋白,同时发现,anti-Hlb可有效抑制Hlb对绵羊红细胞的裂解作用。结论获得了具有良好溶血活性的重组Hlb蛋白以及无溶血活性的突变体HlbH-149-N蛋白,并制备了具有中和活性的特异性抗体,为深入研究Hlb在金葡菌致病过程中的作用奠定了基础。
- 刘成华李迪高亚萍靳鹏刘玉杨光
- 关键词:溶血活性抗体制备
- 一种新型多肽在系统性红斑狼疮诊断中的应用
- 本发明提供了一条新型多肽用于系统性红斑狼疮的诊断。这种多肽抗原的IgG型抗体,在系统性红斑狼疮的诊断中具有很高的敏感性和特异性。
- 杨光高亚萍柳川董洁刘玉
- 文献传递
- TRAP蛋白的抗体制备和初步应用
- 2004年
- 金黄色葡萄球菌分泌的RAP蛋白通过其靶分子TRAP蛋白的磷酸化来激活RNAⅢ的转录。用TRAP蛋白免疫家兔得到效价为1∶128000的多抗血清。纯化后的抗体可以特异识别不同菌株的TRAP蛋白,并抑制TRAP蛋白磷酸化,降低金黄色葡萄球菌外毒素的分泌。
- 高亚萍杨光丁红梅柳川沈倍奋邵宁生
- 关键词:TRAP抗体制备靶分子外毒素多抗抗血清