马延兵
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 供职机构：西安交通大学医学院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人BDNF对快速老化模型小鼠及神经元培养的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨重组人BDNF(rhBDNF)对快速老化模型小鼠(SAM)及应激衰老神经元的抗凋亡作用。方法将SAM鼠分为正常组。实验对照组和hBDNF实验组,将培养的神经元分为正常组。衰老模型组和hBDNF实验组。对SAM鼠进行行为学测试,对培养的神经元进行了形态学观察。bcl-2免疫组织化学染色及MTT自动比色微量分析。结果rhBDNF实验组SAM鼠的学习记忆能力明显增强,与对照组相比有显著性差异。衰老模型组神经元存活率降至58.7%,与正常组比较有显著性差异(P<0.01)。rhBDNF实验组神经元存活率达到71.5%,显示实验组和衰老模型组之间有显著性差异(P<0.01),bcl-2阳性细胞数量和平均面积以及bcl-2免疫着色的灰度值较AD模型组显著增高。结论rhBDNF在培养的神经元和SAM鼠有营养作用,BDNF通过增加抗凋亡蛋白bcl-2的表达保护神经元抵抗凋亡,有助于衰老的防治。
- 王小亮马延兵韩华
- 关键词：衰老脑源性神经营养因子快速老化模型小鼠抗凋亡蛋白
- β淀粉样肽与HbcAg/MIR融合蛋白的免疫血清在AD转基因细胞模型中的生物效应被引量：2
- 2007年
- 目的研究β淀粉样肽(Aβ)与乙肝核心抗原主要免疫优势区(HbcAg/MIR)的融合蛋白(c-Aβ-c)在BL21/pET28原核表达体系的表达并进行腹腔内注射表达的融合蛋白免疫小鼠,检测免疫血清的免疫原性以及体外的生物学效应。方法应用分子克隆技术构建原核表达质粒pET-28a/c-Aβ-c并进行c-Aβ-c融合基因在BL21菌的IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达的融合蛋白,用纯化的c-Aβ-c融合蛋白腹腔注射免疫动物,ELASA检测其抗Aβ抗体效价,MTT法和流式细胞术检测它应用于Alzheimer’sdisease(AD)转基因细胞的生物效应。结果表达的c-Aβ-c融合蛋白主要以包涵体形式存在于细菌的沉淀中,表达水平占细菌总蛋白量的30%以上。免疫小鼠血清中抗Aβ抗体效价达1∶16000,抗血清抑制了AD转基因细胞中Aβ的神经细胞毒性,明显降低了细胞凋亡的比率。结论c-Aβ-c融合蛋白具有良好的Aβ免疫原性,其动物免疫血清有效抑制Aβ肽的细胞毒性。
- 刘朝晖冯改丰李月英马延兵胡海涛
- 关键词：Β淀粉样肽融合蛋白免疫血清
- 反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达被引量：8
- 2007年
- 目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率。结果成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL。在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达。在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到30%以上。结论SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率。
- 刘朝晖杨宇庄鹏辉许杰华马延兵胡海涛
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白反转录病毒载体
- 病毒载体介导BDNF基因表达在大鼠神经元AD模型中的作用被引量：4
- 2006年
- 目的探讨重组腺伴随病毒(rAAV)载体介导表达人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因以及表达的hBDNF对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的AD模型神经元保护效应的机制。方法使用分子克隆技术克隆了hBDNF基因,并且构建了携带hBDNF基因的rAAV病毒载体(AAV-hBDNF),使用病毒载体转染Aβ诱导损伤的海马神经元。使用MTT检测和流式细胞仪分析观察细胞凋亡变化,同时使用免疫细胞化学技术检测了BDNF蛋白以及Bcl-2抗凋亡蛋白的表达,使用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。结果结果显示重组病毒对培养的海马神经元进行了有效的转染,BDNF蛋白表达水平明显增高,表达的BDNF对Aβ诱导的神经元损伤有显著的保护效应,在BDNF治疗组表现出抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增高和有效地维持了[Ca2+]i平衡。结论表达的BDNF通过抑制Aβ依赖的细胞内钙超载和增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,有效地保护神经元抵抗Aβ神经毒性引起的凋亡。
- 刘朝晖马东亮靳辉马延兵胡海涛
- 关键词：脑源性神经营养因子腺伴随病毒钙超载
- 男性泌尿生殖层的层面解剖及其临床意义研究被引量：6
- 2021年
- 目的观察并描述男性泌尿生殖层的层面解剖学形态,探讨该层面在结直肠手术中的临床意义。方法采用层面解剖学方法解剖10具男性尸体躯干与20具盆腔标本,系统地描述泌尿生殖层的解剖形态,并与相应腹腔镜下解剖结构相比较。结果男性泌尿生殖层为泌尿生殖筋膜包被,整体结构可分3段——腹段、盆段和精索段。泌尿生殖层腹段头侧由泌尿生殖筋膜紧密愈着于膈下筋膜,外侧与腹横筋膜间形成侧锥筋膜,其腹侧为原始体腔膜形成的后腹膜以及后腹膜与腹内脏器固有筋膜形成的融合筋膜,背侧为腰肌筋膜;腹段在肠系膜下动脉以下,形成位于腹主动脉与下腔静脉前方的独立层面,在盆腔入口处延续为位于中央的盆段和位于两侧的精索段。精索段外侧界为精索血管,内侧界为输尿管,前界为输精管,外被泌尿生殖筋膜,形似三角,经由内环外出至腹股沟管,延伸至睾丸。盆段入盆后包绕在直肠周围下行,直肠后方的泌尿生殖层约在骶4椎体前方融汇于直肠固有筋膜,其内走行腹下神经;直肠侧方泌尿生殖层内为下腹下神经丛以及输尿管、输精管走行,泌尿生殖筋膜脏层覆盖其内侧表面,行向直肠前方,终于精囊腺—前列腺交界,泌尿生殖筋膜壁层覆盖于下腹下神经、输尿管背侧及外侧,下行与膀胱固有筋膜融汇。结论泌尿生殖层各段构成结肠、直肠周围毗邻层面,该解剖结构对于结直肠手术具有重要的指导意义。
- 邱健苏军龙阎立昆马延兵刘瑞廷王奔
- 关键词：结肠直肠
