顾建红
- 作品数：233 被引量：566H指数：10
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 骨保护素和核因子κB受体活化因子配基对体外培养鸭破骨细胞的影响
- 2009年
- 探讨了核因子κB受体活化因子配基(Receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和不同浓度骨保护素(Os-teoprotegerin,OPG)对鸭破骨细胞(Osteoclasts,OC)生成和活化的影响。从7日龄内番鸭长骨骨髓分离破骨细胞,添加1,25-(OH)2D3进行诱导培养15 h后,更换含不同细胞因子的培养液(对照组:不加细胞因子;30μg/LsRANKL组;30μg/L sRANKL+10μg/L OPG组;10μg/L OPG组;50μg/L OPG组;100μg/L OPG组),继续培养。倒置显微镜进行OC形态学观察,比较各组培养3 d后抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)阳性OC数量、培养7 d后扫描电镜观察象牙片吸收陷窝。结果表明:50μg/L OPG组、100μg/L OPG组OC数均极显著少于10μg/LOPG组(P<0.01);添加OPG组OC数均极显著少于30μg/L sRANKL组(P<0.01),象牙片吸收陷窝随OPG添加浓度的增加而减少,面积减小,陷窝深度变浅。RANKL能够促进OC的生成及活化,而OPG可与RANKL竞争性地结合RANK抑制OC的生成和活化,从而抑制OC的骨吸收。
- 刘俊栋顾建红刘海霞赵瑞英王键刘宗平
- 关键词：破骨细胞骨保护素核因子ΚB受体活化因子配体抗酒石酸酸性磷酸酶
- 葛根素对镉致大鼠大脑皮质线粒体损伤的保护效应
- 2024年
- 为了探究葛根素对镉(Cd)致大鼠大脑皮质线粒体损伤的保护效应,将24只SD大鼠随机分为对照组(Con)、葛根素组(Pur)、镉组(Cd)、镉与葛根素共处理组(Cd+Pur)。Pur组、Cd+Pur组大鼠每日以每千克体重200 mg葛根素(溶解于羧甲基纤维素钠)灌胃,Con组、Cd组大鼠每日用相同剂量羧甲基纤维素钠灌胃,持续7周。从第4周开始,Cd组、Cd+Pur组大鼠在灌胃的同时自由饮用75 mg/L镉水溶液,持续4周。试验结束后,剖杀采集大鼠大脑皮质,火焰原子吸收光谱法检测镉含量,化学发光法检测ATP水平,比色法检测NAD^(+)/NADH比率、Mn SOD活性和H_(2)O_(2)水平,实时荧光定量PCR法检测线粒体氧化应激相关基因(GST、CAT、Gpx、UCP1、UCP2和UCP3)转录水平。结果显示,与Con组相比,Cd组大鼠大脑皮质镉含量、H_(2)O_(2)水平、线粒体氧化应激相关基因转录水平显著上升(P<0.05),ATP水平和NAD^(+)/NADH比率、MnSOD活性显著下降(P<0.05);与Cd组相比,Cd+Pur组大鼠大脑皮质镉含量、H_(2)O_(2)水平和线粒体氧化应激相关基因转录水平显著下降(P>0.05),MnSOD活性显著上升(P<0.05),ATP水平和NAD^(+)/NADH比率上升但无显著性差异(P>0.05)。结果表明,葛根素可降低镉暴露大鼠大脑皮质镉含量,同时葛根素通过缓解线粒体功能障碍、线粒体氧化应激减轻了镉致大鼠大脑皮质线粒体损伤。
- 黄心昱徐明畅张文华邹辉顾建红顾建红卞建春刘学忠袁燕
- 关键词：镉葛根素线粒体损伤
- 乳鼠成骨细胞的培养及鉴定被引量：15
- 2007年
- 无菌采取5日龄SD大鼠的颅盖骨,用胰蛋白酶预消化后,漂洗,剪碎,再用Ⅱ型胶原酶消化获得成骨细胞。通过倒置相差显微镜观察,并用碱性磷酸酶和矿化结节染色鉴定,利用微量滴定（MTT）法测定一个培养周期的成骨细胞活性分布,探讨一种经济、高效的原代成骨细胞培养方法。倒置相差显微镜形态观察结果显示,未贴壁的细胞呈圆形,贴壁生长的细胞呈不规则梭形、三角形或多角形,单核,有1-3个核仁;碱性磷酸酶和钙化结节染色均呈阳性（阳性率≥98.06%）;MTT法结合形态学观察结果显示,成骨细胞培养至第10 d时活性最强。证实用改良的二次酶消化法能够在短时间内获得大量成骨细胞,且所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。
- 卓丽玲顾建红赵瑞英刘宗平张春岭
- 关键词：乳鼠成骨细胞矿化结节
- ZEA、DON及其联合作用对李斯特菌感染小鼠血清免疫相关细胞因子的影响
- 2023年
- 旨在探究玉米赤霉烯酮(ZEA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其联合作用对细菌感染动物防御能力的影响。试验以小鼠为对象,研究了低剂量的ZEA、DON对李斯特菌感染小鼠血清中免疫相关因子的变化。试验分别设空白对照组(Con)、李斯特菌组(Lis)、10 mg/kg ZEA+李斯特菌组(ZEA+Lis)、1 mg/kg DON+李斯特菌组(DON+Lis)、10 mg/kg ZEA+1 mg/kg DON+李斯特菌组(ZEA+DON+Lis),染毒方式为灌胃,细菌感染方式为尾静脉注射,剂量5×104CFU。在试验结束后,用抗体芯片技术检测小鼠血清中免疫相关细胞因子的水平。结果显示,与Con组相比,Lis组免疫细胞因子如白介素IL-1β、IL-12P40/P70,集落刺激因子MCSF,趋化因子MIG皆显著升高(P<0.05)。与Lis组相比,ZEA+Lis组IL-1β显著下降(P<0.05),基质金属蛋白酶TIMP-1显著上升(P<0.05);DON+Lis组IL-1β、IL-12P40/P70和MCSF显著下降(P<0.05),趋化因子BLC TIMP-1显著或极显著上升(P<0.05或P<0.01);ZEA+DON+Lis组IL-1β与IL-12P40/P70显著下降(P<0.05),集落刺激因子GCSF、趋化因子BLC与MIG显著或极显著上升(P<0.05或P<0.01)。与ZEA组相比,ZEA+DON+Lis组IL-6、趋化因子MIP-1α与MIG、TIMP-1显著上升(P<0.05),趋化因子LIX显著下降(P<0.05)。与DON+Lis组相比,ZEA+DON+Lis组GCSF与MCSF显著或极显著上升(P<0.05或P<0.01),MIP-1α显著上升(P<0.05)。结果表明,低剂量的ZEA、DON及其联合均能不同程度地降低李斯特菌感染小鼠血清中免疫相关细胞因子的水平,说明ZEA、DON及其联合作用下机体对李斯特菌感染的防御能力降低;但在经剂量下,ZEA和DON联合暴露对小鼠血清中免疫相关细胞因子表达表现出具有一定的拮抗作用。
- 许晴雨夏苏干蔡国栋邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇李斯特菌抗体芯片
- 围产期奶牛血清糖、脂代谢变化的研究被引量：10
- 2017年
- 围产期包括干奶后期（产前2～3周）和泌乳初期（产后2～3周）,奶牛从妊娠转入泌乳阶段。奶牛在围产期会出现许多生理特性变化,主要表现为产犊前后营养需求和代谢的不同。在产后1周奶牛会大量消耗自身储存的能源物质,出现能量负平衡。
- 严磊王家晶姚璐连张家铭顾建红袁燕卞建春刘宗平刘学忠
- 关键词：代谢变化奶牛能量负平衡泌乳初期泌乳阶段
- 钙对体外培养鸭破骨细胞活性的影响
- 2007年
- 刘俊栋王子轼顾建红黄秀明王涛周新民李建基刘宗平
- 关键词：细胞活性养鸭骨骼疾病矿物元素相关性疾病
- 公务员职业道德形象评价矮化的原因分析被引量：4
- 2015年
- 有人认为,公务员职业道德素质不高是导致社会"仇官"和官民矛盾激化的根本原因,这是似是而非的观点。人们对公务员职业道德评价普遍存在矮化的倾向,主要原因有:社会大众对公务员群体的误解多于了解与理解;公务员群体既有职业道德素质与民众过高的道德期待之间存在较大落差;人们对公务员群体部分成员知行不一现象缺乏辩证的认知;意识网媒化与网络媒体对公务员群体部分成员消极腐败现象放大化。对公务员的职业道德评价与对我国改革开放以来的历史评价具有同向性和同质性。公务员群体职业道德的主流是:对公务员职业道德的认知与认同度有了显著提高,规则意识、法律意识增强,服务意识、奉献精神增强。
- 黄明理顾建红
- 关键词：公务员职业道德矮化
- 拉沙里菌素单克隆抗体的研制及间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2017年
- 为制备拉沙里菌素(LAS)单克隆抗体,建立针对LAS的间接竞争ELISA(Ci-ELISA)方法,试验采用了活性酯法将LAS分别与BSA和OVA偶联成LAS-BSA和LAS-OVA作为免疫原和检测原,6次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,最终筛选出一株能稳定分泌抗LAS单克隆抗体的杂交瘤细胞株C11。经鉴定,C11的抗体类型为Ig G1,轻链为κ链;所制腹水效价为1∶16 000,与莫能菌素钠、盐霉素钠、马杜霉素胺、头孢噻吩钠和硫酸链霉素均无交叉反应。用此单克隆抗体建立LAS Ci-ELISA检测方法显示,Ci-ELISA标准工作曲线为y=0.376x-0.2374(R2=0.9914),LAS在5~1 000 ng/m L时,线性关系良好,IC50为90.22 ng/m L,加标回收率为81.76%~102.41%,表明方法精确度好、灵敏度高。LAS单克隆抗体的制备和Ci-ELISA方法的建立为下一步试剂盒的研发奠定了基础。
- 杨小康张绘艳顾建红顾建红卞建春袁燕刘学忠
- 关键词：拉沙里菌素半抗原单克隆抗体间接竞争ELISA
- 伏马毒素B_1单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- 为了制备伏马毒素B1（FB1）单克隆抗体,建立针对FB1快速、简便、灵敏的检测方法,试验用戊二醛一步法分别偶联FB1与BSA和OVA作为免疫原和检测原,5次免疫后取脾细胞与SP2/0融合。结果表明：共筛选出2株能稳定分泌抗FB1单克隆抗体杂交瘤细胞,选取其中1株5F5杂交瘤细胞制备小鼠腹水,所制腹水效价达到1∶256000,其半数抑制浓度（IC50）为6.1ng/mL,检测下限（LOD）低于0.05ng/mL。回收率在84.20%-102.60%之间,变异系数为2.48%-8.79%。制备的单克隆抗体对FB1抑制率为100%,与呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、α-玉米赤霉烯醇（α-ZOL）等基本无交叉反应。
- 范文桐项自来徐辉王光光王冰洁蔡国栋王凤丽顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤间接竞争ELISA
- ERK信号在玉米赤霉烯酮诱导的睾丸支持细胞自噬中作用的研究被引量：3
- 2017年
- 为探讨玉米赤霉烯酮(ZEA)雄性生殖毒性作用机理,本试验以睾丸支持细胞TM4细胞系为对象,研究了ZEA对睾丸支持细胞自噬及相关信号通路的影响。试验分别以浓度为0、0.1、1、10、20、30 mol/L的ZEA进行染毒,24 h后,利用CCK-8、激光共聚焦,透射电镜、Western-blot等技术检测了ZEA对TM4细胞的存活率、自噬,MAPK信号通路的影响以及MAPK信号通路与自噬的相互关系。免疫荧光结果显示,随着ZEA浓度的升高,TM4细胞内LC3聚点数量显著升高,酸性囊泡的个数增多;Western-blot结果显示,自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin-1、ATG5、ATG7表达显著升高,而P62蛋白表达显著下降(P<0.05或P<0.01);MAPK信号通路中ERK1/2磷酸化水平显著升高(P<0.05或P<0.01),加入ERK磷酸化抑制剂U0126后,ZEA诱导TM4自噬水平显著下降(P<0.05或P<0.01)。结果表明,在一定浓度范围内,玉米赤霉烯酮可以诱导TM4细胞产生自噬,且发生自噬与ERK信号通路激活有关。
- 王冰洁冯楠楠郑王龙薛画眉达剑森邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春
- 关键词：玉米赤霉烯酮睾丸支持细胞自噬ERK
