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小班化实验课程教学改革被引量：5: 2012年; 随着教学改革的推进,现在的教学方式已经从知识教学转向主题教学。生物科学与转化医学实验、现代生物学综合实验等实验课程在教学改革的过程中,实行小班化教学,注重学生能力、兴趣的培养。本文从教学内容、教学方法和考核手段、问题及不足之处等方面入手,探讨小班化实验教学改革的思路。实践表明:小班化实验课程教学改革的实施,获得了较好的学习效果。; 陈平康九红顾华苏雅娟常建锋; 关键词：教学改革

Tat-MANF融合蛋白的制备及生物活性研究被引量：1: 2014年; 目的:构建用于表达具有Tat序列的新型神经营养因子MANF(mesencephalic astrocytederived neurotrophic factor)融合蛋白(Tat-MANF)的重组质粒;利用原核细胞表达系统表达该重组蛋白,并检测其生物学活性。方法:以MANF cDNA为模板,利用PCR技术在上下游分别添加TAT序列和His标签及合适的限制性酶切位点,构建TAT-MANF融合基因。插入表达载体Pet22b+后,转化大肠杆菌BL21进行表达和纯化,用SDS-PAGE及Western印迹鉴定表达的重组蛋白。为了验证Tat-MANF的生物学活性,用30μmol/L浓度的6-羟多巴胺(6-OHDA)对神经母胶质瘤细胞(SH-SY5Y)进行毒性诱导,同时加入2μg/ml的TAT-MANF及对照MANF蛋白,24h后用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。用脑微血管内皮细胞(B-endo3)体外模拟血脑屏障,与FITC标记的TatMANF共孵育4h,荧光显微镜下观察。结果:成功构建TAT-MANF融合基因,表达产物与目的蛋白大小相符,能与MANF抗体发生结合反应。重组蛋白可减少由6-OHDA导致的SH-SY5Y细胞凋亡,Tat-MANF-FITC与B-end3细胞共孵育4h后,可见细胞内明显荧光。结论:获得的重组蛋白Tat-MANF具有神经细胞保护作用及跨膜功能,为进一步开展帕金森症的体内治疗研究奠定了物质基础。; 李晨顾华郭佳孙慧黄经纬蒋明靳令经房健民; 关键词：帕金森症跨膜蛋白融合蛋白

CRISPR-dCas9系统在基因表达调控中的最新研究进展被引量：2: 2016年; CRISPR-Cas9系统自问世以来一直被广泛地应用于基因组编辑技术中,直到人们通过点突变的方式将Cas9的Ruv C和HNH剪切结构域失活得到d Cas9后,这个系统又有了新的功能——调节基因的表达水平。研究者通过改变g RNA的结构,并与RNA结合蛋白配对,从而招募转录因子以调节基因的转录水平,达到影响基因表达的目的。本文主要讨论了CRISPR-d Cas9系统的结构特点、作用原理和目前对调节基因表达的最新研究进展,以期为此领域的研究者提供参考。; 罗旻顾华; 关键词：CRISPR

壳聚糖类天然产物库的构建方法及其筛选方法: 本发明涉及一种壳聚糖“类天然产物库”的构建方法及其筛选方法。本发明采用壳聚糖或者壳聚糖衍生物进行多样导向合成，利用酰化反应和亚胺化反应，对壳聚糖链中的-OH和-NH<Sub>2</Sub>进行差异化修饰，并通过模块化的操...; 蒋明顾华; 文献传递

《分子生物学》双语教学的几点体会: 本文介绍了我校在2006-2007年第二学期进行了分子生物学教学改革:选用原版教材、开展双语教学的经验以及经过一个学期的教学,本人对分子生物学双语教学的一些体会。; 顾华; 关键词：分子生物学双语教学教学改革原版教材; 文献传递

从“被动授课”到“主动学习”的个性化培养教学改革实践探索被引量：3: 2014年; 随着网络等科技的快速发展,学生获取知识途径多渠道,传统的授课已不能满足现代人才培养的需要,如何激发学生自主学习已成为教学改革的重要内容,本文重点研究基于个性化教学改革目标,探讨从被动听课到自主学习,发挥学生的主观能动性。通过课程教学实施,获得了较好的学习效果。; 陈平刘鸣宇顾华王美艳李亚宾; 关键词：个性化培养教学改革

重组抗c-Met嵌合抗体的构建及其利用慢病毒快速表达被引量：2: 2017年; 文章采用兼并引物逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)从特异性分泌抗人c-Met阻断型单克隆抗体的杂交瘤细胞株3E1D7中扩增抗体重、轻链可变区基因(V_H和V_L)。通过重叠延伸PCR(splice overlap extension PCR,SOE-PCR)方法分别将鼠源V_H与人IgG1的重链恒定区基因Cγ1相连,鼠源V_L与人IgG1的轻链恒定区基因Cκ相连获得嵌合抗体重链基因(H)和轻链基因(L)。将嵌合抗体重、轻链基因连接到慢病毒表达载体中,经双酶切和测序鉴定成功构建了慢病毒表达质粒pRRL-CMV-ch3E-H和pRRL-CMVch3E-L。磷酸钙法转染293T细胞,表达的嵌合抗体经Protein A Sepharose 4B亲和层析柱纯化,通过SDSPAGE检测抗体的完整性,ELISA法检测嵌合抗体的特异性抗原结合活性及人源性。感染慢病毒的293T细胞上清纯化后,经SDS-PAGE分析,可见25kDa嵌合抗体轻链和50kDa的嵌合抗体重链蛋白。且纯化后的嵌合抗体能够与c-Met抗原特异性结合成功获得重组抗人c-Met嵌合抗体,该抗体减少了鼠源成分,降低了免疫原性,利用慢病毒可以快速获得大量重组抗体蛋白,为该抗体药物的体内外评估奠定基础。; 张龙真郭佳顾华房健民; 关键词：肝细胞生长因子嵌合抗体慢病毒表达载体

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顾华