陆新江 作品数:43 被引量:101 H指数:6 供职机构: 宁波大学 更多>> 发文基金: 长江学者和创新团队发展计划 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 天文地球 更多>>
重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法 本发明公开了重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法,特点是包括将人工合成的人源LECT2基因插入胞外表达载体pPICZαA中构建重组表达质粒的步骤;酶切线性化后电击导入毕赤酵母X33中,获得重组工程菌株的步骤... 陈炯 史雨红 章瑞程 陆新江 李长红 李明云传染性脾肾坏死病毒的超分支滚环扩增检测方法 本发明公开了传染性脾肾坏死病毒的超分支滚环扩增检测方法,特点是包括以下步骤:(1)设计1条锁式探针和1对针对锁式探针连接序列的通用引物;(2)配制锁式探针连接反应体系,进行连接反应;(3)配制HRCA反应体系,进行HRC... 陈炯 史雨红 孔诚将 陆新江 李登峰 李明云香鱼成熟卵母细胞过熟进程中卵膜结构变化的扫描电镜观察 被引量:3 2013年 香鱼(Plecoglossus altivelis Temminck et Schlegel)俗称留香鱼、海胎鱼,日本人称为鲇鱼,是我国一种小型名贵经济鱼类,其肉质细嫩,味道鲜美,已在浙江、福建、广东、山东等地陆续开展了人工养殖。香鱼系裸卵巢,适当成熟卵母细胞排入到腹腔中,经历96h后仍能受精孵化,其受精率与孵化率分别还有10.83%和0.53%。 汤先念 苗亮 李明云 安钦 王成义 陈炯 史雨红 陆新江关键词:香鱼 过熟 卵膜 扫描电镜 细胞因子LECT2在鱼类和哺乳类免疫系统中的功能 白细胞源趋化因子2 (LECT2)是一种肝源细胞因子,参与多种免疫反应,但是其表达调控和下游分子机制不明确。我们前期研究发现鱼类LECT2在致病菌感染以后表达上调几十倍,然而小鼠在致病菌感染以后LECT2表达下调。以小鼠... 陆新江关键词:免疫系统 巨噬细胞 细胞因子 哺乳类 文献传递 香鱼CCL4-like基因的克隆、序列分析及免疫相关性表达变化分析 被引量:7 2013年 CC型趋化因子是一种多功能的趋化因子,是鱼类先天免疫系统的重要组成部分。该研究通过文库测序方法获得香鱼(Plecoglossus altivelis,ayu)CCL4-like(aCCL-like)基因cDNA序列。它编码一个由123个氨基酸组成的前肽,N-端22个氨基酸为信号肽序列。成熟肽包含4个半胱氨酸残基,可形成2个二硫键。系统进化树分析揭示,aCCL4-like与大西洋鲑(Salmo salar,atalantic salmon)CCL4亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析揭示,aCCL4-like基因mRNA在检测的健康香鱼7个组织中均有表达,其中肝的表达量最高;在鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)感染后,各组织中aCCL4-like基因mRNA表达均显著变化,但各时间点变化不一,其中肠组织的变化最为明显。随后原核表达了aCCL4-like并制备相关抗血清,Western blot分析揭示,鳗利斯顿氏菌注射后4 h的血清中CCL4-like含量无显著变化,8 h时显著增加,此后表现为持续增加。综上,aCCL4-like基因的表达变化与鳗利斯顿氏菌的感染过程密切相关,推测aCCL4-like可能在香鱼抗病原菌感染的免疫反应过程中有重要作用。 杨旦阳 陈炯 陆新江 史雨红 李明云关键词:香鱼 鳗利斯顿氏菌 实时荧光定量PCR 陆封型和洄游型香鱼体肾组织的蛋白质组学分析 被引量:3 2014年 香鱼(Plecoglossus altivelis)是典型的降海洄游鱼类,由于地理原因,一些香鱼在繁殖季无法回到海中产卵,形成陆封型香鱼。陆封型和洄游型香鱼相比,其体型明显偏小。鱼类的体肾组织可以调控渗透压,从而影响生长,因此我们采用蛋白质组学的方法研究陆封型和洄游型香鱼体肾组织蛋白质组的差异。双向电泳(2-DE)分析筛选到25个差异表达蛋白点,质谱分析成功鉴定出21个蛋白。与洄游型香鱼相比,陆封型香鱼体肾组织中NADH脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、α-微管蛋白、热适应相关蛋白65(Wap65)、热休克蛋白60(HSP60)、丙酮酸脱氢酶(E1)、碳酸酐酶、烯醇酶和乳酸脱氢酶表达量较高。同时陆封型香鱼的β-肌动蛋白、铁蛋白、氨基酰化酶、甲硫氨酸腺苷转移酶、过氧化物酶、丙氨酸乙醛酸转移酶和磷酸烯醇丙酮酸羧激酶则表达量较低。它们主要参与能量代谢、应激反应、氨基酸代谢等过程。由于Wap65、HSP60和E1 3种蛋白在蛋白质组学结果中表达改变,且与应激和能量代谢有关,可能影响鱼类生长,因此采用荧光定量PCR(RT-PCR)验证陆封型和洄游型香鱼体肾Wap65、HSP60和E1基因mRNA表达差异,结果表明这3个基因mRNA表达均在陆封型香鱼体肾中较高,与蛋白质组学结果一致。综上,陆封型香鱼的几个糖酵解相关酶和应激蛋白表达量比洄游型香鱼高,而蛋白代谢相关酶表达量较低,揭示陆封型和洄游型香鱼在环境应激和能量代谢等层面有明显的差异。 陈强 陆新江 黄左安 陈炯关键词:香鱼 陆封型 蛋白质组学 响应面法优化可口革囊星虫胶原抗氧化肽的制备研究 2014年 本研究对可口革囊星虫抗氧化肽的制备条件进行了优化。通过酶解筛选试验确定最佳用酶为木瓜蛋白酶。在单因素试验基础上确定酶解时间、加酶量和料液比为自变量,以总抗氧化能力(T-AOC)为响应值,通过响应面法分析得出最优条件为酶解时间为4.28h,加酶量为3614U/g,料液比为1∶36,参考实际因素,将提取条件调整为酶解时间4.25h,加酶量3600U/g,料液比1∶36,该条件下实际测得可口革囊星虫胶原抗氧化肽的T-AOC为3.8U/mg。 项欢 刘连亮 陆新江 史雨红 陈炯关键词:可口革囊星虫 响应面 胶原多肽 抗氧化 用于鳗利斯顿氏菌的LAMP-LFD检测的引物和探针 本发明公开了鳗利斯顿氏菌的LAMP-LFD检测方法,包括鳗利斯顿氏菌empA基因克隆和测序步骤,设计三对LAMP的引物FIP、BIP、LF、LB、F3、B3和一条探针Van-HP步骤,其中Van-FIP为5’端生物素标记... 陈炯 李明云 史雨红 陆新江 李登峰 史西志 丁文超文献传递 一种可口革囊星虫多糖的制备方法及应用 本发明公开了一种可口革囊星虫多糖的制备方法及可口革囊星虫多糖的应用,可口革囊星虫粉先灭内源酶,再通过枯草杆菌蛋白酶和Alacase蛋白酶组成的组合酶酶解,酶解液三级过滤后,真空浓缩干燥得到可口革囊星虫多糖,该制备方法制作... 陈炯 刘连亮 孔帅 陆新江 史雨红文献传递 香鱼镉胁迫相关基因UraD的特征和表达分析 被引量:1 2013年 2-氧-4-羟基-4-羧基-5-脲基咪唑啉脱羧酶(UraD)是嘌呤代谢反应酶,目前鱼类UraD基因仅在斑马鱼等少数物种得到克隆分析。从香鱼克隆获得UraD的cDNA序列,全长为967 bp,编码一个由174 aa组成的分子量为19.6kDa的蛋白,等电点为5.42。系统进化树分析显示香鱼UraD位于鱼类UraD簇中,与爬行类和哺乳类的亲缘关系较远,香鱼与斑马鱼UraD的蛋白序列相似性最高达70%。香鱼UraD表达经过反转录PCR(RT-PCR)检测发现在香鱼肝、心和肠中具有较高表达。香鱼肝组织中UraD表达量经过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测,发现镉胁迫下显著减少,香鱼UraD表达在盐度胁迫和鳗利斯顿氏菌感染下表达量保持不变。上述结果揭示香鱼UraD基因的基本特征,说明香鱼UraD基因表达与镉胁迫密切相关。 陈强 陆新江 陈炯 史雨红关键词:香鱼 镉胁迫 实时荧光定量PCR