郝伟
- 作品数：22 被引量：130H指数：8
- 供职机构：烟台毓璜顶医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金烟台市科学技术发展计划项目更多>>
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- 兔脂肪干细胞的分离培养鉴定及成骨诱导分化研究被引量：7
- 2006年
- [目的]探讨在成骨诱导条件下兔脂肪干细胞的体外诱导分化情况。[方法]取3个月龄日本大耳白兔颈背部皮下脂肪,用Ⅰ型胶原酶消化获得细胞。Stro-1免疫细胞化学染色鉴定细胞性质;加入成骨诱导液后依次进行形态学、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶及钙盐沉积相关检测。[结果](1)原代所获细胞Stro-1表达阳性。(2)在诱导条件下,Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶及钙盐沉积均呈阳性表达。[结论]脂肪干细胞来源广、易获取、对机体创伤小,与骨髓间充质干细胞类似,经体外诱导后可实现成骨分化,为骨组织工程提供了一种新的种子细胞。
- 郝伟胡蕴玉魏义勇庞龙白建萍吕荣王军张大伟
- 关键词：脂肪干细胞成骨分化骨组织工程
- 大鼠绝经后骨质疏松脂肪来源干细胞成骨分化研究被引量：2
- 2015年
- 目的观察绝经后骨质疏松发生后脂肪来源干细胞（opASCs）成骨分化。方法成年SD大鼠切除双侧卵巢，12周后建立绝经后骨质疏松动物模型（OVX组），同时设立假手术组动物模型（sham组）作为对照。取两组大鼠皮下脂肪组织分离获得脂肪来源干细胞（OVX组：opASCs；sham组：ASCs），进行体外成骨诱导培养。对其碱性磷酸酶（1周后）及细胞外基质矿化（2周后）程度进行定性及定量检测。同时通过反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）观察成骨特异性基因包括I型胶原（COL）、骨钙蛋白（OC）、骨唾液蛋白（BSP）的相对表达水平。结果双侧卵巢去势后12周，OVA组股骨骨密度系统性下降[骨密度（BMD）：（0．152±0．005）g／cm2]，显著低于sham组（P〈0．05），提示骨质疏松动物模型成功建立。opASCs成骨诱导7d后碱性磷酸酶呈高效表达（偶氮耦联法胞质紫红色），14d后vonKossa染色呈黑色，提示胞外基质矿化。与ASCs比较，碱性磷酸酶[7d：（0．156±O．021）nmol／（μg·min）；14d：（0．506±0．039）nmol／（±g·min）]及胞外基质矿化（7d：23．525±3．325；14d：61．456±2．634）差异无统计学意义（P〉0．05）。而且opASCs展现出与ASCs类似的COL（1d：0．014±0．001；7d：0．225±0．015；14d：0．387±0．004）、OC（1d：0．015±0．002；7d：0．276±0．009；14d：0．542±0．014）、BSP（1d：O．018±0．001；7d：0．365±0．012；14d：0．645±0．014）表达水平（P〉0．05）。结论来源于绝经后骨质疏松动物模型的opASCs具有与健康动物来源ASCs类似的成骨分化潜能。
- 姜传强姜明郝伟林江涛葛俊波左海宁
- 关键词：绝经后骨质疏松脂肪来源干细胞成骨分化骨组织工程
- 重组骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子共转染骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石／重组类人胶原基／聚乳酸复合支架材料支架修复桡骨缺损研究被引量：8
- 2013年
- 目的探讨重组人骨形态发生蛋白2（rhBMP-2）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）双基凶共转染兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）复合纳米羟基磷灰石／重组类人胶原基／聚乳酸复合支架材料（nHA／RHLC／PLA）支架构建新型骨组织工程复合体用于修复自体桡骨缺损。方法首先构建兔1．5cm桡骨缺损模型，将体外培养BMSCs经基因转染后与nH_A／RHLC／PLA支架复合构建骨组织T程复合体。分别设立：双基因rhBMP-2和bFGF转染组（A组）、单基因转染组（rhBMP-2：B组；bFGF：C组）、末干预组（D组）、空白材料组（E组）。将各组移植于骨缺损部位，同时设立空白缺损组（F组）作为对照，于术后6、12周取材，行影像学及组织学定性、半定量分析。结果术后6周，A组有明显新骨形成，成骨面积比例为（47．24±4．37）％，高于B组的（28．24±2．35）％、C组的（13．46±2．27）％（P〈0．05），D、E组无明显骨化现象。术后12周，A组骨断端连续性恢复，髓腔冉通，成骨面积比例为（96．84±2．28）％；B组骨断端连续性恢复但髓腔尚未完全再通，成骨面积比例（92．24±1．75）％；C组成骨面积比例（24．73±2．01）％，D组可见少量成骨，E组无骨化现象，C、D、E组骨缺损均未修复，A组明显高于其他组（P〈0．05）。结论采用rhBMP-2及bFGF双基凶转染BMSCs并与nHA／RHLC／PLA支架复合构建新型骨组织工程复合体，具有较理想的骨缺损修复潜能。
- 郝伟姜明王新周东生
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞骨缺损
- 不同复合方式对上皮参与牙齿发育的影响
- ＜正＞目的:将上皮与牙源性组织以不同方式复合,探讨上皮参与牙齿发育的能力及方式。方法:将出生1d的SD仔鼠背部皮肤的表皮皮片与发育时期及发育完成后的牙源性组织复合。根据牙源性组织的不同,实验分10组。所建立的复合物均经S...
- 姜明金岩聂鑫张勇杰郝伟刘艳
- 文献传递
- 四种颈椎前路钢板的临床应用比较
- 2009年
- 目的探讨四种颈椎前路钢板的优缺点及临床应用价值。方法采用Caspar、Codman、AO(CSLP)及Orion四种颈椎前路钢板行颈前路植骨加钢板内固定治疗颈椎疾患145例,随访6～18个月,观察各固定系统的稳定性、融合率及并发症。结果93.7%(136/145例)患者神经功能获得不同程度的恢复。4种钢板螺钉固定系统融合率无显著差别,术后无钢板螺钉断裂、松动、植骨块脱出等并发症。结论四种颈前路钢板对稳定颈椎、促进植骨融合、恢复和维持椎间高度及生理曲度均具有积极意义。Orion钢板螺钉系统固定效果更好,且更易操作。
- 张晓君王飞郝伟孟庆溪张云昌赵廷宝
- 关键词：颈前路钢板内固定
- 大鼠牙髓干细胞与牙乳头间充质细胞成牙能力的比较研究被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨采用牙髓干细胞替代牙乳头间充质细胞进行牙齿再生研究的可行性。方法:分别分离培养6周龄SD大鼠切牙牙髓干细胞(DPSCs)和出生1d的SD仔鼠切牙牙乳头间充质细胞(DPMCs),对上述2种细胞的表面标记、增殖能力、体外矿化能力以及向成牙本质细胞分化能力进行比较。结果:DPSCs与DPMCs均具有较强的增殖能力和矿化能力,体外诱导均有成牙本质细胞特异性标记物DSPP基因表达,体内移植后均能够形成牙本质样结构。结论:DPSCs是一种较为理想的牙胚间充质细胞的替代细胞,在适宜的诱导环境中能够替代DPMCs进行牙齿的再生研究。
- 姜明金岩郝伟唐亮张勇杰李园
- 关键词：牙髓干细胞成牙本质细胞
- 二维导航与三维导航在经皮骶髂空心钉内固定手术的应用对比被引量：2
- 2013年
- 目的 比较二维导航与三维导航系统在经皮骶髂空心钉内固定手术中应用的优缺点,并结合两种导航系统优点找到一种更简便、安全的手术方式.方法 分析自2008年6月至2012年10月共41例行经皮骶髂空心钉固定的病例,根据手术方式分为A、B、C3组,A组在二维导航系统辅助下完成手术固定；B组在三维导航系统辅助下完成手术固定；C组在二维导航系统辅助下打入空心钉导针,术中进行3D C臂机扫描验证后行空心钉固定.比较3组手术每枚空心钉置入时间、曝光次数、突破S1椎弓皮质次数.结果 41例患者共置入空心螺钉44枚,平均螺钉置入时间：A组（51.2±5.6）min；B组（67.7±10.7）min；C组（55.3±4.0）min.平均透视次数：A组（74.7±5.6）次；B组（144.1±2.1）次；C组（104.3±1.0）次.除A组1枚螺钉突破S1骨皮质外,其余各组均无螺钉突破S1皮质.结论 结合二维及三维透视导航的优缺点,用二维透视导航系统辅助下打入空心钉导针再行3D C臂机透视扫描验证后行空心钉固定的方法,较三维透视导航手术的手术时间及透视时间短,且与三维透视导航同样具有较高的螺钉置入准确率.
- 孙煜杰周路纲刘洪智郝伟倪建强王新
- 关键词：导航系统骶髂螺钉内固定
- 基于脂肪干细胞I型胶原凝胶PLGA-β-TCP支架的新型仿生骨组织工程复合体的构建及生物学性能被引量：11
- 2008年
- 目的:尝试构建基于脂肪干细胞、I型胶原凝胶以及PLGA-β-TCP支架的新型仿生骨组织工程复合体,并对其生物学性能进行研究.方法:取3 mo龄日本大耳白兔皮下脂肪,获得脂肪干细胞,经体外成骨诱导分化鉴定后使用I型胶原凝胶将其悬浮并与三维多孔支架PLGA-β-TCP复合,从而构建成脂肪干细胞-I型胶原凝胶/PLGA-β-TCP骨组织工程复合体,体外成骨诱导培养2 wk,实验以脂肪干细胞/PLGA-β-TCP材料复合体作为对照.扫描电镜观察复合情况,并对脂肪干细胞的增殖以及成骨诱导分化情况进行检测.结果:I型胶原凝胶将rADSCs均匀悬浮于材料孔隙中,碱性磷酸酶活性以及细胞外基质矿化程度检测显示I型胶原凝胶能显著促进rAD-SCs的成骨分化.结论:脂肪干细胞-I型胶原凝胶/PLGA-β-TCP复合体的构建成功为骨组织工程复合体的设计提供了一条新的思路.
- 郝伟胡蕴玉姜明吕荣王军赵廷宝
- 关键词：脂肪干细胞骨组织工程
- 重组人骨形成蛋白2诱导脂肪成体干细胞向软骨分化的形态学研究被引量：10
- 2006年
- 目的探索分离培养兔脂肪成体干细胞,经重组人骨形成蛋白2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein2,rhBMP-2)定向诱导后,向软骨细胞分化的可能。方法将4月龄新西兰兔脂肪组织机械分割,通过型胶原酶消化后得到脂肪成体干细胞(adipose-derivedadultstemcells,ADASCs),采用微球方法进行培养,在rhBMP-2诱导组、重组人转化生长因子β1(recombinanthumantransforminggrowthfactorβ1,rhTGF-β1)诱导组和rhBMP-2+rhTGF-β1(共同诱导组)干预6d后,各组诱导液中分别加入维生素C50μg/ml,再干预8d,应用HE、Alcianblue、Vonkossa染色和型胶原免疫组织化学染色等组织学方法对诱导后的细胞进行鉴定。结果连续诱导培养14d后,各诱导组HE染色显示软骨陷窝形成,对照组软骨陷窝形成不明显。Alcianblue染色见细胞基质中富含蛋白多糖,胞外基质分泌较多的型胶原;但Vonkossa染色为阴性;对照组均为阴性。结论在微球方法培养下,通过相关形态学研究表明,rhBMP-2具有诱导脂肪成体干细胞向软骨细胞分化的能力,将为采用ADASCs修复软骨损伤奠定理论基础。
- 魏义勇胡蕴玉郝伟吕荣王军白建萍
- 关键词：软骨细胞
- 3.0 T核磁共振在大鼠体内示踪环氧化酶-2基因沉默的干细胞
- 2017年
- 目的利用临床3.0 T核磁共振成像（MRI）对通过尾静脉注射Molday ION Rhodamine-B^TM（MIRB）标记慢病毒介导环氧化酶-2（COX-2）基因沉默的人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）的大鼠活体示踪。
方法利用慢病毒介导在hBMCSs中沉默COX-2基因，通过反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测基因表达。将转基因hBMSCs进行新型氧化铁颗粒MIRB标记，测定最佳标记浓度，通过细胞计数试剂盒（CCK-8）测定标记后细胞增殖能力，分组检测细胞成骨、成脂能力。将MIRB标记、慢病毒介导COX-2基因沉默的hBMSCs，单纯hBMSCs与磷酸盐缓冲液（PBS）分为3组，分别通过尾静脉注射的方法注射入大鼠体内。分别于注射后1 h、7 d、14 d通过临床3.0 T MRI检测大鼠脑、肝脏，检测后处死大鼠，取脑、肝脏组织石蜡切片，通过荧光显微镜观察组织内荧光，普鲁士蓝染色观察组织内铁粒子位置。
结果通过RT-PCR和Western blot证实COX-2在hBMSCs中成功敲除，与对照组比较，MIRB浓度为10 μg Fe/ml时标记率可达到90%，当浓度上升到20 μg Fe/ml时标记率可达到98%，浓度为50 μg Fe/ml时标记率与20 μg Fe/ml时比较差异无统计学意义，MIRB浓度〈50 μg Fe/ml时对转基因干细胞可成功标记并不影响其分化、增殖能力。在大鼠体内注射7 d后，通过MRI梯度回波T2加权在大鼠肝脏组织内发现低信号逃避区域，并随时间延长逐渐加强，注射14 d后低信号区域趋于稳定，通过组织切片在大鼠肝脏血管、血窦、肝小叶间和被膜中发现铁粒子的存在。
结论MIRB对转基因干细胞具有生物安全、高效标记、多重方法检测的优点。MIRB标记的慢病毒介导COX-2基因沉默的hBMSCs在注射入大鼠体14 d内，可以通过3.0 T MRI检测并且追踪。
- 赫天张海宁荣春刘洪志周路刚孙煜杰郝伟王新
- 关键词：环氧化酶-2慢病毒干细胞移植
