赵跃然
- 作品数：172 被引量：619H指数：12
- 供职机构：山东大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 人瘦素的基因克隆及其在COS-7细胞中的表达被引量：4
- 2003年
- 目的 构建重组人瘦素哺乳细胞表达载体并在COS 7细胞表达重组人瘦素。方法 提取脂肪细胞总RNA ,用RT PCR扩增人瘦素cDNA并克隆至载体 pUCm T ,并对克隆基因进行DNA序列分析。以克隆的人瘦素cDNA为模板 ,用特异引物扩增瘦素基因 ,经KpnI和BamHI酶切 ,插入相应酶切的哺乳细胞表达载体pcDNA3 ,构建重组哺乳细胞表达载体并转染COS 7细胞 ,RT PCR和Western印迹检测其在COS 7细胞中的表达。结果 RT PCR扩增的DNA片断和预期的人瘦素cDNA大小一致 ;序列分析显示 ,克隆的基因序列和文献报道的人瘦素基因序列一致 ;经RT PCR和Western印迹鉴定 ,转染的COS 7细胞可表达、分泌人瘦素。结论 构建了人瘦素的哺乳动物细胞表达载体 ,并成功地在COS 7细胞中获得重组人瘦素的分泌表达。
- 董秀华赵跃然游力冯进波许晓群田志刚刘伟李洁清侯殿俊乔建维商希梅
- 关键词：基因克隆COS-7细胞基因表达激素
- 人Leptin的cNA克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达
- 2001年
- Leptin是近年来发现的调节机体内分泌和能量代谢的最重要的肽类激素,其由脂肪细胞合成、分泌,作用于下丘脑的Leptin受体,促进下丘脑神经肽的分泌,或直接作用于靶细胞的Leptin受体,产生广泛的生物学效应.
- 王郡甫赵跃然田志刚游力高春义刘金生孙汭
- 关键词：LEPTINCDNA克隆大肠杆菌
- 肺癌患者GST-π基因表达及活力测定的临床意义
- 2002年
- 采用RT-PCR法、化学比色法对60例经纤维支气管镜活检的肺癌组织及20例非癌组织进行酸性各胱甘肽S-转移酶(GST-π)检测,并动态检测肺癌患者化疗前后血浆GST-π活力。结果显示GST-π在肺癌组织中的表达阳性率45％(27/60)明显高于非癌组织的表达阳性率13.3％(3/20),腺癌阳性率最高64.7％(11/17),鳞状细胞癌次之45.5％(15/33)、小细胞未分化癌无阳性表达。肺癌组织中GST-π的表达与血浆GST-π活力呈正相关(P<0.05)。肺癌患者血浆GST-π水平明显高于对照组,与疗效呈正相关(P<0.05)。肺癌GST-π基因表达及化疗前后血浆GST-π活力变化对肺癌化疗方案的选择及疗效判断均有一定指导意义。
- 姜淑娟张忠法尚建强赵跃然李怀臣
- 关键词：肺癌化学方法
- 全文增补中
- 胃癌患者外周血单核细胞Th1和Th2类细胞因子基因表达变化及其临床意义的分析被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th1和Th2类细胞因子mRNA表达变化及其临床意义。方法:采用RT-PCR技术,检测102例胃癌组织化疗前后、60例胃良性疾病组织和50例正常对照组织PBMC中Th1和Th2类细胞因子mRNA表达。结果:正常对照及胃良性疾病组PBMC中Th1和Th2类细胞因子基因阳性率差异无统计学意义,P>0.05。胃癌组PBMC中IL-4、IL-6和IL-10 mRNA阳性率显著高于正常对照和胃良性疾病组(P<0.05),且与胃癌的分化程度及临床分期相关,P<0.05;IFNγ-仅3例阳性表达(3/102),IL-2有7例阳性表达,显著低于正常对照和胃良性疾病组;胃癌组化疗有效者PBMC中Th1类细胞因子阳性率增加,Th2类细胞因子的阳性率则减低,P<0.05;化疗无效者PBMC中Th1和Th2类细胞因子mRNA阳性率较化疗前差异无统计学意义,P>0.05。结论:检测Th1和Th2类细胞因子mRNA的表达对评价胃癌患者的免疫状况和疾病进展及指导临床对患者进行免疫调节治疗有一定的应用价值。
- 梁婧李岩刘晓琳许晓群赵跃然
- 关键词：逆转录聚合酶链反应细胞因子
- 重组hKGF2原核表达载体的构建及其蛋白质的纯化被引量：3
- 2007年
- 角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达。镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95%以上的目的蛋白,生物活性研究表明,重组hKGF2能有效促进人胚胎肾上皮细胞的增殖。
- 余德荣游力王郡甫许晓群赵跃然高春义
- 关键词：克隆原核表达
- HBV受体Na^+-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)研究新进展被引量：2
- 2015年
- Na+-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)是第10个溶质转运蛋白(SLC10)家族成员之一,在胆汁酸的肠肝循环过程中发挥重要作用。NTCP的表达受细胞因子、细胞内胆汁酸浓度、激素水平等因素的影响;NTCP基因的单核苷酸多态性(SNP)与种族有关。现已确定NTCP是HBV的功能性受体,这一发现为抗乙肝新药的研发提供了新的靶点和策略,也改变了HBV领域的研究方向和模式。
- 田景惠赵跃然
- 两个中国常染色体显性遗传性多囊肾病家系的表型与基因型分析被引量：5
- 2006年
- 目的研究中国人多囊肾病基因1(polycystic kidney disease1gene,PKD1)突变的特点,检测基因突变位点。方法25例多囊肾患者,正常对照16名,扩增PKD1基因的第44、45外显子的基因片段,变性梯度凝胶电泳突变检测系统进行初筛,然后测序。结果发现1个移码突变(12431delCT)、1个无义突变(C12217T)、1个多态性(A50747C),突变检测率为8%(2/25)。结论检测到2个新的可能的致病突变1个移码突变(12431delCT)、1个无义突变(C12217T)。
- 高德轩曹庆伟丁克家赵跃然王来成牛志宏吕家驹
- 关键词：常染色体显性遗传多囊肾病变性梯度凝胶电泳
- 人HMGB1真核表达载体的构建及其在单核细胞的表达
- 2009年
- 目的构建人高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达载体,并探讨其免疫调节作用。方法从HMGB1克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITE-EGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体。重组表达质粒转染人单核细胞系(U937),梯度G418筛选,荧光和Western blot检测HMGB1的表达。结果菌落PCR和酶谱分析显示目的基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITE-EGFP-HMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的蛋白HMGB1表达量明显升高。结论成功构建重组载体pCITE-EGFP-HMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础。
- 徐洁崔彬焦玉莲游力张捷刘晓雯曲芸芸朱敏孙新平赵跃然
- 关键词：高迁移率族蛋白质类真核细胞单核细胞
- 小鼠SLC基因真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2005年
- 次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)是重要的CC趋化因子,对多种免疫细胞特别是T淋巴细胞、树突状细胞(dendritic cell,DC)及NK细胞具有趋化作用.研究证实,SLC通过募集T淋巴细胞、DC和NK等免疫效应细胞到肿瘤组织、促进细胞因子的释放以增强肿瘤局部非特异性免疫以及抑制肿瘤血管生成等作用,达到其显著的抗肿瘤效果,是目前肿瘤免疫治疗的理想效应分子.为了进一步探索SLC在肿瘤基因治疗中的应用,我们构建了小鼠SLC基因的真核表达载体pVAX1-mSLC,为今后开展体内基因治疗肿瘤奠定基础.
- 侯丽赵跃然王来城焦玉莲张捷马春燕崔彬
- 关键词：基因真核表达载体次级淋巴组织趋化因子抑制肿瘤血管生成小鼠趋化作用效应分子
- 蜕膜组织杀伤细胞免疫球蛋白样受体与不明原因早期复发性流产的相关性被引量：2
- 2009年
- 目的探讨蜕膜组织杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)与不明原因早期复发性流产(URSA)易感性的关系。方法留取URSA妇女(病例组,36例)及正常早孕妇女(对照组,34例)的蜕膜组织,采用酚-氯仿法抽提基因组DNA,序列特异性引物聚合酶链反应检测蜕膜组织14种KIR基因的表达;Trizol一步法提取总RNA,逆转录聚合酶链反应分析KIRmRNA的表达率,荧光实时定量聚合酶链反应分析KIR2DL1、2DL3mRNA的相对表达量。结果①14种KIR基因均以不同频率表达;KIR2DS1基因的表达率在病例组与对照组中分别为60.27%、41.18%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);②6种抑制性KIRmRNA在蜕膜组织中均以不同频率表达,两组的表达率无统计学差异;抑制性KIRmRNA的表达率与KIR基因的表达率并不完全一致;③KIR2DL1mRNA及KIR2DL3mRNA在病例组与对照组中的相对表达量分别为699.37±259.78、1002.96±476.98和625.93±234.81,1216.12±425.96,两组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论蜕膜组织活化性KIR2DS1基因的表达率增加,抑制性、活化性KIR基因失衡,可能与URSA的发生有关。
- 徐金娥王珊赵跃然陈子江
- 关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体复发性流产蜕膜基因
