赵晓祥 作品数:35 被引量:452 H指数:9 供职机构: 黑龙江省科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 “九五”国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 化学工程 医药卫生 更多>>
简单快速分离无RNA的大肠杆菌质粒DNA的方法 被引量:1 1994年 本文介绍一种简单快速分离质粒DNA方法。此方法有两个主要步骤。用这种方法分离的质粒DNA纯度高、无RNA,并可用于酶切、连接等操作。 赵晓祥 杨志兴关键词:DNA 质粒DNA 大肠杆菌 一株具有纤溶活性的枯草杆菌(Bacillus Subtilis)的研究——液体发酵条件的选择 被引量:46 1997年 本文主要报告了,以BacilusSubtilisHW-12为试验菌株,在液体发酵中,所确定的发酵条件为:碳源是木糖,氮源是大豆胰蛋白胨,发酵液pH7.0,培养温度37℃,培养时间96小时。在这样的发酵条件下。 傅俐 李荣萍 李晶 张淑梅 张云湖 赵晓祥 杨志兴关键词:枯草杆菌 尿激酶 发酵 鲤鱼生长激素基因的改造及其在大肠杆菌中的表达 被引量:6 1995年 用聚合酶链式反应(PCR)改造了鲤鱼生长激素基因,扩增出编码鲤鱼生长激素成熟肽的序列,并将此序列克隆到pBluescriptⅡKS质粒中,序列分析后,亚克隆到大肠杆菌表达载体PBV(220)中。经SDS—PAGE和薄层扫描,结果表明鲤鱼生长激素基因已在大肠杆菌中获得表达。鲤鱼生长激素成熟肽的分子量为22000道尔顿,表达率占细胞总蛋白的18%以上。 赵晓祥 张淑梅 杨学成 李晶 李荣萍 杨志兴关键词:鲤鱼 生长激素基因 大肠杆菌 基因表达 液体发酵生产溶栓纳豆激酶技术 张云湖 李晶 李荣萍 赵晓祥 张淑梅 该成果从已获得的12株具有纤溶活性的枯草杆菌中筛选出2株产纳豆激酶、酶活性高的菌株,摸索出液体发酵罐产生纳豆激酶生长最适条件:pH值6.5,溶氧通气量1.5升/分钟,培养温度30℃,搅拌速度240转/分钟,生长时间在58...关键词:关键词:纳豆激酶 酶制剂 发酵 甲醇酵母基因表达系统的研究进展 被引量:73 1999年 在大肠杆菌这一传统表达系统被频繁用作研究各种基因表达时,一种新型且有效的基因表达系统——甲醇酵母正逐渐引起人们的注意。此系统不仅具有高表达、高稳定、高分泌的特点,而且其宿主甲醇酵母——巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)具有高密度生长的特性。因此近年来此表达系统的研究得到迅速发展,在其中表达了多种具有商业价值的外源蛋白。本文对甲醇酵母基因表达系统的特点及研究进展作一简要综述。 李晶 赵晓祥 沙长青 张淑梅 田洁萍关键词:甲醇酵母 基因表达系统 外源性 蛋白质 赤爱胜蚯蚓(Eisenib Foetide Sorigng)纤溶酶的研究 1.提取纯化和生物化学性质 被引量:3 1991年 采用35%和65%的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤溶酶的生物化学性质。 杨志兴 杨学成 张云湖 马元生 李洪超 刘伟民 赵晓祥 姜凯波 赵克强 董桂华关键词:蚯蚓 纤溶酶 美洲拟鲽抗冻蛋白基因(afp)导入番茄的研究 被引量:145 1997年 将整合在Ti质粒上的afp基因作为供体DNA,用花粉管通道和子房注射方法导入番茄品种“中蔬四号”中,对D1、D2代进行Southern杂交获得杂交带;田间抗寒性试验表明,在春季平均气温低于正常年份4·4℃条件下,转基因组植株生长势优于对照;致死温度也比对照降低2℃. 黄永芬 汪清胤 付桂荣 赵晓祥 杨志兴关键词:番茄 鲤鱼生长激素基因的PCR扩增、克隆及其序列比较 被引量:4 1996年 从鲤鱼(Cyprinus carpio)脑垂体中分离其总RNA,经反转录成为第一条链cDNA。以第一条链cDNA为模板,以合成的两段29个寡聚核苷酸为引物,再经过PCR扩增,合成了鲤鱼的生长激素基因,并把其克隆到大肠杆菌表达载体(p^(Blue-scriptⅡ KS+/-))上。序列分析和限制酶切图谱表明所克隆的鲤鱼生长激素基因的开放读框含有630bp,编码210个氨基酸,其中含有22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟GH序列。我们所克隆的鲤鱼GH基因与Koren发表的鲤鱼GHcDNA的序列在编码区完全一致,但是与Chao发表的鲤鱼GHcDNA比较,在编码区核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为95.6%和96.7%。 赵晓祥 李晶 李荣萍 张淑梅 杨志兴关键词:鲤鱼 生长激素基因 克隆 cGH Gene Transfer and PCR Detection in Crucian Carp 被引量:3 1996年 By inserting the CMV with HSV TK promoter into the plasmid pBlue-cGH which contained cGH gene, a chimeric expression vector was constructed for transgenic fish. After the vector was transferred into fertilized eggs of crucian carp by means of microinjection, the transgenic crucian carp was obtained. The result of PCR detection showed that the growth hormone gene of the exogenous carp was integrated into the genome of crucian carp, and the transgenic crucian carp displayed enhancement of its growth. 赵晓祥 张淑梅 李晶 李荣萍 杨志兴鲤鱼(Cyprinus carpio)生长激素基因的亚克隆及其序列分析 被引量:5 1995年 本文对PCR扩增的668bp的DNA片段进行了亚克隆,,然后以Sanger双脱氧中止法为原理,利用美国ABI公司370A自动核酸序列分析仪,确定了668hP的核苷酸序列。序列分析表明鲤鱼生长激素基因的开放读框含有630bp,并推测其中包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟多肽。鲤鱼生长激素基因的酶切图谱和序列分析的结果都证明我们已获得了全长的鲤鱼生长激素基因。 赵晓祥 杨学成 李晶 李莹 张淑梅 杨志兴关键词:鲤鱼 生长激素基因 亚克隆 DNA