赖百塘
- 作品数：109 被引量：203H指数：7
- 供职机构：首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市青年科技骨干培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗肺腺癌单链抗体的克隆、表达及应用的初步研究
- 目的:制备抗人肺癌单链抗体(Single Chain Fv ferment antibody,ScFv),并对生物学特性进行初步研究。探讨应用该抗体进行免疫导向治疗的可能性。方法:利用RT-PCR方法从5F-11杂交瘤细...
- 岳文涛赖百塘张春燕湛秀萍
- 文献传递
- 我所的肺癌细胞分子生物学研究
- 2006年
- 细胞分子生物学研究室前身为细胞免疫学研究室，1978年开始肺癌细胞分子生物学研究工作，1981年正式建立细胞生物学研究室，主任赖百塘，副主任汪惠。2000年，在市科委领导和卫生局大力支持下，建立了北京市肿瘤分子生物学实验室肺癌分室。在我所党委和所领导的关怀和支持下，研究室工作取得了长足的进步。建立了多种类型的6个人肺癌细胞系,制备了4种抗人肺癌的单克隆抗体，
- 赖百塘
- 关键词：人肺癌细胞系分子生物学研究细胞分子生物学肿瘤分子生物学细胞免疫学
- p53缺失和突变对人肺癌细胞系恶性表型影响的比较
- 2003年
- 目的 比较研究外源正义和反义p53对所转染细胞系恶性表型的影响。方法 构建正义和反义p53C—DNA真核细胞表达载体pEGFP—p53(RS)，pEGFP—p53(AS)，载体有绿荧光蛋白基因监测基因转染和表达。经酶切图证明p53正向或反向联结。Liipofectin介导转染801D细胞(801D细胞有p53缺失和突变，蛋白表达阳性)，G418筛选，建立单克隆细胞系。PCR检测外源p53和neo基因。荧光显微镜检查转染细胞绿荧光蛋白表达。免疫组化染色证明突变蛋白表达。比较了pEGFP—p53(AS)和pEGFP—p53(RS)集落形成试验，裸鼠移植试验。FCM分析细胞周期。结果 酶切图证明pEGFP—p53(RS)和pEGFP—p53(AS)的p53c—DNA(RS)分别正向和反向联结质粒pEGFP。Lipofectin介导转染细胞801D细胞，G418筛选，获耐受集落，建立单细胞克隆转染细胞系pEGFP—p53(RS)—801D，pEGFP—p53(AS)801D和pEGFP—801D。PCR检测外源p53和neo基因存在于细胞，细胞可见绿色荧光，证明外源基因存在并稳定表达。免疫组化检测pEGFP—p53(AS)—801D，突变蛋白呈阴性，母系为阳性，显示反义p53封闭突变蛋白表达。pEGFP—p53(RS)—801D和pEGFP—p53(AS)801D细胞集落形成率和裸鼠移植成瘤率均降低，pEGFP—p53(RS)-801D更低。FCM分析细胞周期延滞。结论 有p53缺失和突变的人肺癌细胞系801D体内外恶性增殖明显，在同一细胞背景下，p53缺失比p53突变对恶性增殖起更重要作用。外源野生型p53在肿瘤细胞中可重建抑癌功能，外源反义p53可封闭突变蛋白表达，阻止细胞停留于G1期。
- 汪惠赖百塘李金照扬学惠张春彦岳文涛张洪涛李曦湛秀萍王玥
- 关键词：基因突变人肺癌裸鼠细胞恶性表型
- 烟草特有亚硝胺NNK与肺癌的关系被引量：12
- 2005年
- 张同梅赖百塘
- 关键词：肺癌吸烟流行病学调查死亡率
- 5F11-DOX结合物对人肺腺癌细胞体内外抑制作用的研究被引量：1
- 2005年
- 背景与目的随着抗体技术的发展,越来越多的抗体复合物用于肿瘤的治疗。本研究试图探讨单克隆抗体化疗药物结合物5F11DOX在体内外对人肺腺癌A2细胞的抑制作用及其可能的作用机制。方法戊二醛法制备5F11DOX结合物,集落形成实验观察结合物对肿瘤细胞的体外杀伤作用,荧光显微镜观察DOX在肿瘤细胞中的分布,免疫组化检测抗体与肿瘤细胞的结合部位及分布。裸鼠皮下或腹腔内接种A2细胞异种移植瘤,比较5F11DOX与游离DOX的疗效。结果浓度为0.04mg/L的5F11DOX即可在体外杀死全部人肺腺癌A2细胞,5F11DOX是游离DOX作用的10倍。荧光镜检发现在DOX浓度为3mg/L时作用3h,去除药物,继续培养24h后,5F11DOX组的DOX荧光较游离DOX组强。免疫组化检测发现5F11定位于细胞膜与胞浆中,而荧光镜检发现DOX分布于细胞内。裸鼠皮下及腹腔内异种移植瘤治疗实验显示5F11DOX组裸鼠的移植瘤明显小于对照组和同剂量游离DOX组(P<0.05);5F11DOX疗效相当于4～8倍的游离DOX。移植瘤的病理切片HE染色显示,5F11DOX结合物组癌巢中央和周围均有大片的瘤组织坏死。结论5F11DOX结合物对人肺腺癌A2细胞的杀伤作用显著高于游离的DOX。
- 张同梅赖百塘湛秀萍
- 关键词：阿霉素免疫结合物
- 莱菔硫烷对人肺腺癌细胞生长的抑制
- 2008年
- 背景与目的近年许多研究表明．十字花科蔬菜可以减少患一些癌症的危险．因为十字花科蔬菜中含有异硫氰酸盐类抗癌物质。莱菔硫烷是迄今从蔬菜中发现的最强的抗癌成分。该研究旨在探讨莱菔硫烷对人肺腺癌细胞的体内外的抑制作用。方法集落形成抑制试验用以检测莱菔硫烷对A2细胞的体外抑制作用。流式细胞仪检测莱菔硫烷对A2细胞周期及凋亡的影响。A2细胞裸小鼠异种移植瘤用来研究莱菔硫烷对人肺腺癌细胞的体内疗效。结果莱菔硫烷对A2细胞处理24h的半数抑制浓度IC50为6．25μmol。延长处理时间或提高莱菔硫烷浓度可进一步增强莱菔硫烷的抑制作用。莱菔硫烷可引起明显的S期阻滞和A2癌细胞凋亡。腹腔注射莱菔硫烷50～75mg／kg体重，能减少A2细胞裸小鼠皮下异种移植瘤瘤重约50％。结论莱菔硫烷对人肺癌A2细胞的抑制显示有时间依赖性和浓度依赖性双重特征腹腔注射莱菔硫烷可抑制人肺腺癌A2细胞裸小鼠异种移植瘤的生长。
- 白连启赖百塘湛秀萍
- 关键词：肺肿瘤
- 人肺癌细胞系C—myc基因扩增和过度表达的研究被引量：1
- 1990年
- 本文报告了对7个人肺癌细胞系:鳞癌(LTEP-S).3个腺癌(LTEP-a_1,a_2,a_3),小细胞肺癌(LTEP-Sm_1),大细胞癌(PLA—801),以及它的克隆亚系(PLA801—D)和二倍体肺成纤维母细胞系进行DNA C-myc基因扩增和RNA表达研究的结果。从各细胞系提取DNA用EcoRI消化后进行索氏转移。同时按等倍稀释DNA。
- 汪蕙姚大鹏蔡德伟赖百塘
- 关键词：肺癌C-MYC基因细胞系扩增RNA
- 原发性肺癌GSTM1基因多态性与化疗效果关系的研究被引量：1
- 2008年
- 背景与目的GSTM1参与环境污染物如苯丙芘和其它多环芳烃及抗癌药等的代谢,其多态性是否会影响肺癌患者的化疗效果及预后,国内相关研究比较少,本研究旨在揭示GSTM1多态性是否与化学药物治疗的敏感性有关以及对患者预后的影响。方法采用聚合酶链反应技术,检测接受化学药物治疗的137例原发性肺癌患者GSTM1基因型频率分布情况。结果137例肺癌患者GSTM1缺陷型频率为58.4%(80/ 137),功能型频率为41.6%(57/137);化疗有效组GSTM1缺陷型频率为69.05%(58/84),化疗无效组GSTM1缺陷型频率为41.51%(22/53),二者有统计学差异(P=0.001)。采用铂类化疗方案的患者,化疗有效组GSTM1缺陷型频率为65.43%(53/81),化疗无效组GSTM1缺陷型频率为42%(21/50),二者有统计学差异(P= 0.0025)。对于进展期患者化疗有效组GSTM1缺陷型频率为70.13%(54/77),化疗无效组GSTM1缺陷型频率为41.51%(22/53),二者有统计学差异(P=0.001)。当化疗有效时携带GSTM1功能型的鳞癌、小细胞癌患者生存时间(中位生存期分别为42个月和14个月)比携带GSTM1缺陷型的鳞癌、小细胞癌患者长(中位生存期分别为6个月和7个月)(P<0.05);而腺癌患者,携带GSTM1功能型和缺陷型的生存时间(中位生存期分别为13个月和11个月)差异无统计学意义(P>0.05)。对于化疗无效的患者,不论GSTM1为何种基因型、病理分型如何,患者中位生存期均比较接近,生存时间没有统计学差异(P>0.05)。结论GSTM1缺陷型的患者接受化学药物治疗的效果比GSTM1功能型的患者好;采用铂类化疗方案时GSTM1缺陷型的患者化疗效果比GSTM1功能型的患者好。当化疗有效时,患者生存时间与病理分型、GSTM1基因型相关。
- 李伟英顾艳斐赖百塘汪惠
- 关键词：谷胱甘肽S-转移酶M1基因多态性肺肿瘤
- 亚甲蓝在肿瘤诊断和治疗中的应用
- 2004年
- 亚甲蓝又名次兰、次甲兰，在生物氧化中被广泛用做电子传递受体。氧化型显兰色而还原型无色。其氧化还原反应如图1。
- 赖百塘
- 关键词：亚甲蓝肿瘤诊断氧化型电子传递生物氧化
- FHIT转染人肺癌单克隆细胞的建立及对生长的抑制被引量：3
- 2004年
- 目的建立外源FHIT基因转染人肺腺癌细胞A549单克隆细胞系并初步探讨FHIT基因对转染细胞生长的抑制作用。方法构建PEGFP-FHIT真核表达载体，Lipofectamine介导转染A5d9细胞，G418筛选后，有限稀释法建立单克隆细胞系FHIT-A549和PEGFP-A549。通过RT-PCR、免疫组化和荧光显微镜下观察GFP表达来鉴定转染细胞系。细胞集落形成实验研究外源FHIT基因对A549细胞体外生长的抑制作用。结果经PCR、酶切和DNA测序证实PEGFP-FHIT真核表达载体连接正确。RT-PCR表明转染细胞FHIT-A549中有FHITmRNA表达，免疫细胞化学染色FHIT-A549细胞FHIT蛋白表达强阳性，而母系A548细胞和转空载体的PEGFP-A549细胞FHIT基因和蛋白表达阴性。荧光显微镜观察PEGFP-A549细胞可见满视野绿色荧光。FHIT-A549的集落形成率(2．6％)比母系A549细胞(50．1％)和转染空载体PEGFP-A549细胞(53．6％)明显降低(P<0．01)。结论外源FHIT基因在转染的人肺腺癌单克隆细胞系内稳定表达并对细胞的恶性生长有抑制作用。
- 张立群汪蕙赖百塘岳文涛杨学惠张春燕
- 关键词：FHIT基因单克隆转染细胞集落形成人肺癌
