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Taqman MGB探针快速定量检测VHSV方法研究: 为建立准确定量检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的实时荧光RT—PCR方法,本文在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对。随后,采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA,并以此为绝对定量标准...; 许建明张利峰王姝段向英张念之蒋一男夏春; 关键词：实时荧光; 文献传递

北京地区出口鱼类重大疫病三重实时荧光检测技术研究: 张利峰王姝许建明刘晶段向英乔彩霞张伟吴燕; 该项目针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)、传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的基因序列，设计出引物和探针，经过优化筛选，在国内外首次建立了SVCV、IHNV和VHSV的单重Taqman...; 关键词：

三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究被引量：12: 2009年; 鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus IHNV)、鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdoviridae)的3种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的3种重要病毒。通过对这3种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了3条分别针对这3种病毒的Taqman MGB探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记。以此为基础建立针对该3种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法。通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量。同时,该方法还对病毒混合感染EPC细胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑马鱼进行了检测。实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法。; 许建明段向英张念之蒋一男张利峰; 关键词：IHNV VHSV TAQMAN

Taqman MGB探针快速定量检测VHSV方法研究: 为建立准确定量检测病毒性出血性败血症病毒(viral hemorrhagic septicemia virus,VHSV)的实时荧光RT-PCR方法,本文在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对。随...; 许建明张利峰王姝段向英张念之蒋一男夏春; 关键词：实时荧光标准品; 文献传递

Taqman MGB探针快速定量检测VHSV方法的研究被引量：6: 2010年; 为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV),在VHSV-N基因保守区设计了Taqman MGB探针与引物对,随后,采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA,并以此为绝对定量标准品,建立了绝对定量(AQ)检测VHSV的实时荧光RT-PCR法(AQ-RT-PCR方法),并与世界动物卫生组织(OIE)推荐的普通RT-PCR法进行了比较。此荧光RT-PCR法特异性好,与其他鱼类弹状病毒无交叉反应。检测线性范围为10^(10)～10~2拷贝/反应,灵法度达10~2拷贝/反应。此检测灵敏度比OIE推举的RT-PCR法高出5个数量级,比嵌套RT-PCR高出1个数量级。此法是出入境检疫VHSV的有效方法。; 许建明张念之蒋一男张利峰夏春; 关键词：TAQMAN

国际间实验室禽流感能力验证样品制备技术的研究与应用被引量：1: 2008年; 通过对禽流感病毒基因序列的比较分析,在其血凝素(HA)基因保守区,设计引物,通过基因克隆,体外转录等技术,制备出病毒HA基因的RNA片段,并对体外转录的RNA进行了定量、稀释,以作为用于国际间实验室禽流感能力验证的样品,并建立了绝对定量实时荧光RT-PCR检测方法。样品的均匀性和稳定性实验结果证明了样品制备技术的可行性,并为我国首次成功组织实施国际间实验室禽流感能力验证计划奠定了基础。; 张利峰刘来福高志强许建明张鹤晓赖平安夏春; 关键词：禽流感

三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究: 鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV),鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus,VH...; 张利峰王姝许建明段向英张念之蒋一男夏春; 关键词：IHNV VHSV TAQMAN

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许建明