薛辉 作品数:106 被引量:318 H指数:10 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 解放军总医院科技创新苗圃基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 经济管理 更多>>
一种人胰岛素样生长因子Ⅱ酶联免疫分析检测试剂盒 本发明公开了属于酶联免疫检测技术领域的一种人胰岛素样生长因子Ⅱ酶联免疫分析检测试剂盒。该试剂盒由固相酶标板、人胰岛素样生长因子Ⅱ抗体、人胰岛素样生长因子Ⅱ标准品、生物素化人胰岛素样生长因子Ⅱ、亲和素标记的辣根过氧化物酶和... 颜光涛 薛辉文献传递 白介素-1β及其受体拮抗蛋白在肠缺血-再灌注所致急性肺损伤中的作用研究 被引量:12 2001年 目的 :探讨肠缺血再灌注 ( I/R)损伤时肺损伤的机制和白介素 1β及其受体拮抗蛋白 ( IL 1ra)的作用。方法 :用大鼠肠系膜上动脉夹闭造成 I/R损伤模型 ,利用放射免疫分析法测定损伤前后和各处理组血液、肺组织灌洗液中 IL 1β和 IL 1ra水平。同时采用逆转录聚合酶链反应 ( RT PCR)法测定肺组织中 IL 1β和IL 1ra m RNA的表达含量。经光镜和电镜观察肺局部白细胞浸润及组织损伤情况。结果 :I/R损伤后 6小时血液中 IL 1β和 IL 1ra有所增加 ,损伤组 IL 1β比对照组明显增加 ,而 IL 1ra不明显 ;但损伤组和对照组IL 1ra伤后 6小时比伤前自身对照组均明显增加。损伤组肺灌洗液中 IL 1β明显增多 ,而 IL 1ra不明显。肺组织中 IL 1β的 m RNA在损伤后表达明显增加 ,而 IL 1ra表达没有明显变化。经非特异性磷脂酶 A2( PLA2 )阻断剂 (氯喹和三氟拉嗪 )、血小板活化因子受体阻断剂 SR2 7417A、环氧化酶抑制剂消炎痛以及抗氧化剂愈创木酸等处理后 ,血清、肺灌洗液和肺组织中上述指标有不同程度的改变。肺内白细胞的聚集和浸润明显减少。结论 :IL 1β和 IL 1ra可能参与肠 I/R介导的急性肺损伤 ,并且和局部 PLA2 颜光涛 郝秀华 薛辉 王录焕 李英丽 石丽萍 张凯关键词:白介素-1Β 肺损伤 缺血-再灌注损伤 脂肪酸结合蛋白放射免疫分析方法的建立及初步应用 被引量:1 2004年 用人工重组的人脂肪酸结合蛋白 (FABP)多次免疫大耳白兔 ,获取高效价的FABP抗体。用氯胺T法制备12 5I-FABP ,再经SephadexG - 2 5纯化 ;抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃培养 2 4h后 ,经PR试剂分离结合和游离的标记抗原。该法测定范围 5 - 4 0 5ng/mL ,最低检出量为 9ng/mL ,批内和批间CV分别小于 6 .4 %和8.5 %。用该法测得人血清FABP含量 :健康人 (4 5名 )为 15 .6 8± 2 .91ng/mL ;重症监护病人 (4 6例 )为 72 .0 8±32 .6 4ng/mL ;心脏病患者 (73例 )为 78.95± 2 4 .83ng/mL ,明显升高。结果表明 ,本法稳定 ,简便特异 ,其灵敏度适于检出人血清FABP水平的变化。 颜光涛 张凯 薛辉 郝秀华 王录焕关键词:脂肪酸结合蛋白 放射免疫分析 重症监护 心脏病 血清 瘦素对体外培养的大鼠脑星形胶质细胞缺血缺氧耐受性的影响 被引量:6 2009年 目的研究瘦素对缺血缺氧性损伤的星形胶质细胞功能状态的影响。方法体外培养、纯化、鉴定SD乳鼠脑皮质星形胶质细胞,换用无血清低糖培养基在5%C02±95%N2密闭盒中孵育90min建立缺血缺氧损伤模型,应用RT-PCR方法验证星形胶质细胞瘦素受体Ob-Ra和Ob-Rb的表达;采用比色法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)的含量;通过免疫细胞化学方法检测胶质纤维酸性蛋白质(GFAP)的表达水平。结果缺血缺氧损伤后细胞出现严重坏死,与正常对照组比较,短型受体Ob-Ra表达无明显改变(3.87±0.13vs3.96±0.24,P〉0.05),长型受体Ob-Rb表达水平明显降低(0.52±0.01vs1.32±0.01,P〈0.05);细胞培养上清中LDH、MDA水平明显升高(709.68±47.16/)S516.13±29.08、3.94±0.36 vs 1.81±0.21,P〈0.05);细胞GFAP表达明显增强(0.122±0.016VS0.057±0.006,P〈0.05)。加入瘦素处理可维持细胞形态基本完整,与缺血缺氧损伤组比较,LDH、MDA水平明显降低,其中MDA两组间比较差异有统计学意义(3.19±0.25vs3.94±0.36,P〈0.05),GFAP表达也明显增强(0.109±0.008US0.057±0.006,P〈0.05)。结论瘦素能够明显提高星形胶质细胞对缺血缺氧损伤的耐受性,具有神经保护作用。 司艺玲 邓子辉 杨涛 林季 张凯 薛辉 郝秀华 颜光涛关键词:瘦素 缺血缺氧 互联网体外诊断及其质量控制初探 2021年 与传统体外诊断技术相比,互联网体外诊断技术在快速、便捷、易部署等方面存在明显的优势的同时,也对其本身质量控制环节提出了新的问题和要求。在互联网体外诊断领域的大量实践的基础上,本文对互联网体外诊断质量控制的“人、机、料、法、环”五环节进行分析,并与传统体外诊断技术进行对比。分析结果表明,互联网体外诊断的质量管理的要求及组成和传统方案基本一致,灵活度和智能化水平有一定提高,从而降低了对人员和环境的要求,为下一步制定具体的质量控制策略打下了良好的基础。 吴凡 冯杰 郭骁 薛辉 颜光涛关键词:体外诊断 POCT 大数据 抗-dsDNA抗体吖啶酯化学发光定量检测方法的性能验证 被引量:6 2019年 目的建立抗-dsDNA抗体吖啶酯化学发光定量检测方法并评价其性能。方法以链酶亲和素通用型磁珠为固相,通过生物素-链酶亲和素系统捕获免疫复合物,采用间接法原理建立抗-dsDNA抗体吖啶酯化学发光定量检测方法。对该方法的线性范围、灵敏度、精密度、抗干扰能力进行评价,确定该方法的正常参考值,并进行系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)临床样本检测。结果该方法抗体浓度为50~3000IU/ml时线性良好,最低检测限为1.878~2.535IU/ml(<10IU/ml),3次实验回收率均为95%~100%,准确性好;试剂检测精密度高,批内变异<5%且总变异<10%;干扰实验结果表明样本中含有1200mg/dl、150mg/dl、30mg/dl、30ng/ml、150IU/ml的三酰甘油、血红蛋白、胆红素、生物素、类风湿因子时不影响检测结果。通过检测185例正常人血清,确定正常参考值为100IU/ml,特异性达99%;检测54例SLE患者样本,其阳性率为42.6%,与ELISA参比试剂阳性率(46.3%)相似。结论此吖啶酯化学发光方法检测抗-dsDNA抗体的灵敏度高、精密性好,性能稳定,线性范围可达3000IU/ml,其检测SLE疾病的敏感性与ELISA相当,特异性为99%。检测过程仪器自动化操作,简便、快速、无污染,适用于临床。 廉倩倩 陈秀发 沙利烽 梁辰 冯杰 薛辉 颜光涛关键词:抗DSDNA抗体 系统性红斑狼疮 化学发光 食欲素-A在大鼠肝再灌注诱导的肝损伤中的变化 2009年 目的:研究食欲素-A(orexin-A)在肝再灌注时的表达变化及其与肝损伤的联系,探讨orexin-A在创伤应激反应中的作用。方法:建立大鼠70%肝再灌注模型,设立假手术和不同再灌注时间的损伤组,采用自制放射免疫分析法和试剂盒检测损伤后血浆、下丘脑orexin-A的蛋白水平和血清葡萄糖、总抗氧化能力、丙氨酸氨基转移酶,HE染色、免疫组织化学检测肝的病理学改变、orexin-A蛋白表达,RT-PCR观察下丘脑、肝orexin-AmRNA表达。结果:自制orexin-A放射免疫分析法的标准曲线形态和测量结果均良好。各再灌注组血浆、下丘脑orexin-A的蛋白水平无显著变化,损伤后期血清葡萄糖、总抗氧化能力显著升高,血浆orexin-A与血清葡萄糖、总抗氧化能力均存在显著的线性正相关;各再灌注组血清丙氨酸氨基转移酶显著升高,损伤后期肝损害显著减轻。各再灌注组肝orexin-A蛋白表达和下丘脑、肝orexin-AmRNA表达有不同程度的变化。结论:Orexin-A在肝再灌注时发生显著的表达变化,提示它参与调控肝再灌注诱导的肝损伤和内环境紊乱。 林季 颜光涛 薛辉 郝秀华 张凯 王录焕关键词:再灌注损伤 下丘脑 肠缺血再灌注损伤对血清及脂肪组织Leptin水平的影响(英文) 被引量:4 2004年 背景:近年来的研究发现脂肪组织不仅仅是脂肪的储存库,还是一种能够分泌多种功能性细胞因子的多潜能内分泌器官。Leptin是一种由脂肪组织特异性分泌的蛋白质,主要功能是抑制摄食和增加能量消耗。目的:研究肠缺血再灌注损伤对血清及脂肪组织水平的影响,探Leptin讨Leptin在急性炎症反应中的作用。设计:完全随机设计,自身及组间对照。地点和材料:本实验于解放军总医院生化研究室完成。3只雄性新西兰白兔及54只雄性SD大鼠作为实验动物。干预:免疫新西兰白兔获得Leptin抗体,采用氯胺-T法碘标记Leptin抗原,由此建立一种简便的鼠Leptin放射免疫分析法。建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型,实验大鼠随机分为组:假手术组(sham、缺血6)60min-再灌注30min组(I60-R),30I60-R90,I60-R150,I60-R240及I60-R360组,每组9只。主要观察指标:采用放射免疫分析法测量血清及脂肪组织Leptin浓度变化。结果:与损伤前自身对照组的血清Leptin水平相比,肠缺血60min再灌注损伤30min(I60-R30)组显著降低(t=2.3891,P<0.05),I60-R150组呈现增高的趋势,而I60-R360组显著增高t=-2.3437,P<0.05);与损伤后(组的血清水平shamLeptin(9.88±1.87)μg/L相比,I60-R240组呈现增高的趋势,而I60-R360组(19.43±2.84)μg/L显著增高(t=-2.8085,P<0.05); 林季 颜光涛 王录焕 郝秀华 张凯 薛辉关键词:脂肪组织 血清 肠缺血再灌注 急性炎症反应 大鼠肝缺血/再灌注对Orexin-A表达水平的影响 被引量:5 2009年 目的:研究肝缺血/再灌注(H-I/R)对食欲素-A(Orexin-A)表达水平的影响,探讨Orexin-A在创伤应激反应中的作用。方法:建立大鼠70%H-I/R模型,设立假手术和不同再灌注时间的损伤组,每组9只。采用自制Orexin-ARIA检测损伤后血浆、下丘脑Orexin-A的蛋白水平,并采用RT-PCR观察损伤后下丘脑Orexin-AmRNA表达的变化。结果:所用Orexin-ARIA的标准曲线形态和测量结果均良好。与损伤后假手术组血浆、下丘脑Orexin-A的蛋白水平相比,四个再灌注组与之均无显著差异,而缺血60min/再灌注60min(I60’R60’)组血浆Orexin-A水平显著高于I60’R360’组。损伤后I60’R240’、I60’R360’组下丘脑Orexin-AmRNA表达均显著高于假手术组和I60’R60’组。结论:H-I/R引起Orexin-A表达水平一定程度的变化,Orexin-A可能作为一种迟发的应答因子参与创伤应激后代谢紊乱的调控。 林季 颜光涛 薛辉 郝秀华 张凯 王录焕关键词:放射免疫分析 RT-PCR 姜黄素在制备治疗脑缺血再灌注损伤药物中的应用 本发明公开了属于药物制备技术领域的一种姜黄素在制备治疗脑缺血再灌注损伤药物中的应用。本发明制备脑缺血再灌注损伤模型,将姜黄素-PVP固体分散体用注射用生理盐水溶解后用于治疗该疾病模型。结果发现姜黄素能显著改善脑组织损伤和... 颜光涛 廖杰 邓子辉 薛辉文献传递