药立波
- 作品数：296 被引量：1,074H指数：16
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 一个新的抑癌基因P40的功能研究
- 我们从正常成人全脑cDNA文库中克隆得到的一个新基因。其mRNA全长为2024bp,编码一个含有357个氨基酸残基,分子量约41ku的功能未知蛋白。该基因染色体定位在14q12.1,含有16个外显子,15个内含子。由于该...
- 药立波邓艳春刘新平
- 文献传递
- 虎仗提取物白藜芦醇诱导胃癌细胞HGC27凋亡被引量：8
- 2004年
- 目的 :观察虎仗提取物白藜芦醇对胃癌细胞HGC2 7细胞周期和增殖的影响及凋亡诱导作用 .方法 :采用MTT法和软琼脂集落形成实验观察白藜芦醇对细胞增殖的影响 ,Annxin V&PI染色及流式细胞仪检测观察白藜芦醇对细胞周期的影响及诱导凋亡的作用 .结果 :MTT实验发现白藜芦醇作用HGC2 7细胞 2 4h后 ,细胞存活率显著下降 (P <0 .0 1)并呈剂量依赖性 ,软琼脂集落形成实验发现HGC2 7细胞在0 .5mmol/L白藜芦醇作用下无细胞集落的形成 ,Annxin V&PI染色及流式细胞仪检测发现白藜芦醇可引起HGC2 7阻滞于G1期 ,并可诱导HGC2 7发生凋亡 (8.39% ) .结论 :白藜芦醇可抑制胃癌细胞HGC2 7增殖并可诱导细胞发生凋亡 .
- 李莹药立波王立峰韩炯韩月恒刘新平林树新俞强
- 关键词：白藜芦醇凋亡胃肿瘤肿瘤细胞
- pWPT-GFP慢病毒载体的改构及鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的:为实现慢病毒感染后可用抗生素筛选外源基因稳定整合的细胞,我们对慢病毒载体质粒(pWPT-GFP)进行了改构。方法:将三种抗生素抗性基因(puro、hygro、neo)连同其启动子分别克隆入慢病毒载体(pWPT-GFP)。酶切鉴定载体构建正确后,将这三种改构载体分别与辅助质粒psPAX2、pMD2.G共转染293T包装细胞,收获病毒上清并感染靶细胞,使用相应抗生素筛选细胞验证抗性基因的插入。结果:成功构建了重组慢病毒载体pWPT-GFP-puro、pWPT-GFP-hygro、pWPT-GFP-neo,通过调整病毒上清的用量可以达到靶细胞100%的感染效率;用相应抗生素筛选细胞证明了抗性基因的表达。结论:我们成功改构了慢病毒载体(pWPT-GFP),从而使病毒感染后用抗生素筛选稳定整合的细胞成为可能。
- 韩腾龙王立峰张璟刘新平药立波
- 关键词：慢病毒载体改构
- 就“糜蛋白酶的制备及活性测定”相关问题的探讨被引量：2
- 2003年
- 重新定义糜蛋白酶的活性单位以及改进书写格式.①将酪氨酸进行一系列的倍比稀释和Folin一酚试剂呈色反应来制定标准曲线;②采用酸提取和硫酸铵分段盐析从猪胰腺组织中分离、纯化糜蛋白酶;③活性测定是通过酶作用于底物依生成产物量来间接了解酶活性.将在pH 7.4、温度25 ℃时,保温10 min能使底物酪蛋白水解出5 μg酪氨酸的糜蛋白酶量规定为一个活性单位.经改进后可读性、操作性强,易于掌握;书写格式明确、层次分明,一目了然.
- 王国华陈志阳杨志福刘新平药立波
- 关键词：糜蛋白酶酶活性酪氨酸
- 培养人晶状体上皮细胞衰老模型的建立
- 张自峰周健惠延年张健刘新平药立波
- 一种新的丝氨酸蛋白酶ESP30的表达及其多克隆抗体的制备被引量：6
- 2005年
- 目的:在大肠杆菌中表达ESP30蛋白,并制备兔抗ESP30抗体。方法:从嗜水气单胞菌基因组中扩增ESP30基因序列,并克隆入非融合表达载体pDH2中,在温度诱导下,表达目的蛋白,以表达的ESP30作为免疫原免疫家兔制备抗ESP30抗血清,抗体效价及特异性分别用ELISA和Westernblot法鉴定。结果:在大肠杆菌中高效表达相对分子质量(Mr)约为66000的ESP30蛋白。ELISA法检测抗血清的效价可达到1∶128000,Westernblot分析抗血清可与原核表达的ESP30蛋白特异结合。结论:成功地制备兔抗ESP30的抗血清,为进一步研究ESP30蛋白的结构和功能奠定了基础。
- 张莹莹李福洋张文红张健黄勇刘新平药立波
- 关键词：嗜水气单胞菌抗体
- PH结构域的结构和功能研究进展被引量：2
- 1998年
- ＰＨ结构域是一种存在于多种信号转导蛋白和细胞骨架蛋白中的大约由１２０个氨基酸组成的功能性区域．不同蛋白质中的ＰＨ结构域在一级结构上的同源性并不很高，但其空间结构中肽链主链的折叠方式基本相同，而主要差别存在于其中的三个可变环上，含有这些环的侧面带有正电荷，被认为可能是其配体的结合部位．目前已知的配体有Ｇ蛋白βγ亚单位（Ｇβγ）、蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）和磷脂酰肌醇衍生物（ＰＩＰ２或ＩＰ３），所以ＰＨ结构域可能介导信号蛋白与这些分子间的相互作用，参与细胞信号转导网络的构成．
- 王吉村药立波
- 关键词：PH结构域信号转导蛋白激酶CG蛋白
- 白藜芦醇联合5-FU对人乳腺癌细胞系MCF7的促凋亡作用被引量：6
- 2006年
- 目的:研究白藜芦醇联合5FU促进人乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用.方法:4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37)与不同浓度的白藜芦醇或/和5FU共孵育48h,MTT法检测细胞存活率,并用相差显微镜观察细胞形态学改变.用流式细胞术(检测细胞凋亡相关指标AnnexinV/PI)和Hoechst33258染色检测细胞凋亡.结果:白藜芦醇能够不同程度地抑制4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37)的生长.白藜芦醇对MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37细胞的IC50(半数抑制浓度)分别为65,207,139和213μmol/L.单用5FU对MCF7细胞的IC50为13μmol/L,联合使用5FU和白藜芦醇的IC50分别为9μmol/L和3μmol/L.与单用组相比,65μmol/L白藜芦醇和13μmol/L5FU联合使用后,MCF7细胞AnnexinV水平升高.Hoechst33258荧光染色和流式细胞术分析MCF7细胞的结果一致.结论:白藜芦醇与5FU合用可协同促进MCF7细胞凋亡,提示白藜芦醇可能用作治疗乳腺癌的二线化疗药.
- 李燕邢克飞李福洋汪云药立波刘新平
- 关键词：白藜芦醇化疗细胞凋亡乳腺癌
- p38 MAPK在LPS诱导牙龈成纤维细胞表达uPA中作用的研究被引量：4
- 2002年
- 目的 :研究 p38MAPK在LPS诱导牙龈成纤维细胞表达uPA中的作用。 方法 :采用West ernblotting观察LPS对牙龈成纤维细胞内 p38MAPK活性的影响 ;蛋白激酶活性实验观察SB2 0 35 80对 p38MAPK活性的抑制作用 ;Northernblotting观察SB2 0 35 80对LPS诱导uPA表达的影响。 结果 :LPS能够迅速地激活牙龈成纤维细胞内 p38MAPK的活性 ;SB2 0 35 80能够有效地抑制牙龈成纤维细胞内的 p38MAPK的活性 ;经SB2 0 35 80处理后 ,LPS对uPA的诱导作用受到显著的抑制。结论 :LPS通过p38MAPK信号转导途径诱导牙龈成纤维细胞表达uPA。
- 陈健牛忠英药立波
- 关键词：牙龈成纤维细胞内毒素脂多糖尿激酶型纤溶酶原激活剂
- MRG15的克隆及其在正常和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达被引量：10
- 2005年
- 目的克隆死亡因子相关基因15(MRG15)并研究其在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达,比较二者的差异。方法用改良的消减杂交法克隆死亡因子相关基因15,地高辛标记MRG15cDNA片断制作探针,用原位杂交法研究其在晶状体前囊膜切片上的表达,并作统计学处理。结果克隆到了死亡因子相关基因15的cDNA片断,长约639bp,死亡因子相关基因15在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达;经统计分析,其在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达高于其在正常晶状体上皮细胞中的表达。结论MRG15在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达;在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中,其表达较正常晶状体增高,提示其可能在白内障的发生中起重要作用。
- 刘燕周健刘新平药立波苏景宽惠延年
- 关键词：MRNA年龄相关性白内障晶状体上皮细胞
